Способ выделения нуклеотидов из микроорганизмов

Способ выделения нуклеотидов из микроорганизмов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С А Н- И Е (I) 5409I2

ИЗОБРЕТЕНИЯ (,с аз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВНДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву ,(22) Заявлено 02.09.74 (21) 2059389/13 (51) М. Кл. С 120 13/06 с присоединением заявки №

ГосУдарствеиный KOMHTBT (23) Приорите г

Совета Мииистрав СССР по делам изобретеиий Опуоликовано 30.12.76. Бюллетень № 48 (53) УДК 612.398.145,1 (088.8) и открытий

Дата опубликования описания 08.02.77 (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

С. И. Аксенов и Л. Н. Сосунова

Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. М. В. Ломоносова (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ НУКЛЕОТИДОВ

ИЗ МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение может найти применение в медицине, микробиологической промышленности, сельском хозяйстве для оценки степени осемененности воды, воздуха, помещений, биологической активности почв.

Известен способ выделения нуклеотидов из микроорганизмов путем обработки микробной биомассы кипящей водой и отделения клеток от супернатанта (1).

Однако известный способ не обеспечивает высокого выхода нуклеотидов при выделении их как из прокариотов, так и из эукариотов.

С целью повышения выхода нуклеотидов при выделении их как из прокариотов, так и из эукариотов микробную биомассу предварительно высушивают, например, лиофильно.

Пр и м ер. Берут несколько миллилитров культуры дрожжей Сапйаа utilis или бактерий Escherichia coli, или другой культуры, отмытой от среды и суспендированной в дистиллированной воде, быстро замораживают, например, жидким азотом и высушивают в вакуу ме.

К 4 мг навеоки полученной сухой культуры быстро добавляют 4 мл кипящей дистиллированной воды. Смесь взбалтывают, затем в течение 5 мин центрифугируют при 5000 об/мин и 0 С, отделяют клетки от супернатанта и до. водят рН до 7,8.

0,25 мл супернатанта берут на определение содержания одного из нуклео гидов-АТФ известным биолюминесцентным методом. Полученный сигнал в случае использования Candida

ntilis соответствует 1640 мкг АТФ, а в случае использования Esch. coli — 560 мкг АТФ на 1 г сухой массы образца.

Предлагаемый способ обеспечивает количественный вы од одного из нуклеотидов-АТФ из исследованных культур в 2 — 4 раза больше, чем полученный известным способом.

15 Формула изобретения

Способ выделения нуклеотидов из микроорганизмов путем обработки микробной биомассы кипящей водой и отделения клеток от супернатанта, отличающийся тем, что, с

2О целью повышения выхода нуклеотидов при выделении их как из прокариотов, так и из эукариотов, микробную биомассу предварительно высушивают, например, лиофильно.

Источники информации, принятые во вни2» мание при экспертизе:

1. methods in Enzimology. Hew Jork.

АсаЬетп|с Press. 1957. оl. 3, р.р. 785 — 805