Способ определения адгезионных свойств клеток эпителиальных мембран

Способ определения адгезионных свойств клеток эпителиальных мембран

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

авивЂ

ПЯТЕНТЖ- Яй бнблнотена МбА

А Н

ОПИС Е

ИЗОБРЕТЕН Ия

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено09.09.75 (21) 2170867/13 с присоединением заявки № (51) М. Кл.-

С 12 К 1/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет (43) Опубликовано05.12.76.Бюллетень №45 (53) УДК 578.082. .1 (088.8) (45) Дата опуоликования описания 28.02.77 (72) Авторы изобретения

A.Ã. Меликянц и A.Ã. Маленков

Научно — исследовательский институт по биологическим испытаниям химических соединений (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДГЕЗИОННЫХ СВОЙСТВ

КЛЕТОК ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ МЕМБРАН

Изобретение относится к области медицины, в частности к способам определения адгезионных свойств биологических мембран, Известен способ Определения адгезии клеток в биологическом материале путем разрушения межклеточных контактов и отрыва клеток с поверхности образца струей жидкости определенной силы (11.

Однако известный способ не позволяет изучать изменения отдельных структурных 10 элементов межклеточного контакта.

11ель изобретения — возможность изучения изменения отдельных структурных элементов межклеточного контакта.

Достигается это тем, что по предлага- 15 емому способу эпителиальной тканью разделяют две солевые среды, затем через ткань пропускают поток жидкости под гидростатическим или осмотическим давлением и регистрируют изменение величины и формы20 потенциала, создаваемого потоком жидкос— ти при прохождении через ткань, Способ определения адгезионных свойств клеток эпителиальных мембран осуществляют следующим образом. 25

Образцом эпителиального пласта разделяют два солевых раствора. Затем с помощью осмотического или гидростатического давления создают поток жидкости, направленный из раствора, омывающего мукозную сторону эпителия, в раствор на серозной стороне.

При этом на образце ткани возникает потенциал, который измеряют электрометром. 3аnaca показаний электроме ра ведут, например, на самопишущем потенциометре. Вели— чина и форма потенциала отражает величину механической связи и вязко-эластичныэ свойства отдельных структурных элементов контакта и межклеточной среды.

Пример 1.

Оценка величины механической связи отдельных структурных элементов межклеточного контакта эпителиального пласта тонкой кишки.

В опыт берут белых беспородных крыс, весом 1 5 0-2 00 т

Вскрывают брюшную полость, вырезают сегмент тонкой кишки, освобождают его от брызжейки, промывают и надевают с одной стороны на канюлю диаметром 3-4 мм. На

538023 та.

Составитель В. Остапчук

Редактор Н. Петрова Техред О. Луговая КорректорВ Зорина

Заказ 5670/15 Тираж 555 Подписное

БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент". г. Ужгород, ул. Проектная, 4 противоположную сторону вырезанного препарата накладывак,тлигатуру так, что образуется мешочек, подвешенный на канюле.

Этот мешочек заполняют солевым раствором и помещают во внешний объем того же раст-g вора Затем во внешнем объеме (со стороны серозы) повышают осмотическое давление добавлением вещества, не проникающего через эпителий тонкой кишки (например, сахарозы), Осмотическое давление вызывает IO поток жидкости из раствора, омывающего мукозную стороцу, в раствор на серозной стороне .

Под влиянием потока жидкости концентрации катионов и анионов по обеим сторонам эпителиального пласта изменяются неодинаковым образом, в результате чего возникает трансэпителиальный потенциал.

При давлении до Р -0,050-0,060 осмо- 20 моль потенциал быстро достигает своего стационарного значения. При P ) Р потенциал сначала быстро возрастает, достигает максимума, а затем падает за время Г к новому, стационарному значению, При этом, 25 по мере увеличения давления максимальное значение потенциала увеличивается в линейной пропорции, а стационарное значение— в нелинейной. Нелинейный рост стационарного значения начинается при давлениях

Р =0,250-0,300 осмомоль,Придавлении Р имеет место расхождение клеточных мембран соседних клеток в области из структур межклеточного контакта — зоны простого соединения. 35

При давлении P расходятся клеточные мембраны в области другой структуры конгакта — зоны плотного соединения.

Полу=.енные результаты согласуются пол- 40 ностью с данными электронной и световой микроскопии и позволяют сделать следующий вывод: величина механической связи плотного соединения в

Оэ2 50-Оэ300 45

Оэ050-Oю060 в 5 раз больше механической связи простого соединения, Пример 2.

Оценка вязко-эластичных свойств межкл точного контакта эпителия тонкой кишки крыс.

Условия опыта и методика измерения те же, что и в примере 1. Регистрируют величину и форму потенциала, возникающего в ответ на приложенное к серозной поверхности эпителия осмотическое давление 0,200 осмомоль. Затем в солевые растворы, омывающие эпителий, добавляют ЭДТА и инкубируют препарат в течение 30 мин.

После этого опять регистрируют величину и форму потенциала. При этом время установления стационарного состояния Г уменьш ется в 5-6 раз по сравнению с нормой. Время Г характеризует вязко-эластичные свойства зоны простого соединения.Следовательно, ЭДТА изменяет вязко-эластичные свойства межклеточного контакта, удаляя кальций из межклеточного пространства.

Приведенные примеры показывают возможность прогнозирования биологической активности химических соединений по их действию на адгезионные свойства мембран клеток животных в области межклеточного контакФормула изобретения

Способ определения адгезионных свойств клеток эпителиальных мембран путем механического воздействия на эпителиальную ткань, отличающийся тем, что, с целью возможности изучения изменения отдельных структурных элементов межклеточного контакта, эпителиальной тканью разделяют две солевые среды, затем через ткань пропускают поток жидкости под гидростатическим или осмотическим давлением и регистрируют изменение величины и формы потенциала, создаваемого потоком жидкости при прохождении через ткань.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Авторское свидетельство ¹ 261643,МКИ

А 61 К 27!02, 13.01.70 (прототип).