Способ оценки токсичности сточных и природных вод

Способ оценки токсичности сточных и природных вод

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О и Й с А- Й".и"„"Е:

ИЗОБРЕТЕН ЙЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик (6l) Дополните чьиое и авт, свид-ну (22) Заявлено 25.10,74(21) 2074202/15 с присоединением заявки ¹(23) Приоритет— (43) Опубликовано05.05.77,Бюллетень № 17 (45) Дата опубликования описании 02.07.77 (51) М, Кл."С 12 К 1/00

Государственный квинтет

Совета Мнннстрвв СССР во делам наовретеннй м втнрь нй (53) У,О,К 543.9 (088.8 ) Г. К. Барашков и Н. М. Киристаева (72) Авторы изобретения

Научно-исследовательский и проектно-изыскательский институт

МоскводоканалН И Ипроек т (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ РОЖ".ИЧИОСТИ СТОЧЙЬЖ

И ПРИРОДНЫХ ВСД

Изобретение относится к токсикологии и может быть использовано на предприятиях. контролирующих качество воды.

Известен способ оценки токси;ности химических веществ, заключающийся r тTоOмM, 5 что регистрацию изменения интенсивности фотопндукцированного послесвечения хлоропластов или клеток Chfovetfa paten>dose под действием химических соединений ведут в миллисекундном интервале затуха- 10 ния fl).

Известен также способ оценки токсичности сточных и природных вод, заключающийся в том, что в испытуел ую и контроль-ную пробу воды добавляют суспензию одно- 15 клеточной зеленой водоросли СМ- рмгапа Bose с равной концентрацией апланоспор, помешают в культуральные трубки с пробулькиванием воздуха, обогащенного СО z, и освещают в течение одних-двухсуток.Ток- 211 сичность определяют по разнице роста в опытной и контрольной пробах 121. Основным недостатком способа является невысокая чувствительность оценки токсичьости и, кроме того, для осуществления спосо- М ба необходима специальная установка для культивирования и синхронизации култ,туры водоросли.

Цель изобретения - повышение чувствительности и точности оценки токсичности сто ных и природных вгд.

Это дсстигается тел, что в качестье водоросли берут несинх оппу о культуру мезофильного шталлма С1тГ. pwveno c1osa 82 (ИГУ), выращенную на полной средеТамия, в начале инкубации ку::.,туру переносят в минимализированную ссепу Успенского, подвергают седиментацп с и перед определением результатов оценки се:.снментированные клетKH водоросли облучают .л ьтразвуком.

Облучение ультра звуком проводят в течение 1 0=15 сек прп мощности дозы 1 00 В т.

Клетки водоросли подвергаются двойному шоку: во-первых, изменением среды, вовторых - минимализацией среды, обеспечивающей лишь ограниченный их рост. Это повышает чувствительность оценки более чем на порядок.

Пример . 1Етамм СЪ| pvr e.no с1оза

82(МГУ) выращивают в течение трех дней

557098

3 при непрерывном освешении при 28оС ga. полной среде Тамия следующего состава, г/л: К NOg 5; КН2 РО4 1,25;Alg 50

7 Н р. О 2а5ю - 0 . 0 003е 3QTA

0,037; раствор микроэлементов Лрнона

4 l мл. Состав раствора микроэлементов, мг/л: Н ВО 2,86; М С(4Н 0

1,81; Хп 5 О ТН 0 0,222; Си 5 О

° g Н 0 0,079.

Для опыта клетки отделяют от среды центрифугированием (3000 ху, 5 мин), о мывают от среды суспендированием в 3050 мл 0,01%-ного раствора МК Й и центрифугированием (3000 ху, 5 мин). За»

35 тем клетки суспендируют в нескольких мил лилитрах 1/5 среды Успенского. B предка рительных опытах установлено, что минималь ной средой для недельного роста водорослей является 1/5 полной среды Успенского.

Состав полной среды Успенксого (г/л):

К NO О 025т JAp 50< 7 Н20 0,025;.

КН Р04 0 025; Са (НО ) 0,1;

К СОЗ 0,0345.

