Штамм lертосрirа ромоnа вгнки-6

Штамм lертосрirа ромоnа вгнки-6

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

«п555665 (61) Дополнительное к авт. свид-ву

РЦМК з

A 61 К 39/00

С 12 и 1/00 (22) Заявлено 30. 01. 76 (21) 2320672/18 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет

Опубликовано 30.01 83,Бюллетень ¹ 4

Государственный комитет

СССР, no делам изобретений н открытий ($3) УДК 616. 986.? (088. 8 ) Дата опубликования описаиия 30 ° 01. 83 (72) Авторы изобретения

Ю.A. Малахов, А.ff. Самохвалов, В.С. Соловьева, И.Г. Серегин, A.Н. Щуплико и Н.M. Иванова (71) Заявитель

Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов (54) ШТАММ LEPTOSPIRA РОИОМА ВГНКИ-6

Изобретение относится к производству ветеринарных биологических препаратов и представляет собой новый штамм лептоепир, используемый для приготовления вакцин против лептоспнроза сельскохозяйственных и промысловых животных., Высокая иммуногенная активность штаммов лептоспир, из которых изго„тавливается вакцина, является одним из основных условий, обеспечивающих получение активной вакцины против лептоспироза животных.

В настоящее время в биологической проьышленности изготавливают убитую вакцину против лептоспироза из 2439 штаммов лептоспир, относящихся к 6 серологическим группам и содер» жащую 8 штаммов серологической группы Pomona (1 ).

Недостатками известных штаммов лептоспир являются их низкая иммуногенная активность и трудоемкость процесса получения вакцины из них, связанная с необходимостью применения для их выращивания малопроизводительного баллонного метода.

Цель изобретения - получение штамма лептоспнр серологической группы Роаопа обладающего высокоактивными в иммуногенном и антигенном отношении свойствами, который можно.использовать прн приготовлении поливалентной вакцины против лептоспироза животных, заменяющий штаммы: П-148, П-4о, П-8, П-12, П-24, Гиацинт, Beга-2, П-Молдавская, импользуемые в настоящее время, и который позволя1п ет реализовать менее трудоемкий реакторный метод выращивания лептоспнр при изготовлении вакцины;

Для этого используют штамм Leptospi ra Pomona ВГНКИ-6, который выделен от подсвинка в Московской области в 1966 году и хранится в коллекции микроорганизмов Всесоюзного го-" сударственного научно-контрольного институтаа ветери нарных. препаратов.

Штамм Leptospira Pomona ВГНКИ-6 характеризуется следующими признакаMH

Морфологические признаки. Обладает характерными для лептоспир морфологическими признаками. При микроскопии в темном поле микроскопа представляет собой серебристо-белые плотные, спирали с утолщениями в виде крючков на концах. Битки спирали незаметны при увеличении в 200-.

400 раз, но они хорошо видны в элек555665 тронном микроскопе. Длина лептоспир 8-17 мк, диаметр 0,1-0,15 мкр.

Наиболее отчетливо видны при микроскопии в темном поле и менее отчетливо — при фазовоконтрастной микроскопии, невидимы при обычном освещении, плохо окрашиваются анилиновыми красками, при импрегнировании серебром становятся темно-коричневыми.

Физиологические свойства. Растет на среде, содержащей 4-5% сыворотки баранов или кроликов с фосфатно-буферной основой при рН 7,2-7 4. Мако симум роста при 26-27 С. На 510 день роста накопление 10х10

16 10 лептоспир в 1,0 мл. В последующие сроки роста происходит лизис бактериальных клеток. В жидкой среде подвижны, у них характерное быст.рое ротационное движение вокруг оси

Дни исследования после

Наименование штаммов

Второй вакцинации

Первой вакцинации

56

1:10

Pomona ВГНКИ-6

1:640

1:320

Смесь: П-148, П-4

5.

П-8, П-12, П-24, Гиацинт, Вега-2, П-Молдавская

1:10

1:15

1: 80

1: 120, 1: 320

1:80

Антигенные свойства изучали также в опыте на кроликах. Семидневную культуру лептоспир доводили сыво- 4Q роточной средой до концентрации

75000 лептоспир в 1 мл, консервировали фенолом до 0,5Ъ концентрации и вводили четырем кроликам весом 2,5 кг внутривенно по 1 мл. Через 7, 14, 45

21 и 28 дней после введения культуры у кроликов брали кровь и иссле- . довали сыворотку в реакции микроагглютинации-лизиса. При этом сравТаблица 2

Титр антител в сыворотке крови кроликов

Наименование штаммов

День после вакцинации

14

Pomona ВГНКИ -6

1!2500+500

1:830+170

1:6500+200

1:250+50

1:2500+500

1:830+170

Смесь: П-148, П-4

П-8, П-1?, It-24, Гиаци н т, Be га-.2, П -Молдавская и перемещение без полярной дифференциации .

