Способ определения возраста умершего

Способ определения возраста умершего

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

<;:.. сг чнзеч . Ф фп T gú н т :;, - т ° ю(y,. p Q

OllHC ИЕ

Союз Советских

Социалистических

Республик (11) 551024

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 13. 12. 74 (21) 2084736i 13 с присоединением заявки Хе (23) Приоритет— (51) М. Кл.

A 61 В 10 00

Государственный комитет

Совете Министров СССР оо делон иэооретений и открытий (43) Опубликовано 25.03.77.Бюллетень М 11 (53} уДК 572.511,4(088.8 ) (45) Дата опубликования описания28 06 77

В. М. Жминченко, Н. Н. Пятницкий, Н. П, Сут оняева и С. Г. Ахметкалиев (72) Авторы изобретения

Институт питания АМН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВОЗРАСТА УМЕРШЕГО

Изобретение относится к судебной медицине и может найти применение для установления возраста неопознанных трупов с сохранившимися мягкими тканями грудной полости.

Известен способ определения возраста умершего по величине зон роста и окостенения трубчатых костей, костей стопы и кисти и состоянию швов черепа (1), Целью изобретения является повышение 10 точности исследования.

Это достигается тем, что в интиме аорты определяют концентрацию общего холестерина, плотность клеточной заселенности и толщину, после чего по таблицам определяют (5 возраст умершего.

Участок грудной аорты с видимонеизменной интимой размером 4 х 2 см вырезают в области передне-боковой стенки на уровне отхождения первой пары межреберных ар-20 терий и режут на два смежных участка. От первото участка отделяют при помощи пинцета и ножниц видимонеизмененную интиму от медии. Кусочек интимы взвешивают и навеску интимы помещают в чистую пробир- 2S ку, заливают 50-кратным объемом раствора Блюра (3 ч. этилового спирта и 1 ч диэтилового эфира), Экстракция липидов идет при комнатной температуре (в темноте) s течение 6-7 суток. Общий холестерин определяют по общепринятой методике.

Второй участок аорты фиксируют в

10%-ном нейтральном формалине, проводят через спирты, после чего заливают кусочек в парафин и приготовляют срезы на микротоме (толщиной 4-5 мкм).

Для гистологического исследования срезы окрашивают гематоксилином — эозином.

Плотность клеточной заселенности интимы грудной аорты определяют как среднее количество ядер клеток интимы, приходящихся на одно поле зрения (обьехтив 90 имм.), 2 в пересчете на плошадь в 1 мм

Для измерения толщины интимы срезы окрашивают резорцин-фуксином Вейгерта или любой другой краской по методике, выявляк)шей эластичные мембраны, При помощи оклярмикрометра измеряют толщину интимы, Для уменьшения ошибки при определении возраста пробы дублируют.

551024!

О полу енным измерениям и соответстВУтСШПК! фОРМУЛам ДЧЯ ТОЕХ ПОКОЗаТЕЛЕй Ha, t i f возоаст интимы Io каж дому из иссле

-Сват!Иых показателей:

От!!деtfc-лен!!е возоат fo BIO содеожа нию

О .л.:; с .Orle. (.т -oil t-.ä в интиме:

;-, (e X Е,О 120, (1)

Н ППГ рп!т!!Е teO p,""ттт:;Г l0 до: 9 ЛЕт; Э9, Е, — г,д- -40)- (2)

Х2 Х2 в и!tг риале возрас,a - . лег и "!арше. I0

2) Опр:-деле!Itfo ",îçðàñòà по толщине интнмь1:

= 1.48 гД -- e„-.35) (3) для лиц в интервале между 10-29 годами;

=1029 (t !, ) 1

1 для! лиц с т.-!О!тт< 3 О лет

3 ) 0t!pe =te.;!ение iозрасттт lfo !!лотности

К:!Етот1НО!! За" ;tEeIHOC I ll !IНГИМЫ; а, ° = " О (,".сг -);ОΠ— E г„1(5)

1; !1Ит< t ва Ie возоас т-! Гу! 1 О до 29 лет; — 8 . :!Д f НГ4 I00 — tet/. 6, ) (6 ) для лиц старшт: 30 лет.

