Способ определения жизнеспособности возбудителя рака картофеля

Способ определения жизнеспособности возбудителя рака картофеля

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскии

Социалистических

Республик (») 571515 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 14,04,76 (21) 2349873/15 (51) М. Кл. с присоединением заявки ¹

С 12 К 1/04

Геердаретееннмн квинтет

6|в|та Мне||трав 666р нв денна ннебретенн6 н. еткрытнн (23) Приоритет (43) Опубликовано 0509,77.Бюллетень № 33 (45) Дата опубликования описания 31.10.77 (53) УДК 632.938 (088.8) (72) Авторы изобретения

И.В.Голик и В.Ф.Кузьмич

Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений (71) Заявитель

154) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ

ВОЗБУДИТЕЛЯ РАКА КАРТОФЕЛЯ

l 2

Изобретение касается иммунитета что окраска зооспорангиев развиваетсельскохоэяйственных растений, а имен- ся в течение нескольких недель. При

1но определения. жизнеспособности воз- этом окрашиваются не все жиэнеспособбудителей. ные эооспорангии.

Известны способы определения жизне- 5 Предлагаемый способ определения жнэспособности возбудителя рака картофе- неспособности возбудителя рака карто-! ля путем плаэмолиза ),11и окрашивания феля, при котором, с целью быстрого патогенов 12). и точного определения патогена, аналиПервый способ основан на том, что зируемую пробу сначала обрабатывают живым эооспорангиям свойственно плаз- у 20%-ным раствором едкого натра, выдемолнзироваться в концентрированных ляют осадок, . промывают дистиллированводных растворах минеральных солей и, ной водой:и.выдерживают его в смеси деплазмолизироваться при замене этих Ы%-нога раствора сернокислой меди, растворов.на чистую воду. В основе н.:100%-ного раствора хлорной меди, вэявторого способа лежит свойство живой )т, тых в равных объемах, а затем микропротоплазМы .зоосцорангиев окрашивать- скопируют. ся в .растворе ттрифенилтетразодхлорида. Способ осуществляют следующим odCyeeciiieiiyiaej iepiceafkati;..айезмолити- :разом. ческого.метода является его трудящем- Анализу подвергают зооспорангии, выкость и неудобства в проведение:..ана- у деленные иэ опухолей больного растения НЦти продуктов переработки пораженПроцедура плаэмолиза и;детщазмблиза, ных раком клубней картофеля и почвы осуществляемая на предметном стекле, или ила. практически не -дает, возможности опре- Можно испольэовать эооспарангии паделить соотношение живых и мертвых > тогена в чистом виде или содержащие зооспорангиев из-за движения послед- примесь органических остатков. них в процессе замены жидкости. 3 мг инфекции помещают в стеклянную

На практике ие оправдывает себя и центрифужную пробирку, заливают 2 мл способ окрашивания возбудителя с по- 20%-ного раствора NaOH, подогревают мощью раствора ТТХ по той причине, 30 на спиртовке до кипения и оставляют

5715 15

Составитель Л.Марченкова

Редактор Н.Скворцова Техред З.Фанта, Корректор Е.Папп

2976/18 .. Тираж 541 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва Ж-35 Раушская наб. д. 4 5

Заказ

Филиал ДПП Патент, г. ужгород, ул.Проектная, 4 на ночь. Отдельно в пробирке смешивают 1. r пшеничной муки и 10 мл дистиллированной воды и также оставляют,на ночь.

На следующий день в пробирку с ин- фекцией добавляют 5-6 капель суспен-, эии пшеничной муки, которую получают в виде надосадочной жидкости при встряхивании набухшей в воде муки с последующим 1отстаиванием ее.в течение 5 мин.

После добавления суспенэии муки инфекцию в пробирке встряхивают и центрифугируют 20 мин при 5000g. Образовавшуюся надосадочную жидкость сливают, а осадок дважды промывают дистиллированной водой в течение 60 сек. ,Пля этого с помощью пипетки по стенкам пробирки залиЪают осадок 8 мл воды и сразу же сливают. Затем осадок таким же способом промывают смесЬю, состоящей из равных объемов 203 -нОго @ раствора CuSO< и 10%-ного раствора СцС3 .

После этого осадок снова заливают 5 мл этой же смеси. Пробирку встряхивают до полного распыления эооспорангиев в смеси, подогревают до .кипения и ос" ЗВ тавляют на 1,5 ч.

В процессе этой обработки жизнеспособные эооспорангии окрашиваются в зелено-голубой цвет, а мертвые и прорссшие остаются. неокрашенными. При этом 3} зооспорангии молодого возрасте окрашиваются в голубой Цвет, а физиологически зрелые - в зеленый.

Из осадка берут инфекцию пипеткой. и наносят ее на предметные стекла в Зя таком количестве, чтобы они легко просматривались под микроскопом. Для этого используют 5 предметных стекол.

Инфекцию на предметных стеклах покрывают покровнымн стеклами, и подго» товленные таким образом препараты подвергают микроскопическому анализу. Иа каждом стекле инфекцию просматривают в йяти полях зрения микроскопа. В каж-. дом поле зрения подсчитывают количество окрашенных зоеспорангмев.

Формула иэебретеиия

Способ определения жиЪнеапособноотк возбудителя рака:Картофеля путем окрашивания эооспорангиев и последующего микроскопирования, о. т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью обеспечения быстрого и точного определения, анализируемую пробу сначала обрабатывают

20%«ным раствором едкого натра, выделяют осадок, промывают дистиллированной водой и выдерживают его в смеси

2б%-ного раствора сернокислой меди и

10%-ного раствора хлорной меди, взятых в равных объемах, а затем микроскопируют..

Источники информации, принятые во внимание при экспертиэег

Кирай S.- и др, Методы фитопатологии, И., Колос . 1974,с.220.

2, Ме3эон Q,A.ÎÐüeè О.А.Жоин и геес6онв, of т евйиф Яро апя а of ЯуйсйуЬчищ endor4ioiicuw е 1И а 1е1 алобит cowpoued

Phy1ора1 Ьо0офу f967,97.р969- 968.