Штамм т-54-продуцент фибринолитического фермента

Штамм т-54-продуцент фибринолитического фермента

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

от

I этс.i . @„,1 (11) 565936

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТО1зСКОИУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 26,12,75 (21) 2303850/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (51) М. Кл.

С 12 D 13/10//

//С 12 К 1/00

1асударатеенный иамитет

Совета 1еиниотраа СИР ао делам изобретений и аткрь1тий (43) ОпУбликовано 25.07.77 юллетень №27 (53) УДК 615.779.94 (088,8) (45) Дата опубликования описания16.08,77 (72} A вторы изобретения

Н. С. Егоров, Н. С. Агре и С, Н. Выборных

Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. М. В. Ломоносова (71) Заявитель (54) ШТАММ Асйиоти се ther" wovu fear is Т-54ПРОДУЦЕНТ ФИБРИНОЛИТИЧ ЕСКОГО ФЕРМЕНТА

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности производству ферментных препаратов. Известен штамм Асбиощусее аи сотас<еив

ЛС-Б-16, продуцируюший фибринолитические вешества. Фибринолитическая активность штамма при развитии на сложной среде - 16 усл. ед/мл, на синтетической147 усл. ед/мл за 18 час инкубации фибриновых пластинок при 37оС.

Известный штамм имеет продолжитещ ный цикл развития и недостаточно высокую фибринолитическую активность; оптимальная температура роста штамма 28 С, s связи с чем продуцируемый фермент менее 1у устойчив в условиях кровотока.

Целью изобретения является устраненве указанных недостатков, Это достигается использованием штамма р

Чс6иомусМ khei wovufgai"isТ-54.

Штамм ЬсЬио усев 1Ье точцРфапв T-54, выделен из ила горячего источника, расцоложенного на светло-сероземной почве вбли зи поселка Янги-Юль Ташкентской области.

Штамм,Ackinornyces Ье wovu Fgcrv s Т-54 хранится в коллекции кафедры микробиологии биологического факультета МГУ под номером 54 и характеризуется следуюшими признаками.

Морфологические признаки. Спороносцы короткие спиральные с 1-6 не плотно сжатыми завитками. Споры овальные,, оболочка споры ребристая.

Культуральные признаки. Пептонно-кукурузный агар, Рост хороший, Воздушный мицелий белый, с возрастом серый или темно-серый. Колонии плотные. Среда не окрашена, Крахмало-аммиачная среда. Рост хороший. Воздушный мицелий от светло-серого до серого. Колонии сероватые. Среда не окрашена.

Среда с рыбным экстрактом,агаровая.

Колонии буроватые или коричневые, Мелланоидный пигмент не образует.

Синтетическая среда, жидкая. Мицелий гомогенный или в виде мелких шариков размером 0,2-1,0 мм. Среда цвета некрепкого чая.

565936

1900

3000

147 з

Фианолого-биохимические признаки. Эв.ритемный термофильный вктиномицет с кардинальными точками роста: максимвль

0 ной 60 С, оптимальной 40-50 С, минимвль ной 27 С, фитрвты восстанавливает до нитритов.

Кралмвл гидролизует. Молоко пептонизирует. Желатин разжижает, Гидролизует фибрин, фибриноген, плазму, вльбумин.

Хорошо усваивает пелтон.

Отношение к сахарам. Хорошо усваивает глюкозу, фруктозу, мвльтозу, лактозу,.ксиАсЬлоюусев ihermovufga risiT-54 (предложенный штамм) Actit owyces a ureofac

Пример 1. Термофильный вктиномицет

Actirrowyces (,йе etovu(gar Т»54ввидесухих спор, снятых с поверхности вгаровой среды известного состввв, содержвщей г/л: крахмал рвстворимый 10,0; hlaCP -5,0;

СвС 1 Н О 0,5, с помощью бвктеривльной петли вносят в посевную среду того же состава (50% спор с 1 косяка нв 100 мл среды) и культивируют глубинным спосо бом при рН 7,0-7,2 в течение 18-24 о чвс при 35-55 С в качвлочных колбах емкостью 750 мл (объем среды 100 мл).

Звтем посевной материал в количестве 5% вносят в среду того же состава и выращивают тем же с"особом в течоение 18-24 час при температуре 35-55 С. По истечении укаэанного времени культурвльнвя жид4 кость содержит 3000 усл. ед/мл.

Kyat òyðàëüíóþ жидкость отделяют от мицелия при помощи бумажных фильтров.

