Штамм lертоsрirа iстеrонаемоvrнаgiаl вгнки-2

Штамм lертоsрirа iстеrонаемоvrнаgiаl вгнки-2

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советскмк

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 30. 01, 76 (21) 2321226/15 М К з с присоединением заявки ¹

С 12 и 1/00

А 61 К 39/00

Государственный комитет

СССР ио делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 30.01.83.Бюллетень ¹ 4 (53 } УДК 616 . 9 86 . 7 (088. 8) Дата опубликования описания 30. 01. 83

Ю.А. Малахов, А.П. Самохвалов, В.С. Соловьева

А.Н. Щуплико, И.Г. Серегин и Н.М. Иванова (72) Авторы изобретения

Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов (71) Заявитель (54) ШТАММ LEPTOSP I RA CTегоHAEMORRHAG I ÀÅ ВГНКИ-2 /ф @Т r, 1 2

Изобретечие относится к производству ветеринарных биологических препаратов и представляет собой новый штамм лептоспир, который может использоваться для приготовления вакцин против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных.

Высокая иммуногенная активность штаммов лептоспир, из которых изготавливается вакцина, является одним из основных условий, обеспечивающих получение активной вакцины против лептоспироза животных . В настоящее время в биологической промышленности изготавливают убитую вакцину против лептоспироза иэ 24-39 штаммов лептоспир, относящихся к 6 серологическим группам, в том числе содержащую 5 штаммов серологической группы Иктерогеморрагия, в частнос- . ти, штаммы И-1496, И-542, Белоусов, Судьин и Вайнберг (1 ).

Недостатком известных штаммов является их низкая иммуногенная активность, кроме того, получение вакцины из них трудоемко, так как необходимо выращивать каждый штамм в баллонах (10-12 л ).Целью изобретения является штамм лептоспир серологической группы Иктерогеморрагия, обладающий высокоактивными в иммуногенном и антиген— ном отношении свойствами, который можно использовать для приготовления поливалентной вакцины против лептоспироз а животных, и поз воляющий реализовать менее трудоемкий реакторный метод выращивания лептоспир при изготовлении вакцины.

Штамм лептоспир Иктерогеморрагия

ВГНКИ-2 выделен от свиньи в Московской области в 1972 г. и хранится в коллекции микроорraниэмов ВГНКИ ветпрепаратов МСХ СССР под Р 2.

Штамм лептоспир Иктерогеморрагия

ВГНКИ-2 характеризуется следующими признаками.

Морфологические признаки. Обладает характерными для лептоспир морфологическими признаками.

При микроскопии в темном поле микроскопа представляет собой серебристо-белые плотные спирали с утолщениями в виде крючков на концах.

25 .Витки спир и незамет при увеличении в 200-400 раз, но они хорошо видны в.электронном микроскопе.

Длина лептоспир 8-17 мкр, диаметр

0,1-0,15 мкр. Наиболее отчетливо видны при микроскопии в темном по555807

Физиологические свойства. Растет на среде, содержащей 4-5Ъ сыворотки баранов или кроликов с фосфатно-буферной основой при рН 7,2-7,4, Максимум роста при 26-27ОС. На

5-10-ый день Ъооста накопление

10 10 — 16 10 лептоспир в 1 мл. В последующие сроки роста происходит лизис бактериальных клеток. В жидкой среде подвижны, у них характерное быстрое ротационное движение вокруг оси и перемещение без полярной дифференциации.

Антигенные свойства. ытамм лептоспир Иктерогеморрагия ВГНКИ-2 срав- 20 нивали по антигенным свойствам со смесью производственных штаммов:

И-1496, И-542, Белоусов, Судьиха, Вайнберг в опыте на овцах.

Семидневную культуру летоспир кон- Я сервировали 0,5% фенола и вводили овцам внутримышечно в дозе 5,0+

5,0 мл двукратно с интервалом 7 и

21 день. При этом установили, что антигенные свойства штамма лептоспир 4п

Иктерогеморрагия ВГНКИ-2 в 3-4 раза выше, чем антигенные свойства смеси производственных штаммов. Результаты опыта приведены в табл. 1.

Антигенные свойства изучали также в опыте на кроликах. Семидневную культуру лептоспир,доводили сывороточной средой до концентрации 75000 лептоспир в 1 мл, консервировали фенолом до 0,5В-ной концентрации и 40 вводили четырем кроликам весом

2, 5 кг внутривенно по 1 мл. Через

7, 14, 21 и 28 дней после введения культуры у кроликов брали кровь и

Дни исследования после

Наименование штаммон

1-ой вакцинации

2-ой вакцинации

56

Лептоспира Иктерогеморрагия

ВГНКИ-2

1:320

1:120

Смесь: И-1496, И-452, Белоусов, Судьин, Вайнберг

1:80

1:40 ле и менее отчетливо при фаэовоконтрастной микроскопии, невидимы при обычном освещении, плохо окрашиваются анилиновыми красками, при импрегнировании серебром становятся темно-коричневыми. исследовали сыворотку в реакции микроагглютинации-лизиса. При этом сравнивали титр антител кроликов, которым вводили культуру штамма

Л.Иктерогеморрагия ВГНКИ-2 и смесь производственных штаммов: И-1496, И-542, Белоусов, Судьин, Вайнберг.