ИС:КОМЬтй ВОЗрает раВЕН СрЕдНЕМу арИф..т .ТИ - .ССКО "".т -КС!!ЕРИМОНТа tt>HO ПОЛУЧС ННЫХ . ОСТР(t". ОВ Ит!ТИМЫ lie. XO!Ie OÒOтРИНУ

° 25

О;и пп!я и тимы { „!, ) и плотности кле.!ТОт1!!О. f ЗОСЕЛ:ННОС ГИ ИНТИМЫ (т ) х + 9

Ь 30

РЕКО !Е!!дуется С .ÅäóIO!Uàÿ ПОСПСдОВатЕЛЬкос.ть !!Опользова!и!я формул, если предварит! ЛЬНО НЕ.!ЬЗЯ УСтаНОВИтЬ ПРИМЕРНЫЙ ВОЗрост; полученные по трем показателям даннь!е подставллют в формулы (2), (4), (6) 55 з -,Ом случае, если экспериментальный возраст по формуле (7) оказался ниже 30 лет, Определяют возраст по формулам для трех показателей (1), (3), (5) и находят искомый возраст tto формуле (7), 40

П р И М ee p 1. ОГ!рЕдЕЛЕНИЕ ВОЗраота умершего по содержанию общего холестерин:;, видимонс:измененной интиме грудной ти рты.

От умершего берут участок аорты раз- Ы ..!т-{том 3»? см с видимонеизмененной инти.:От! в Области отхождения первой пары межреберных артерий. Интиму отслаивают от подлежащей медии и кусочек интимы взве.Нт!!!!!!с т ffa торзионных вссах (навеска долж- 50 н! быть весом не менее 150 мг). Записывают величину веса кусочка, которая необходима при расчете концентрации общего

О.-нт-:стес и а ь исследуемой пробе. Павеску т!!т!!!..:!.! t:c;,те!дают в чистую обезжиреннук 55 пробирку и:тт!ливсткт 50-кратным обьемом

: .;:. Ои 1. л!Ора (3 ч. этилового спирга и

1 ", диэтилового эфира), Экстракцию лилию; производят при комнатной температуре, 1е." тот! . течение 6-7 суток. Затем 60 фильтруют раствор через обезжиренный фильтр и пробирку с фильтром помешают в

О водяную баню при температуре 60-70 С выпаривают растворитель и в каждую пробу с экстрагированными липидами для определения общего холестерина добавляют следующие реактивы: 2 мл хлороформа, 0,5мл уксусного ангидрида, 3 капли концентрированной серной кислоты. Пробирку встряхивают 6-8 раз и оставлякт в темноте на

25 мин. Затем колориметрируют на фотоколориметре с красным светофильтром в кювете с Оабочей длиной 0,5 см. тСОНтрОЛЬ: 2 МЛ ХЛОрсфОрМа + 0.5 тМЛ уКСуСного ангидрида + 3 капли серной кислоть;.

1!Осле колориметрии вычисляют абсолютное содержание холестерина в данной пробе по предварительно построенной калибровочной кривой на основании стандартных проб с чистым холестерином. После этого абсолютI!oe содержание холестерина в данной навеске пересчитывают в мг %, По описанной выше методике в данном примере было получено, что концентрация общего холестерина в аорте М 29 была равна X = 2100 мг %. Логарифм этой величины равен 3,3222. Подставляют,гог арифм величины концентрации холестерина в формулу (2) и находят экспериметальный возраст по холестерину:

99,65 (Pp 2100 240) =99,65 (3 3222 — 2 3802) -- 99 65 О,;:i42

=93,87 года.

Искомый возраст по концентрации холестерина равен Е» = 93,87 года и превышает паспорт !й возраст равный

= 87 годам на + 7,89%.

Пример 2 . Определение возраста умершего по толщине видимонеизмененной и!!т!!Мы грудной аорты.

От умершего берут участок грудной аорты размером 2 тт 0,5 см с видимонеизмененной интимой в области отхождения первой пары межреберных артерий. Вырезают кусочек аорты для приготовления блоков и гистологических препаоатов- (1,5 0,5 см).

