Способ ферментной дезинтеграции биомассы дрожжей

Способ ферментной дезинтеграции биомассы дрожжей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

<11) 542502

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Допол интел ьное к а вт. свид-ву (22) Заявлено 29.05.75 (21) 2139368/13 (51) М. Кл А 23J 1/18

С 12Р 13/06 с присоединением заявки №

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 15.01.77. Бюллетень ¹ 2

Дата опубликования описания 21.03.77 (53) УДК 663.14(088.8) (72) Авторы

I I 30 0 P CT0 I I I I 5i

В. A. Мосин, Г. Н. Максимова и Г. И. Воробьева

Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белка (71) Заявитель (54) СПОСОБ ФLPMEHTHOA ДЕЗИНТЕГРАЦИИ

БИОМАССЫ ДРОЖЖЕЙ

Изобретение относится к микробиологичеcKolI промыш ICIIIIOcTII II может оыть использовано для дезинтеграции, т. е. разрушения клеток микроорганизмов, например дрожжей, III ipaIueiiiiI Ix»a среда.; с очищенными 5кидкими парафинами.

Ранее оыли описаны двухстадийные cIIOcoбы дезинтеграции клеток (механический и химический), в которых на первой стадии биомассу обраоатывают ацетоном или спиртом с )0 целью ооезвоживания li облегчения последующего механического или химического разрушения клеток. Так, известен способ, предусматривающий промывку влажного клеточного материала сухим ацетоном для полного уда- 15 ления воды. Затем обезвоженный клеточный материал обрабатывают в кавитационной мельнице при 7 — 10"C в хлористом метилене (l j Согласно другому известному способу дрожжи, полученные культивированием на уг- 20 леводороде, обрабатывают органическим растворителем, в частности спиртом, содержащим

1 — 1 атома углерода, а затем обезвоженные дрожжи подвергают щелочной обработке при

50 — 90"С (2J. 25

Известен также одностадийный способ разрушения дрожжевых клеток, согласно которому для расщепления полисахаридов оболочек дрожжей используют ферментные препараты, выделенные из различных микроорга- ЗО низмов, таки ., как Trichoderma, Aspergillum, 15enicillium (31. При этом сырье или высушенные на воздухе дрожжи погружают либо в водный, в частности солевой экстракт фильтрат продуцируемого микроорганизма, .щбо в раствор ферментных препаратов, предварительно выделенных из указанных экстратов осаждением сульфатом аммония, этиловым спиртом или ацетоном, Ii выдерживают для дезинтеграции клеток в течение 20 — 72 ч.

I-.åä0ñòàTê0ì известного одностадийного способа является незначительная эффективность действия ферментных препаратов на интактные, т. с. живые клетки, в связи с чем требуется значительное время для их дезинтеграции.

Цель изобретения заключается в интенсификации процесса ферментной дезинтеграции биомассы дрожжей. Поставленная цель дости5 ается тем, что разрушение клеток проводят в присутствии ацетона в количестве 0,5—

10 оо. 1О.

iIpepлаггемый способ осуществляют следующим образом. дрожжевую суспензию с концентрацией дрожжей 20 — 400 г/л нагревают до 30 — 55 С, добавляют 0,5 — 10 oo.o/o ацетона прп перемешиванпи среды и добавляют ферментные преllараты, разp) ша10щие стенки клетОK Mикроорганизмов, например Пектаваморин П-10Х

542502

Формула изобретения

Составитель Г. Максимова

Корректор В. Петрова

Тс.;рсд И. Карандашова

1тсдактор Т. Девятко

Заказ 332/3 Изд.. м 213 Тираж 609 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров ГСГР по делам изобретений и огкрытий

113035, Москва, К-35, Рауп)скан иаб, д. 4 5

Типография, пр. Сапунова, 2

Ферментативный гидролиз проводят в течение

2 — 6 ч при рН 4,0 — 7,0; расход ферментного препарата составляет 5 — 15 мг на 1 r биомассы микроорганизмов. В процессе может быть использован также любой литический фермецтный препарат гликаназного или комплексного действия, который проявляет протеол1 тическую, амилолитическую или гликаназну ю а ктив ность.

Указанные препараты выделяли пз культуральной жидкости или биомассы различных микроорганизмов, относящихся, например, к родам Actinomycetes, Streptomyces, Aspergil lus.

Предлагаемый способ обеспечивает ускорение разрушения клеток микроорганизмов в

2 — G раз.

Пример 1. К 8 л суспензпи дрожжей Candida guilliermondii Н-542 с концентрацией

200 г/л прессованных дрожжей добавляли последовательно при перемешивании 400 мл ацетона (5 об.%) и 250 мл 9%-ного раствора

Пектаваморина П10Х. Смесь выдерживали при 37 С и рН 5,0 при перемешивании в течение 2 ч 45 мин. Затем отбирали пробу и по приросту углеводов в глюкозных эквивалентах по антрону определяли степень разрушения оболочек клеток. Прирост углеводов составлял 1100 мкг/мл. Общее содержание углеводов в биомассе — 32 г, т. е. степень разрушения клетки составила 27,5 /о.

Пример 2 (контроль) . К 8 л суспензии дрожжей Candida guilliermondii Н-542 с концентрацией 200 г/л прессованных дрожжей добавляли прп перемешивании 250 мл 9%-ного раствора Пектаваморина П-10Х. Смесь выдерживали при 37 С, рН 5,0 при перемешиванин в течение 2 ч 45 мин. Прирост углеводов составил 216 мкг/мл. Общее содержание углеводов в биомассе — 32 r, т. е. степень разрушения клетки составила 5,4%.

Пример 3. К 19 мл суспензии дрожжей

Candida guilliermondii НП-4 с концентрацией

70 г/л прессованных дрожжей прн перемешиванин последовательно добавляли I мл ацетона и 1 мл 0,03 -ного раствора очищенного ферментного препарата Пектаваморина

П-10Х. Смесь выдерживали при 37 С и рН 5,0

5 при перемешивании в течение 2 ч. Затем отбиралн пробу и по приросту углеводов в глюкозных эквивалентах по антрону определяли степень разрушения оболочек клеток. Прирост углеводов составил 126 мкг/мл. Общее содер10 жание углеводов в исходной биомассе

32 мг, т. е. степень разрушения клеток составила 7,5%.

Пример 4. К 19 мл суспензип дрожжей

Candida guilliermondii НП-4 с концентраци15 ей 70 г/л прессованных дрожжей при перемешивании добавляли 1 мл 0,03%-ного раствора очищенного ферментного препарата Пектаваморина П-10Х. Смесь выдерживали при 37 С, рН 5,0 при перемешиванип в течение 2 ч.

20 Прирост углеводов составил 60 мкг/мл. Обгцее содержание углеводов в исходной биомассе — 32 мг, т. е. степень разрушения клеток составила 3,8%.

Т

Способ ферментной дезинтеграции биомассы дрожжей, предусматривающий обработку

30 биомассы ферментным препаратом литического действия, например Пектаваморпном

П-10Х, отличающийся тем, что, с целью интенсификации процесса, обработку биомассы ферментным препаратом проводят в при35 сутствип ацетона в количестве 0,5 — 10 об. /о.

1 1сточпикн информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Авторское свидетельство № 246525, 40 М. Кл. А 23J 1/18, 1968.

2. Патент Франции № 2216928, М. Кл.

А 23J 3/00, 1974.

3. Патент Франции № 1333739, М. Кл.

С 12С, 1963.