Способ выявления ферропротеидов

Способ выявления ферропротеидов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

7 (II) Союз Советских

Социалистических

Республик

ИЗОБРЕТЕН ИЯ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 17.04.75 (21) 2125496/13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (43) Опубликовано 05.02.77. Бюллетень ¹ 5 (45) Дата опубликования описания 17,03.77 ;51) И л. - С 01 N 33 16

Государственный комитет

Совета Министров СССР (53) УДК 612.1182 (088,8) по делам изобретений и открытии (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

П. Г. Прокопенко, А. A. Терентьев и Л. H. Грачева

Второй Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н. И. Пирогова (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ФЕРРОПРОТЕИДОВ

Изобретение относится к медицинской биохимии и может быть использовано в лабораторных и клинических исследованиях для определения белков.

Известен способ выявления ферропротеидов в биологических жидкостях путем электрофореза (1).

Целью изобретения является расширение диапазона определяемых белков.

Достигается это тем, что электрофореграмму обрабатывают одновременно 1 — 2 н. соляной кислотой и осаждающе-окрашивающим реактивом на железо, при этом в качестве осаждающе-окрашивающего реактива используют желтую или красную кровяную соль.

Способ осуществляют следующим образом.

Сыворотку крови донора подвергают дискэлектрофорезу в полиакриламидном геле.

Столбик геля погружают в реактив, приготовленный непосредственно перед употреблением из равных объемов 2",в-ного водного раствора желтой кровяной соли и 2 н. раствора соляной кислоты, через 12 ч инкубации в темноте при 4 C отмывают 1 н. раствором соляной кислоты. Зона трансферрина окрашивается в голубой цвет. Полностью аналогичны условия выявления ферропротеидов, содержащих двухвалентное железо, только проявляющий реактив готовится пз равных ооъемов 10 „ -ного водного раствора красной кровяной соли и 2 н. соляной кислоты. Для выявления общего железа в ферропротеидах проводят окраску на двухвалентное железо с одновременным восстановлением трехвалентного железа до двухвалентного, что достигается погружением геля с электрофоретически разделенными белками в раствор, состоящий пз равных объемов 10 !о-ного водного раствора красной кровяной соли и

10% -ного раствора метабисульфита натрия или калия, приготовленного на 2н. растворе соляной кислоты.

15 Используя указанные способы окраски в сыворотке донора удается выявить трансферрнн, белок в зоне макроглобулинов, а ь экстрактах различных тканей ферритин и показать его гетерогенность.

20 Результаты определения ферропротепдо можно читать па следующий день после постановки электрофорсза. Проявленную электрофореграмму можно сфотографировать и проденситометрирогать, количественно опре25 делив содержание ферропротепдов по интенсивности окраски. Эти электрофореграммь можно долго сохранять в качестве документального подтвержде".:,.я проведенного исследования. Для этого электрофореграмму отмывают в течение трех суток 1 н. раствором со545926

Составитель С. Малютина

Техрсд В. Рыбакова

Корректор В. Гутман

Редактор Л. Гончарова

Заказ 124/295 Изд. Ме 436 Тираж 1054 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, )К-35, Раушскап наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фил. пред. <<Патент» ляной кислоты, меняя его раз в сутки, при 4 С в темноте. Фон полностью обесцвечивается и электрофореграмма хранится неограниченно долго.

Предлагаемый способ отличается простотой и высокой объективностью и может найти применение для изучения генетических групп трансферритов человека и животных, для выявления ферропротеидов в биологических жидкостях различного происхождения.

Формула изобретения

1. Способ выявления ферропротеидов в биологических жидкостях путем электрофореза, отличающийся тем, что, с целью расширения диапазона определяемых белков, электрофореграмму обрабатывают одновре5 менно 1 — 2 н. соляной кислотой и осаждающе-окрашивающим реактивом на железо.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что, в качестве осаждающе-окрашивающего реактива используют желтую или красную кровяную соль.

Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:

1. С11п. Chim. Acta, 1958, 3, с. 523 — 530.