Установлено, что антигенная активность смеси производственных штаммов в 3-10 раэ ниже антигенной активности штамма Л.Иктерогеморрагия

ВГНКИ-2. Результаты опыта приведены в табл. 2.

Как видно из табл. 1 и 2, штамм лептоспир Иктерогеморрагия ВГНКИ-2 отличается от смеси производственных штаммов более активными антигенными свойствами.

Из шести селекционированных штаммов лептоспир, в том числе и Иктерогеморрагия ВГНКИ-2, были приготовлены опытные серии поливалентной вакцины, иммуногенные свойства которой изучали на сельскохозяйственных животных в сравнении с ва <циной, приготовленной иэ смеси производственных штаммов. Установлено, что вакцина, изготовленная из шести селекционированных штаммов, создает в 2-5 раэ более напряженный иммунитет, чем вакцина, приготовленная из смеси производственных штаммов лептоспир.

Кроме того, внедрение данного штамма лептоспир серологической группы Иктерогеморрагия, взамен используемых в настоящее время пяти штаммов лептоспир дает воэможность заменить при изготовлении вакцины крайне трудоемкий баллонный метод выращивания лептоспир (10-12 л объемах) реакторным методом выращивания (в объеме 1-2 тыс.л ), что значительно упрощает и удешевляет изготовление вакцины.

Таблица 1

1:640 1:120 1:40 1:10

1."240 1:40 1:10 0

555807

Таблица2

Титр антител в сыворотке крови кроликов

Наименование

lUTBMMOB на день после вакцинации

Л. Иктерогеморрагия

ВГНКИ-2

1: 2500+ 500 1: 8250+1730

1:83Q+170

Смесь: И-1496, И-542, Белоусов, Судьин, Вайнберг

1: 83+15

1:2500+500

1:830+170

Формула изобретения

Редактор E Зубиетова Техред М.Коштура

Корректор Л. Гокшан

Заказ 10826/10 Тираж 521

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

1 с

Штамм Leptospira ictегоhaemorrha"

giае ВГНКИ-2, используемый для приготовления вакцин против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных. Хранится в коллекции микроорганизмов Всесоюзного го- . сударственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов.

Морфологические признаки. При микроскопии в темном поле представляет собой серебристо-белые плотные спирали с утолщениями в виде крючков на концах.

Витки спирали незаметны при увеличении в 200-400 раз и хорошо видны в электронный микроскоп ° Длина лептоспир 8-17 мкр, диаметр 0,10,15 мкр. Наиболее хорошо видны при микроскопии в темном поле и менее отчетливо при фазово-контрастной микроскопии. Невидимы при обычном освещении, плохо окрашиваются анилиновыми красками. При импрегнировании серебром становятся темно-коричневыми.

Физиологические свойства. Растет на среде, содержащей 4-5Ъ сыворотки баранов или кроликов на фосфатнобуферной основе при рН 7,2-7,4. Максимум роста при 26-27 С. На 5-10-ый день роста накопление 10 10 — 16х10

Ь Ь лептоспир в 1 мл. В последующие сроки роста натупает лизис бактериальных клеток. В жидкой среде очень подвижны, у них быстрое характерное ротационное движение вокруг оси и

25 перемещение беэ поряной дефференциации.

Антигенные свойства. Антигенные свойства штамма Иктерогеморрагия

ВГНКИ-2 в 3-4 раза выше, чем антигенные свойства смеси производственных штаммов серогруппы Иктерогеморрагия И-1496, И-542, Белоусов, Судьин, Вайнберг (опыты на овцах).

В опыте на кроликах установлено, что антигенная активность бактериальных клеток лептоспир Иктерогеморрагия ВГНКИ-2 в 3-10 раз превосходит антигенную активность смеси производственных штаммов лептоспир.

Иммуногенная активность. Поливалентная вакцина, изготовленная из данного штамма и содержащая в составе пять других селекционированных штаммов, имеет иммуногенную активность в 2-5 раз выше, чем вакцина, приготовленная иэ смеси 39 производственных штаммов лептосгир.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. "Инструкция по изготовлению

50 и контролю поливалентной вакцины против лептоспироза сельскохозяйственных и промысловых животных". Утверждена 27.05.1968, с. б.