Питательная среда для культивирования продуцентов пектолитических ферментов
Патент 558041
Авторы
Питательная среда для культивирования продуцентов пектолитических ферментов
Иллюстрации
Реферат
(II) 558041
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВКДЕТЕЛЬСТВУ
Саве Соаетскик
Социалистических
Республик (61) Дополнительное к ав . свид-ву (22) Заявлено 07.04.75 (21) 2122073/13 (51) М. Кл, С 12D 13/10
С 12В 3/00 с присоединением заявки №
Государственный комитет
Совета Иинистоов СССР (23) Приоритет ло делам изобретений заII етений Опубликовано 15.05.77. Бюллетень ¹ 18 (53) УДК 577.15.663.1 (088.8) и открытий
Дата опубликования описания 13.07.77 (72) Авторы изобретения
Н. T. Шинкаренко, I{;. А. Калунянц, Л. И. Голгер, Б. А. Величко и P. П. Кавторина
Всесоюзный научно-исследовательский биотехнический институт (71) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
ПРОДУЦЕНТОВ ПЕКТОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ
Изобретение относится к области микробиологии.
Известна питательная среда для культивирования продуцентов пектолитических ферментов, содержащая экстракт свекловичного жома, экстракт солодовых ростков, автолизат мицелия, сернокислый аммоний, однозамещенный фосфорнокислый калий II сернокислый магний. Однако такая питательная среда при выращивании продуцентов пектолитических ферментов имеет невысокую активность глубинной культуры (200 — 280 ед/мл) (1).
С целью повышения выхода пектиназы и интенсификации биосинтеза пектолитических ферментов предлагаемая питательная среда дополнительно содержит соединения титана при следующем соотношении компонентов, вес. %:
Экстракт свекловичного жома 80 — 85,05
Экстракт солодовых ростков 8,0 — 10,0
Автолизат мицелия 3,0 — 4,0
Сернокислый аммоний 0,6 — 0,7
Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,05 — 0,1
Сернокислый магний 0,01 — 0,05
Соединения титана 0,01 — 0,1
Из соединений титана используют фосфорнокислый титан и окись титана.
Пример 1. Свекловичный жом в количестве 6 кг заливают 100 л водопроводной воды
5 и нагревают в течение 2 ч при 125 — 130 С при постоянном перемешиванип. Затем суспензию охлаждают до 45 С и экстракт отделяют от твердой фазы. PH доводят до 4,0 и добавляют ферментный раствор пектиназы в количестве
1р 5 ед/мл экстракта. Ферментативный гидролиз проводят в течение 12 ч при 45 С и рН субстрата 4,0. По истечении указанного выше времени к экстракту добавляют, %: вытяжку из солодовых ростков 10, автолпзат мпцелия
15 4,0, сернокислый аммоний 0,7, однозамещенный фоофорнокислый калий 0,1, сернокислый магний 0,05 и фосфорнокислый титан 0,15.
Приготовленную питательную среду стерилизуют и подают в стерильный ферментер.
2р На этой среде культивируют продуцент пектиназы. Для этого производят посев водной суспензией спор плесевого гриба Aspergillius аюагпог1, выращенных известным способом, в количестве 50 г на 1 м питательной среды.
Добавляют пеногаситель марки АС-50 в количестве 0,01 % от объема питательной среды.
Культивирование проводят при удельной аэрации 1 м /м мпн. Давление в ферментере 0,2—
558041
Формула изобретения
Составитель В. Головин
Техред М. Семенов
Корректор А. Степанова
Редактор Л. Новожилова
Заказ 1164/3 Изд. № 431 Тираж 560 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр, Сапунова, 2
0,3 ати. Скорость вращения мешалки
300 об./мин, время культивирования 52 ч.
Культуральную жидкость отделяют от биомассы на автоматическом камерном фильтр-прессе. Пектолитическая активность культуральной жидкости составляет 360 ед/мл (иодометрический метод) или 1 ед/мл (интерферометрический метод) .
Пример 2. Питательную среду, включающая, о/о. 85,15 прогидролизованного экстракта свекловичного жома, 10 вытяжки солодовых ростков, 4 автолизата мицелия, 0,7 сернокислого аммония, 0,1 однозамещенного фоофорнокислого калия, 0,5 магния сернокислого и 0,08 окиси титана, стерилизуют в установке непрерывного .действия и подают в стерильный ферментер. Производят посев водной суспензией спор Aspergillius awamori.
Культивирование проводят при удельной аэрации 1 м /м мин, давление в ферментере
0,3 ати, скорость вращения мешалки
300 об/мин.
Время культивирования 52 ч. Биомассу отделяют от культуральной жидкости на автоматическом камерном фильтр-прессе. Пектолитическая активность культуральной жидкости составляет 370 ед/мл (йодометрический метод), Применение предлагаемой питательной среды на строящемся Ладыжинском заводе ферментных препаратов (пуск в 1976 г.) позволяет вместо запроектированных 120 уел. т в год выпускать 150 — 160 усл. т в год ферментов.
Ожидаемый экономический эффект более
2 млн. рублей в год.
1. Питательная среда для культивирования продуцентов пектолитических ферментов, например Aspergillius awamori 16, содержащая экстракт свекловичного жома, экстракт солодовых ростков, автолизат мицелия, сернокислый аммоний, однозамещенный фосфорнокислый калий, сернокислый магний и воду, о т л и10 ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода пектиназы и интенсификации биосинтеза пектолитических ферментов, она дополнительно содержит соединения титана при следующем соотношении компонентов, вес. /о.
15 Экстракт свекловичного жома 80 — 85,05
Экстракт солодовых ростков 8,0 — 10,0
Автолизат мицелия 3,0 — 4,0
Сернокислый аммоний 0,6 — 0,7
Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,05 — 0,1
Сернокислый магний 0,01 — 0,05
Соединения титана 0,01 — 0,1
25 Вода Остальное
2. Питательная среда по п. 1, о т л и ч а ющ а я с я тем, что из соединений титана используют фосфорнокислый титан.
3. Питательная среда по п. 1, о тл ич а ю30 щ а я с я тем, что из соединений титана используют окись титана.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: (1). Авторское свидетельство Ко 345198, 35 кл. С12Д 13/10, 1972.