Способ получения модели клеточной мембраны

Способ получения модели клеточной мембраны

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

(ii) 553653

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6i) Дополнительное к авт. свпд-ву (22) Заявлено 23.12.75 (21) 2307483 !2 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 05.04.77. Бюллетень № 13

Дата опубликования описания 25.05.77 (51) М. Кл. G 09В 23/38

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий (53) УДК 371.66/67 (088.8) (72) Авторы изобретения

С. А. Баджинян и P. М. Налбалдян (71) Заявитель (54 СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОДЕЛИ КЛЕТОЧНОЙ

МЕМБРАНЫ

Изобретение относится к учебным моделям, а точнее к способам получения моделей клеточных мембран.

Известен способ получения модели клеточной мембраны, например, бимолекулярных фосфолипидных мембран (БФМ), заключающийся в нанесении фосфолипидной смеси в водном растворе КС1 на отверстие в тефлоновом наконечнике (1), Таким способом нельзя получить мембраны с ионной проницаемостью, близкой к проницаемости реальных мембран и малых размеров.

Предложенный способ не имеет этих недостатков и отличается от известного тем, что к фосфолипидной смеси добавляют белок-цитохром «с», а тефлоновый наконечник устанавливают на шприц и выдувают пленку сферической формы.

Предлагаемую модель получают из белково-фосфолипидного комплекса. При этом используют общие фосфолипиды, полученные из мозга быка и белок-цитохром «с».

Берут цитохром «с» из сердца лошади, фирмы «Реанал». Препарат предварительно восстанавливают аскорбатом и дополнительно очищают гель-фильтрацией на колонке с сефадексом С-75 и с целлюлозой ДЕ-32, собирая центральные окрашенные фракции. Опыты с высокоочищенным цитохромом «с» из коры надпочсчников дали аналогичные результаты.

Берут белково-фосфолипидный комплекс

1: 10. Растворы фосфолипидов в н-гептане (в

5 концентрации 80 мг/мл) и белка в фосфатном буфере (концентрация белков 1 — 5 10 — " м), встряхивают в течение 3 — 5 мин. Полученную смесь оставляют в холодильнике на 2 — 3 час.

За это время происходит полное отслаивание

10 водной и гидрофобной фаз, причем, по крайней мере, часть переходит в гпдрофобпую фазу за счет образования комплекса с фосфолинидами.

Берут каплю смеси белок-фосфолипид и на15 носят на отверстие в тефлоновом наконечнике, погруженном в раствор в кювете (0,1 М КС1).

Наконечник устанавливают на шприц. При помощи шприца из отверстия выдувают сферическую мембрану.

20 При описанном способе мембраны обладают следующими преимуществами перед БФМ:

1) наличие сферической формы и больших размеров (от 9 до 12 мм ), что дает возможность точнее исследовать проницаемость ио25 нов, чем на модели БФМ, 2) проницаемость названных мембран практически равна проницаемости клеточных.

3) наличие белково-фосфолипидного комплекса структурно приближает пх к биологиче30 ской поверхности клетки.

553653

Формула изобретения

Составитель Н. Улитина

Техред М. Семенов Корректор Т. Добровольская

Редактор Г. Кузьмина

Заказ 1069/15 Изд. № 20 Тираж 560 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, К-35, Раушская наб,, д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Способ получения модели клеточной мембраны путем нанесения фосфолипидной смеси в водном растворе КС1 на отверстие в тефлоновом наконечнике, отличающийся тем, что, с целью приближения свойств мембраны к реальным и улучшения ионной прон щаемости, к фосфолипидной смеси добавляют белокцитохром «с», а тефлоновый наконечник устанавливают на шприц и выдувают пленку сферической формы.

5 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

«I, Physical chemistry», v. 67, 1963, р. 534 (прототип).