Антигенные свойства. Щтамм Leptospi ra Pomona ВГНКИ-6 сравнивали по антигенным свойствам со смесью производственных штаммов: II-148, П-46, П-8, П-12, П-24, Гиацинт, Вега-2, II-Молдавская в опыте на овцах. Семидневную культуру лептоспир консервировали 0,5% фенола и вводили овцам внутримышечно в дозе 5,0+5,0 мл двукратно с интервалом 7 и 21 день.

При этом установили, что иммуногенные свойства штамма Leptospira Ропопа

ВГНКИ-6 в 2-5 раз выше, чем иммуногенные свойства смеси производственных штаммов.

Результаты опыта приведены в табл. 1.

Т а б л и ц а 1

1:640 1:180 1:40 нивали титр антител кроликов, которым вводили культуру штамма Leptospi ra Pomona ВГНКИ-6 и смесь производственных штаммов: П-148, П-46, П-S

П-12, П-24, Гиацинт, Вега-2, П-Мол- давская. Установлено, что антигенная активность смеси производственных штаммов в 2-3 раза ниже антигенной активности штамма Lep tos p i r a

Pomona ВГНКИ -6 .

Результаты опыта приведены в табл. 2.

555665

Формула изобретения

Редактор Е. Хейфиц Техред М.Коштура

Корректор Л. Бокшан

Заказ 10825/10 Тираж 711 Подписное.ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Как видно иэ табл. 1 и 2, штамм

Leptospi ra Ровопа ВГНКИ-6 отличается от сме си прои з в од ст ве н ных шт аммов более активными антигенными свой.ствами.

Из шести селекционированных штаммов лептоспир, в том числе Leptospira Pomona ВГНКИ-6, были приготовлены опытные серии поливалентной вакцины, иммуногенные свойства которой изучали на сельскохозяйственных животных в сравнении с вакциной, приготовленной из смеси производственных штаммов. Установлено, что вакцина, изготовленная иэ шести сеЛекционированных штаммов, создает в 25 раэ более напряженный иммунитет, чем вакцина, приготовленная из смеси производственных штаммов лептоспир.

Внедрение предлагаемого штамма серологической группы Pomona взамен используеьнх в настоящее время

8 штаммов лептоспир дает возможность заменить при изготовлении вакцины трудоемкий баллонный метод выращива- . ния лептоспир (в 10-12 литровых объемах ) реакторным методом выращивания (в объеме 1-2 тыс.л ), что значительно упрощает и удешевляет изготовление вакцины.

Штамм Leptospi ra Pomona ВГНКИ-6, используемый для приготовления вакцин против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных. Хранится в коллекции микроорганизмов

Всесоюзного государственного научно-контрольногс института ветеринарных препаратов.

Морфологические признаки. При микроскопии в темном поле представляет собой серебристо-белые плотные спирали с утолщениями в виде крючков на концах. Витки спирали незаметны при увеличении в 200-400 раз и хорошо видны в электронный микроскоп. Длина лептоспир 8-17 мкр, днам тр 0,1-0,15 мк. Наиболее хорошо видны при микроскопии в темном поле и менее отчетливо при фазовоконтрастной микроскопии. Невидима э при обычном освещении, плохо окрашиваются анилиновыми красками. При импрегнировании серебром становятся темно-коричневыми

Физиологические свойства. Рас30 тет на среде, содержащей 4-5% сыворотки баранов или кроликов на фосфатно-буферной основе при рН 7,27,4. Максимум роста при 26-27 С.

На 5-10 день роста накопление 10 10—

Ь

16 10 лептоспир в 1 мл. В последующие сроки роста наступает лизис бактериальных клеток. В жидкой среде очень подвижны, у .них характерно быстрое ротационное движение вокруг

2О оси и перемещение беэ полярной дифференциации.

Антигенные свойства. В опыте на овцах установлено, что антигенные свойства штамма Pomona ВГНКИ-6 в

2-5 раэ выше, чем антигенные свойства смеси производственных штаммов серогруппы Pomona (П-148, П-4, П-8, П-12, П-24, Геацинт, Вега-2, П-Молдавская ). В опыте на кроликах установлено, что антигенная активность бактериальных клеток Leptospi

ra Pomona ВГНКИ 6 в 2-3 раза превосходит антигенную активность смеси производственных штаммов лептоспир.

Иммуногенная активность. Поливалентная вакцина, изготовленная из данного штамма, содержащегося в числе шести селекционированных штаммов, имела иммуногенную активность в

2-5 раз выше, чем вакцина, приго4О товленная иэ смеси 39 производственных штаммов лептоспир.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Инструкция по изготовлению

45 и контролю поливалентной вакцины против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных, утверждена 27.05.1968, с. 6.