Способ активации плазминогена
Иллюстрации
Показать всеРеферат
О Il И С А Н И Е ii ветзы
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
К АВТОРСКОМУ СВЙДЕТЕЛЬСТВУ (6l) Дополнительное к авт. свих-ву (22) Заявлено11.08.75 (21) 2163880/13 с рисоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано05.07,77,Бюлле1ень № 25 (45) Дата опубликования описания 20.08.77
2 (51) М. Кл. С 12 0 13/10
Государстееииый комитет
Соеета Мииистрое СССР
fl0 делам иэаоретеиий и открытий (53) УДК 615,45:615 ° .774.94 (088.8) Г. В. Андреенко, Т. H. Серебрякова и P. A. Максимова (72) Авторы изобретения
Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. M. B. Ломоносова
Ф (71) Заявитель (54) СПОСОБ АКТИВАЦИИ ПЛАЗМИНОГЕНА
Изобретение относится к способам акти= вации тромбопитических препаратов и может быть применено и медицине, фармакологии, физиологии.
Известен способ активации ппаэминогена стрептокинаэой, выдепенной из гемопитичес.кого стрептококка, путем введения фермен» та в организм, либо смешением его с ппазминогеном (1).
Однако ппаэминзген, полученный извест ным способом, обладает повышенной токсичностью, С целью снижения токсичности ппазминогена по предлагаемому способу в качестве активатора применяют препарат протеопити- И ческих ферментов, выделенных из гриба
Tp chot h6ciUm т доеизп.
Фермент Тт 1сйот,"пес1отп voseu i примеи ют дпя активации ппазминогена в активный20 фибринопитический фермент - ппазмин. Дпя этого смешивают 4%-ный раствор фермента с таким же раствором ппаэмнногена в соотношении 1:1 — 1:7 и инкубируют при 22о
28 C в течение 2-х ч. 25
Пример 1. Активацию ппазминогена в организме животных проводят путем введения препарата иэ ТМсЭот,пес1ц гл oseU ттт вйутривенно в количестве 1 5 мг на 200 r веса животных. До введения и спустя 10 мин после введения определяют фибринопитическую актианость кроап которая возрастает благодаря активации. естественного ппаэминогена в русле крови.
Дпя определения кровь центрифугируют10мин при 2000 об/мин с охпаждением. Плазму осторожно отбирают, Из ппаэмы получают эугпобупиновую фракцию, дпя чего 0,25 мп плазмы добавпяют к 4 мп дистиппированной воды, подкиспенной до рН 5, 3%-ной уксусной кислотой. Смесь оставляют при комнатной температуре на 10 мин. После центрифугирования при тех же условиях надосадочную жидкость сливают, остатки жидкости удапяют фипьтровапьной бумагой. К осадку добавляют 0,25 мп 0,01%-ного тетрабората натрия и растворяют в течение 40 мин при комнатной температуре, В полученном растворе эуглобупинов онрецепяют активаторную активность по раэ:;ости эон пиэиса
564334
Составитель С, Малютина
Редактор Л. Гончарова Техред О. Луговая Корректор И. Гоксич
Заказ 1987/196 Тираж 541 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров «"-ССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушскля наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 па прогретых и непрогретых фибриновых пластинках, наносят 0,03 мл испытуемого раствора, получают большие по величине эоны лизиса на непрогретых фибриновых пластинках вследствие наличия в них плазминогена, который активируется в присутствии препарата иэ ТК os8uTtl
Пример 2, Активацию плаэминоге.на вне организма получают при инкубации смеси плазмичогена с раствором трихолизина. (препарата из Tt c3otЪ|с н.т Po5eu&, Полученная смесь приобретает способность лизировать образованные сгустки фибрина.
К 4 мл 4%-ного очищенного раствора плазминогена добавляют Э,5 мл 4%-ного раст вора трихолизина. Смесь инкубируют в течение 30 мин при 24-28 С при рН 7,27,6. Затем 0,2 мл активирсванного плазминогена смешивают с 0,2 мл 0,03%-ного раствора фибриногена и 0,1 мл уромбина и
0,3 мл физиологического раствора, Смесь помещают в водяную баню при 37 С, в течение 5-7 мин наблюдают растворение сгустка, В случае использования неактивированного плаэминогена раство ание сгустка не происходит, а при испол: зовании смеси трихолизина без плаэминогена растворение сгустка происходит в течени=- 40 мин.
Предлагаемый способ является простым и эффективным и позволяет проводить активацию плазминогена в организме и вне его и не оказывает побочного действия на животных, Формула из обретения
Способ активации плазминогена с помощью протеолитических ". эрментов микробного происхождения, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью снижения токсичнос» ти, в качестве активат ..па применяют препарат протеолитических ферментов, выделенных из гриба Тиссо "hecsum roseu .
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:
1. Acr. Z Car diof „6,2, 1960, с. 387.