Способ диспергирования тканей животных

Способ диспергирования тканей животных

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

евгт гятне-теx ии чЮ: 4% е ФМБ*

l="îàç Советских

Социалистических республик (и } 568020

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДВПДЬСТВУ (6!) Дополнительное к авт. свил-ву(51} М. Кл.

С 01 и 33/16 (22} Заявлено 23.09.75. (21) 2174190/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано, 05.08,77.Бюллетень №29(45) Дата опубликования описания 15.08.77

Государственный комитет

Совета Министров СССР оо делам иэооретений и открытий (53) УДК615.475 (088.8) (72) Авторы изобретения

Г. А. Чуич, А. Г. Маленков, В, И. Левенталь и Е. А. Модяновв

Научно-исследовательский институт по биологическим испытаниям химических соединении (71) Заявитель . (54) СПОСОБ ДИСПЕРГИРОВАНИЯ TKAHEA

Изобретение относится к биологическим . исследованиям и касается способа диспергироввния тканей животных.

Известен способ диспергироввния тканей животных путем механического растирании обрвзцв пестиком гомогенизвторв и подсчетв полученных целых клеток (1J, Однако известный способ не обеспечивает точного определения силы сцепления между клетками в ткани, твк квк не регулирует- 1О ся усилие разрушения ткани.

С целью обеспечения точного определения силы сцепления между клетками в ткани по предлагаемому способу тквневый образец l5 фиксированным усилием продавливают через отверстие (или ряд отверстий) диаметром, не превышвющим размер обрвзцв, но большим размера единичной клетки, и подсчитывают число выделившихся клеток. 20

Способ осуществляют следующим обрвчом.

Сначала животное деквпитируют, брюшную полость вскрывают, печень . т тт вт $ Q QTMbIвают от крови через Г. рог ст . HeIITpanw ную долю печени извлекают, ук;твдыввют нв 25

2 пврвфиновую подложку и цилиндрическим резцом вырезают образцы массой 5+ 0,5 мг, Образец ткани помещают в цилиндр шприца, чв. носик которого насаживают квмеру с квлиброввнным отверстием, затем цилиндр заполняют изотонической жидкостью,. в объеме ХЖ 0,1 мг. Писпергироввние проводит путем перемещения поршня шприца с постоянной скоростью специальным устройством.

При этом жидкость, проходя через камеру, звклиниввет отверстие тканью и продав-ливвет его в приемник-стаканчик или пробирку, Усилие проиввливвния регистрируют звписы вющим устройством, что позволяет получить количественную оценку прочности испытуемого образца ткани.

Полученную в приемнике суспензию рвзбввляют изотонической жидкостью и просчитывают счетчиком микрочвстиц количество целых и рвзрушенных клеток. Твкую операцию проводят с образцом ткани, не подвергавшейся какому-либо воздействию (контрольный опыт) и подвергнутой обработке, например, цутем введения биологически активного веществ

568020

Число выделившихся целых Число разрушенных клеклеток в 1 мл суспензии ток в 1 мл суспензии

Количество опытов

8900+ 120

650 80

4700+ 160

14600 + 280

Контроль

Составитель С. Малютина

Редактор Л, Гончарова Техред А. Демьянова Корректор Ji. Небола

Заказ 2794/34 Тираж 1101 Подписное

0НИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССГ по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 з ва. На основании полученных. данных (количество выделившихся палых клеток при одной и той же нагрузке) делают заключение об эффективности обработки, П р и м.е р . Зля испытания берут образцы ткани (печень крыс), подвергнутые инкубации в бескальциевой изотонической среде,ослабляющей клеточные контакты ткани, для чего в раствор Хэнкса добавляют этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭНТА) для свя-,1р

Величина ошибки в предлагаемом способе

12-1 4%, а в известном 40-1 О 0%.

Предлагаемый способ позволяет проводить испытание химических соединений по их действию на межклеточные контакты и может быть использован для испытания новых химических соединений на биологическую активность и отбора этих соединений перспективных в качестве противоопухлевых препаратов. 30

Формула изобретения

Способ диспергирования тканеи путем механического разрушения образца, о т4 зывания Са и контрольные образцы, под+Z вергавшиеся инкубаиии в растворе Хэнкса без добавления ЗДТА,,Для каждого опыта берут по 5 образцов. Инкубацию проводят в течение 1 ч. при 36оС, После чего каждый образец ткани продавливают через калиброванное отверстие специального устройства, Затем полученную суспензию помещают в целлоскоп, где определяют число выделившихся целых клеток (см. табл,). л.и ч а ющи и с я тем, что, с целью. точного определения силы сцепления между клетками в ткани, тканевый образец фиксированным усилием продавливают через отверстие (или ряд отверстий) диаметром, не превышающим размер образца, но большим размера единичной клетки, и подсчитывают число выделившихся клеток.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1, "Битология» 1968, 10, 9.1081,