Фиксируют кусочек в 10%-ном нейтральном формалине в течение 5-6 дней, затем промывают в проточной воде в течение 1 суток и для обезжиривания проводят кусочек через батарею спиртов, начиная от 70О спирта, и заливают в парафин. При этом необходимо тканевый блок ориентировать строго перпендикулярно плоскости среза. Наклеивают на деревянные блоки и делают на микротоме срезы толщиной 4-5 мкм. Грезы окрашивают резорцин-фуксином Вейгерта.

Окрашенные срезы помешают на столик микроскопа и окуляр-микрометром измеряют

55 1024 толшину интимы от внутренней эластической мембраны до края эндотелия сосуда. Измеряют последовательно шагом в одно поле зрения микроскопа толшину интимы, полученные величины складывают и усредняют. 5

По описанной выше методике в данном примере было получено, что средняя толшина интимы аорты № 29 равна Ъ = 350 мкм, = 2,5441, Подставив логарифм величины толшины интимы в формулу (4), на- 10 ходили экспериментальный возраст по толшине интимы 11 = 102,9 (fg 350 - Я50 ) =

=102, 9 (2,544 1 — 1, 6990 ) = 10 2, 9 0,845 =

= 86,96.

Искомый возраст по толщине интимы равен Ъ = 86,96 и отличается от паспортного возраста 6. = 87 на 0,04 %.

Пример 3 . Определение возраста умершего по плотности клеточной заселенности видимонеизмененной интимы грудной аорты, От умершего берут участок грудной аорты размером 2 к 0,5 см с видимонеизмененной интимой в области отхождения пер» вой пары межреберных артерий. Вырезают кусочек аорты размером, соответствуюшим для приготовления блоков и гистологических препаратов (1,5х0,5 см). Фокусируют в 10%-ном нейтральном формалине 5 6 дней, затем промывают в проточной воде в тече- Зо ние 1 суток и для обезжиривания проводят кусочек через батарею спиртов, начиная с о

70 спирта, и заливают в парафин. Наклеивают на блоки и режут на микротоме срезы толщиной в 4-5 мкм. Окрашивают срезы ге- 35 матоксилиномэозином.

Окрашенные срезы помешают на предметный столик микроскопа и под иммерсией считают количество ядер интим ы, приходяшееся на одно поле зрения микроскопа. 40

Просмотр клеток ведут последовательно от эндотелия интимы вниз до внутренней эла-, стической мембраны, затем переходят на смежнь|й участок, соблюдая принятую последовательность, Считают 50-100 полей зрения и вычисляют среднее количество ядер, приходяшихся на одно поле зрения. Зная плошадь поля при данном увеличении и среднее количество ядер клеток на одном поле зрения, легко вычисляют количество клеток, 2 прихо дяши хс я на 1 мм

В примере подсчитано, что плотность клеточной заселенности интимы аорты ¹ 29 равна (;) = 420 клеток / мм, 8Я"Ц =Pg420=

=2,6232. Подставив логарифм величины плотности клеточной заселенности интимы в формулу (6) для нахождения возраста по плотности клеточной заселенности, получают: — — 81,38 (бк 4900 - 1д 420)== 81,38 (3,6902-2,6232)=81,38 ° 1,067 = 86,83 года. Искомый возраст по плотности клеточной заселенности интимы равен

=86,8 3 года, что отличается от паспортного возраста,„= 8 7 на О, 1 9 %.

Пример 4. Определение возраста умершего по трем показателям: содержанию обшего холестерина, толшине и плотности клеточной заселенности интимы грудной аорты.

Определение возраста проведено у 30 лиц, умерших в возрасте от 10 до 87 лет. Ход определения возраста по каждому показателю описан в примерах 1 — 3.

В табл. 1 определены результаты определения концентрации общего холестерина, толшина и плотность клеточной заселенности интимы и паспортный возраст.

В табл, 2 приведены сравнительные данные паспортных возрастов с экспериментально полученными возрастами по трем показателям старения интимы грудной аорты.