Зб

При оценке степени токсичности. различных вешеств их добавляют к 1/5 среды

Успенского в трех концентрациях, отличавшихся одна от другой на порядок, например, 0,1; 0,01 и 0,001 мг/л. К 100 мл это- ®

ro раствора добавляют суспензию водорослей в количестве„даюшем концентрацию клеток

40-60 мг/л по "силикагелевому показателю" (СП). СП равен массе суспензии тонко-. измельченного силикагеля с такой же оптической плотностью при 578 нм, что и суспензия водорослей. Он измеряется на фотоалектроколориметре с фильтром, выделяющим указанную линию ртутной лампы. B контроль (1/5 среды Успенского) добавляют 40 то же количество суспензии водорослей.

Пробу природной или сточной воды про пускают через суперцентрифугу с проточным ротором при 25000 об/мин для отделенич от взвесей. К 100 мл испытуемой воды добавляют все питательные элементы 1/5 среды Успенского и суспензию водорослей, как указано выше.

Приготовленные опытные и контрольные суспензии с одинаковым СПо разливают по

20 мл в 100 мл широкогорлые колбы

Эрленмейера, закрйвают ватными пробками и ставят в люминостат (непрерывное освещение люминесцентными лампами дневного света, 2 клк, температура комнатная). После 5-суточной инкубации колбы озвучивают в ванне ультразвукового очистителя мошностью 100 Вт в течение 1015 сек. Эта преврашает .все осевшие на дно и стенки колб клетки водорослей в суспензию без их повреждения.

Определяют СП контроля (СП „) и опыта (СП ) по оптической плотности при

578 нм, Расчеты проводят по формуле

Хейвуда (для определения времени удвоения культуры водорослей), %:

1О0 6Р (СП„/СП )

%%Я= -.7 где T> - процент изменения времени удвоения культуры, СП„» начальный силикагелевый показатель, СП - конечный силикагелевый пика к затель контроля, СП - конечный силикагелевый показа тель опыта. в укаэанной формуле время не фи гурирует и, следовательно, результат можно получить через одни или двое суток, для несинхронной культуры рекомендуется пять суток, поскольку за ато время отмечена наибольшая чувствительность. Ошибка определения около 8%, Уменьшение или увеличение времени инкубации приводит к увеличению относительной ошибки определения или к снижению чувствительности. Увеличение обьема опытной суспензии увеличивает относительную ошибку определения. Положительный раэультат свидетельствует о токсическом аффекте, отрицательный - о стимулируюшем. Результаты ряда определений приведены в таблице.

Т а б л и ц а

557098 ение таблицы

Из таблицы видно, что предлагаемый способ оценки токсичности сточных и природных вод не зависит от времени года и 45 прост в осуществлении, для этого необхо димы только люминостат, ФЗК и УЗ- чисти тель.

Оценка качества воды только по резуль татам гидрохимических определений, принятая в системе контроля большинства стран, позволяет судить о суммарной характеристике воды лишь косвенно. По предложенному способу можно непосредственно оценить качество воды с точки зрения обеспечения жизни гидробионтов. Введение этого показателя в систему контроля позволяет ограничиться только теми гидрохимическими определениями, которые имеют значение в определенном регионе.

Формула изобретения

1. Способ оценки токсичности сточных и природных вод, включающий инкубацию одноклеточной зеленой водоросли СЪСо еИа рчгemoi8oso и определение разницы роста в опытной и контрольной пробах, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и точности оценки, в качестве водоросли берут несинхронную культуру мезофильного штамма

СЫо еИа рч еъо dosa 82(МГУ) выращенную на полной среде Тамия, в начале инкубации культуру переносят в минимализированную среду Успенского, подвергавт седиментации и перед определением резул татов оценки седи.. ентированные клетки вс доросли облучают ультразвуком.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю ш и й557058

7 с я тем, что облучение ультразвуком производят в. течение 10-15 сек при машисто- 34 сти дозы 100 Вт.

Источника информации, принятые во внимание при экспертизе: б

1. Авторское свидетвльс"-тво па з-ке

2006759/15, кл. С 32 К 1/00, 1974, 2. Акцептованная заявка ФРР

2145787.4, кл, 30/2, 14, 1972.

C pcт ави тель М. Бра ниш ников

Редактор Н. Скворцова Техред 3. Фанта Корректор Е, Скучка

Заказ 1011/51 Тираж 541 Подписное

ЫНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-ЗЗ, Раушская. наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4