Способ получения антигенов

Способ получения антигенов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОЛИСАЙИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К ABTOPCKOAAV СИНДИТИДЬС(ИИ (61) Дополнительное к авт. свид-ву ——

Своз Советских

Социалистических

Республик

01) 571271

Р1) М. Кл.

А 61 К 39/00 (22) Заявлено(25.06.75 (21) 2153532/13 с присоединением заявки № — (23) Приоритет (43) ОпУбликовано05н09н77.Бюллетень № 33 (45) Дата опубликования опноания О5.щ.тт

Государотвенньй кшатет

Совете Мнниотров СССР оо делам изобретений и атер(итнк (551 УД(576.8 .097,2 (088.8) (72) Автор изобретения

И. Я. Мошиашвили

Московский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова (71) Заявитель

{54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНОВ

Изобретение относится к медицине, а именно к производству антигенов.

Известен .химический метод получения дифтерийных антигенов, согласно которому дезинтеграция бактерий производится механи- g ческим путем с применением стеклянных бус на шуттель-аппарате, Однако антигены, полученные этим способом, содержат много липидов и неспецифи« ческнх веществ, что исключает их широкое (и использование в медико-биологических исследованиях.

: Известен также метод дезинтеграции бактерий ультразвуком, по которому бактерийную массу ресуспендируют в физиологи- И ческом растворе и озвучивают в течение

45-60 мин.

Получение антигенов из бактерий, содержалщх большое количество липидов. и ток синов, в таких условиях невозможно, так рр как эти вещества попадают в конечнйй прЬдукт, снижая его специфичность..

Цель изобретения - повышение специфичности и чувствительности препарата путем отделения неспеци(дическик примесей.. 25

Я

Это достигается тем, что бактериальиьци атетки предварительно обрабатывают улей развуком при частоте 0,5-1,5 мГц, интенсивности 5-л Вт/емцов течение 5-10 мии и затем отделяют клетки, Способ осуществляют следуюшим образом. Бактерии вырашивают в течение суток в матрицах с агаром на мартеновском бульоне с добавлением 307 ной; бычЫ55 сыворот ки, Колонии микробов смывают физиологи ческим раствором при рН 7,0-7,2. Полученную суспензию центрифугир ют при

5,5-6 тыс. об/мин, при 8-10 С в течение

50-60 мин.

Полученный осадок, взвешивают и ресуск .пендируют в том же физиологическом раст.воре до содержания 2 r осадка на 88 мл физиологического раствора. После этого суспензию озвучивают при режиме: частота колебаний 1 мГц, интенсивность 5-7 Вт/смз о У температура 7-10 С в течение 5-10 мин.

Затем удаляют образовавшуюся пену с липи» дами и (токсином. центрифугированием при том же режиме. Полученный осадок Ресуспей571271!

Составитель С. Малютина редактор П. Гончарова Гехред А. демьянова Корректор А. Власенко

Заказ 3150/4 Тираж 677 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 днрушт тем же физиологическим раствором дО исходного обьема. Затем сусйензию дезннтегрируит ультразвуком при том же режиме с интенсивностью 20-25 Вт/см в течение 50-60 мнн, вновь удаляют пену ценърифугированнем. Полученный надосадок явлнвтея бактериальным антигеном. Его можаи использовать сразу или диализовать про мв дистиллированной воды 72 ч при 4-106 и лиофилнэировать. Сухой антиген можно хранить более трус лет в герметичных услрникк при 4»10 С, Нелнофилиэированный антиген консервируя; мертиолатом 1:5000

1: 1ОООО. гб

Описайным способом можно получать антигены из дифтерийных,туберкулезных, псевдотуберкулезных и столбнячных бактерий.

Антигены используют для приготовления эритроцитарных диагностикумов, которые применяют для постановки реакций пассивной гемагглютинации (РПГЛ), перекрестной.4

РПГА, реакции торможения пассивной:гемагглютации (РТПГА), перекрестной РТПГА, в реакции нейтрализации антигено-антител (РНА), перекрестной РНА и др, В этих. реакциях диагностикумы показывают высокую специфичность и чувствительность.

Формула изобретения

Способ получения антигенов путем разрушения клеток бактерий ультразвуком al

Г ыделения активной фракции, о т л и ч. а ю- шийся тем, что с целью повышения специфичности и чувствительности препа-, рата путем отделения неспецифических примесей, клетки предварительно обрабатывают ультразвуком при частоте 0,5-I,5 мй, ин« тенсивности 5-7 Вт/см в течение 5-10 мин и затем отделяют клетки.