Способ получения антигена для диагностики инфекционного заболевания овец, вызываемого

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С А Н И Е и154665!

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВМДЕТЕЛЬСТВУ

Саюэ Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 09.08.73 (21) 1956414/15 с присоединением заявки № (51) М Кv э С 12К 1/04

А 61В 10/00

Совета Министров СССР по делам иэобретений и открытий (53) УДК 616-07(088.8) Опубликовано 15.02.77. Бюллетень K 6

Дата опубликования описания 31.03.77 (72) Авторы изобретения

П. A. Триленко, Т. H. Огородникова, Л. И. Комиссарова и H. Н. Колодий

Ленинградский ветеринарный институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ

ИНФЕКЦИОННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ ОВЕЦ, ВЪ|ЗЪ|ВАЕМОГО BR. OVIS

ГосУдаРствеииый комитет (23) Приоритет

Изобретение относится к биологической промышленности, точнее к полученшо ветеринарных препаратов. В особенности оно касается способа получения нового антигена, используемого в реакции длительного связывания комплемента (РДСК) для диагностики инфекционного заболевания овец, вызываемого бруцеллой овис.

Известны способы получения антпгенов, используемых для диагностики инфекционного заболевания овец, вызываемого бруцеллой овис, с применением механических, термических и ультразвуковых методов (1).

К их недостаткам следует отнести слабую иммунологическую активность и наличие повышенных аптикомплементарных свойств препаратов антигена.

Наиболее близким по технической сущности из известных способов получения антигенов является способ получения антигена из суспензии бруцелл путем ее прогревания при 60 С в течение 2 ч и пос. едующего центоифугирования (2).

Целью изобретения является создание способа получения диагностического препарата (антигена) для диагностики инфекционного заболевания овец, вызываемого бруцеллой овис, методом РДСК, обеспечивающего повышение специфической и иммунологической активности антигена. Поставленная цель достш.ается тем, что в качестве культуры берут штаммы Br, ом1з X" 424 и Вг. ovis ¹ 19, нагревание их проводят в кипящей воде в течение

2 — 2,5 ч с последующим четырехкратным за5 моражпванием — оттаиванием бакмассы.

Антпген, полученный даниным способом, обладает высокой чувствительностью, специфичностью и не обладает антикомплементарными свойствамп.

10 Использование в РДСК антнгена позволяет выявлять на различных стадиях животных, больных инфекционным заболеванием, вызываемым бруцеллой овпс.

Процент выявления больных животных при

15 однократном исследовании составляет 95 и более.

Способ получения антигена заключается в следующем.

Для получения указанного антигена приме20 няются штаммы Вг. ovis № 424 и Вг. ovis № 19, выделенные от баранов, больных инфекционным заболеванием, вызываемым бруцеллой овцс.

Вь:рацнвание штаммов Br. ovis и получе25 . .,:е бактерпйной массы, являющейся основой ,. я дальнейшего получения антнгена, производится на плотном печеночно-глюкозо-гли-!,åðèèoâoì агаре с добавлением 20% стерильной сыворотки крови крупного рогатого скота, 30 " присутствии 10 — 20% углекислого газа, 546651

Формула изобретения

Составитель А. Алексеенок

Техред Е. Жаворонкова Корректор Т, Добровольская

Редактор Т. Девятко

Заказ 359/16 Изд. № 212 Тира>к 589 Подписное

Ц11ИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раугпская наб., д. 4/5

Типография, »р. Сапунова, 2

Смытую стерильным физполоп1чсскпм раствором бактерийную массу в ко1щептрации

90 — 100 млр. микробных тел в 1 мл прогревают в кипящей водяной бане 2 — 2,5 ч, затем производят четырехкратное замора>кивание при 18 — 20 С, с последующим оттаиванием прп

+37 — 38 С, выдерживают в течение 6 с т при

+4, +6=С, при периодическом (8 10 раз в сутки) встряхивании.

Суспензированную массу центрифугируют в течение 3 ч, затем фильтруют и полученную надосадочную жидкость (антиген) 1 опссрзвнруют, для чего в антиген добавляют 0,3% формалина.

Использование метода оптимального рс>кима нагревания с последующим многокрап1ым замора>киванием и оттаиванием позволяет получить в экстракте наиболее активное и пммунологическом отношении вещество, 1!е обладающее самозадер>кивающими (в РДСК) свойствами.

Проверка антигена на активность, специфичность и антикомплементарность производ! ITc51 в реакции длительного связывания комплемента (РДСК) .

Способ получения аптигена для диагностики пифек 1!!o!1!Io! заболевания овец, вызываемого Вг. ovis, в РДСК, включающий выращивание культуры возбудителя и нагревание ее, 1о отл и и и ю1ц и и ся тем, что, с целью повышения специфичности и иммунологической активности аптигена, в качестве культуры берут штаммы Вг.ovis № 424 и Вг. ovis № 19, нагрева не пх проводят в кипящей воде в течение

15 2 — 2,5 с последующим четырехкратным замора>кивание11 — OTTBI!BBHI бакмассы.

Исто. ники информации, принятые во внима;!пе при экспертизе: !. Биологические и химиотерапевтические

2О ветеринарные препараты, М., 1963, с. 357—

365.

2. Я. Е. Коляков, Ветеринарная микробио,«)и" я Ч 9 >5 с 1 !37