Фибринолитический препарат осаждают иэ фильтрата сернокислым аммонием при насыщении 0,6-0,8. Полученный ферментный ф лозу, врвбинозу, рвленоэу, галактозу, слабо усваивает свхарозу, Отношение к спиртам. Усваивает маннит, сорбит, дульцит, инозит.

Отношение к органическим кислотам.

Усввиввет сукцинат, лвктвт, цитрвт, Интенсивность рвзвития у предлагаемого штамма выше, чем у известного, Сравнительные данные фибринолитической активности фермента, выделяемого в среду предлагаемым и известным штвммвми, представлена в таблице. препарат содержит удельную активность

2000-3000 усл. ед. на 1 мг белка.

П р ц м е р 2.Термофильный актиномицет

Асб ио иусев О еги очиЯа 5 Т-54 в виде сухих спор, снятых с поверхности агаровой среды известного состава, содержащей, г/л: крахмал растворимый 10,0; N a C P 5,0; пелтон 5,0; СвС3 Н О 0,5, с помощью бвктеривльной.петли вносят B посевную среду того же состава (50% спор с 1 косяка нв 100 мл среды) и культивируют глубинным .способом при рН $,0-7,2 в течение о

18-24 чвс:при 35-55 С в качвлочных кол- бвх емкостью 750 мл (объем среды 100мл).

Затем посевной материал в количестве 5% вносят в синтетическую среду известного состава, содержащую, г/л: К Я0„1,0; ,Мн4),50 1,0; Ка,НРО 2 Н,О -1,77;

М ф04-0,5 Fe Gag У Н й0-0,001; СаСО> 4е0; крахмал растворимый 20,0 и выращивают тем же способом в течение 2-3 суток при, о

35-55 С. По истечении указанного времени

55 культурвльная жидкость содержит

1900 усл. ед/мл.

Культурвльную жидкость отделяют от мицелия при помощи бумажщ1х фильтров.

Фибринолитический препарат осаждают из фильтратв сернокнслым аммонием ири илсыше.565936

Составитель С. Мясковская

Техред H. Андрейчук Корректор H. Ковалева.

Редактор А. Бер

Заказ 2318/17 Тираж 541 Подписное

БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по лелам изобретений и открытий

113035, Москва Ж-35, Раушская наб., л. 4/

Филиал HI!l! "Патент", г. Ужгоррд, ул. Проектна», 4

5 нии 0,6-0,8. Полученный ферментный препарат имеет удельную активность 35005500 усл. ед. на 1 мг белка.

Использование предлагаемого штамма по сравнению с известными актиномицетами имеет следующие преимущества: короткий цикл развития; высокая температура культивирования; высокая фибринопи-. тическая активность продуцируемого фермента; увеличение выхода фибринолитического фермента, Формула изобретениь

Штамм АсЬ иоптусав t he ovu Pg >i 5 Т-54продуцент фибринолитическог о фермента. Хранится в коллекции кафедры микробиологии

Биологического факультета МГУ под номером 54, 29

Морфологические признаки. Спороносцы короткие спиральные с 1-6 неплотно сжа-; тыми завитками. Споры овальные, оболочка споры ребристая.

Культуральные признаки. 25

Пептонно-кукурузный агар. Рост хороший.

Воздушный мицелий белый, с возрастом серый или темно-серый, Колонии плотные, среда не окрашена.

Крахмало-аммиачная с еда.

Рост хороший. Воздушный мицелий от свет ло-серого до серого. Колонии сероватые.

Среда не окрашена, Среда с рыбным экст рактом, агаровая.

Колонии буроватые и,ти коричневые.

Мелланоидный пигмент не образует.

Синтетическая среда, жидкая, Мицепий, гомогенный или в виде мелких шариков размером 0,2-1,0 мм.

Среда цвета некрепкого чая, ;Физиолог -биохимические признаки, Эвритемный термофильный актиномицет с кардинарьными точками роста. максималь о ной 60 С, оптимальной 49-50 С, минимальной 27 С.

Нитраты восстанавливает до нитритов.

Крахмал гидролизует. Молоко пептонизирует, Желатин разжижает. Гидролизует фибрин, фибриноген, плазму, альбумин.

Хорошо усваивает пептон.

Отношение к сахарам, XDpDIUD усваивает глюкозу, фруктозу, мальтозу лактозу, ксилосу, арабинозу, рамнозу, галактозу, слабо усваивает сахарозу.

Отношение к спиртам.

Усваивает маннит, сорбит, дульцит, инозит.

Отношение к органическим кислотам.

Усваивает сукцинат, лактат, цитрат,