Из дапных табл. 2 следует, что определение возраста по трем показателям старения интимы дает наименьшую ошибку отклонения от паспортного возраста Ë1 %=9,7%, чем определение возраста по холестерину (по одному из трех показателей). Определение возраста по холестерину дает ошибку ото клонения от паспортного возраста ь4 1 =х

=14.92 %.

551024

Номер и/и.

200

84 7

159

77 6

1 16,8

275

107

2 -) 2261

350

142

90,8

124,5

508

107

510

1583

116,6

131)6

1751

13

705

782

1 798

892

212

629

1 285

279,6

955

1015

1 7

222

1322

200

796

1756

778

2000

382

268

790

577

228

1290

320

421

1900.) 4

243

485

1125

657

277

1665

273

543

376

320

1032

859

231

2100

350

420

87

2100

308

365

Паспортный возраст, гг

Холестерин интимы, мг

Таблица 1.

2389

2127

2342

1664

55 1024

1- С c() сО и сО

+ ) ) + + сО (О

+ + l < + ((и

co co «u

CD c CD сО (О

CD w w w c

CO (О си сО - О3 (О с (О

О3 сО 3 с 3 р3 с СО

O„D O

О3 сИ с cU cO с (О

СО O C3

1 co" со" О3" СО

1-

CO (О с3

CD „ CO 1

О3 lQ" 3" (О

CD < м

СО

C Z сi cO CD

t с3 СО Ч с3 СО CO

СО со сО О

cO Al

Я сс3 сО сО О3 а3

CD cO t СО с

СО т- 1-1 с4 сЦ

CD Я сО (O CO cO c (Q с< Я т- -/ с 3 и и ю + ю е сО g3 CD о -< 1- СО СО" О3,-

+ + - (+

fQ

СО сО CO

cu" nl сн В СО си

Ч сц (- CD cO

О3 cO

cl ru

О3 О3 . ((3 со О С3 cu (- l C co

1-/ т- Р) с1) с со с 3 со с 3 с 3 + + (Q

С) w N с3 с1 (Q с 4 с 3 с К (О i со Ро

CD cD cU т-

CO "- O CD сО CU 1- со с с 3

03

cQ т- о

1-1 с 3

-}- l

551024 со д тл Сл (VJ

С4 С4 LQJ

+ l + + с» т- т

CD о "„д" с4 л с4

+ + < I

4 с4 сО LQ о д" с- o - д со (Q cQ Г» t» со

С4 О.т Го с со со с» л со о с" о ч

LQ r t CD CG

CD со о " " г= ю" 4 а с-, 3 ы

СО 4 с CO л л cQ 4" т-1

CQ Г- O С- л со

t cQ со со со со

O cO СО сО

CD СО co cO

CD ICI 10

cQ о ю ж

l t» t t с ссо О) t

CD т т Я Я

О с4 tco со > co

oÿ

LCI с4

4" -1

С4 л т я > CQ O„CQ со с4 !

+ +

Я 3 с

Я cQ CD с 4 г: - o ! + (О со со o сц с4 щ СО -4 со

СР СС4 сО со щ ср

cQ Я (д ро с 4 1 д

Г Я со) со со o cQ o CQ CQ л

La CO С- С- cQ CO сО сО CO CO сО сО сО сО сО O л с 4 сО е а СО С- сО а О

С 4 С 4 С;4 С4 С 4 С 4 C»I С 4 л4 С 4 Ст» с4 — 1 . т- СО

Я Сл с4 с4

v J

) CD

t» сЭ о

1 с 4 со тф О со со

CQ ГICI Ж С л со со

t t

cQ cO со со с 3

CD CD

55 1024

Составитель С. Малютина

Редактор A. Бер Техред И. Асталош Корректор А. Гриценко

3а <аз 46!1 Тираж 677 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113О35, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Формула изобретения

Способ определения возраста умершего, заключающийся в определении показателей старения тканей, о т л и ч а ю ш и и с я тем, что, с целью повышения точности исследования, в интиме аорты определяют концентрацию общего холестерина, плотность клеточной заселенности и толшину, после чего по таблицам определяют возраст умершего.

Источники информации, принятые во внимание пои экспертизе:

1. "Вопросы антропологии". 1960, Ne 3, с, 1 18-129.