Способ контроля насыщения органов криопротектором при изолированной перфузии

Способ контроля насыщения органов криопротектором при изолированной перфузии

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

и, 5722 52

ОПИСЛНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 18.02.76 (21) 2325339/13 (51) М. Кл. А 01N 1/00 с присоединением заявки №

ГосудаРствеииый комитет (23) Приоритет

Совета Министров СССР по делам изовретеиий

Опубликовано 15.09.77. Бюллетень № 34 (53) УДК 615.832.9 (088.8) и открытий

Дата опубликования описания 28.09.77 (72) Авторы изобретения

Н. С. Пушкарь, В. И. Митасов, В. A. Моисеев, В. Д. Зинченко и В. К. Дворцевой (71) Заявитель

------ -- I (54) СПОСОБ КОНТРОЛЯ НАСЫЩЕНИЯ ОРГАН. В--КРИОПРОТЕКТОРОМ ПРИ ИЗОЛИРОВАННОЙ ПЕРФУЗИИ

Изобретение относится к области низкотемпературного консервирования различных органов и тканей, преимущественно к определению насыщения органа криопротектором во время изолированной перфузии.

11ри подготовке органа к низкотемпературному консервированию используют криопротекторы, которыми насыщают орган спосооом изолированнои перфузии. 11ри этом важно определить время насыщения органа криопротектором, так как увеличение времени перуузии может вызывать повреждение органа, а также непроизводительный расход криопротектора.

Известен химический способ контроля насыщения органов криопротектором, который заключается в окислении этиленгликоля йодной кислотой до формальдегида. Формальдегид определяют колориметрически по реакции с хромотроповой кислотой.

Недостатками данного способа являются длительность процесса (до 60 мин) и большие объемы проб (2 мл), что усложняет осуществление контроля насыщения.

С целью ускорения и упрощения способа контроля насыщения органов криопротектором по предлагаемому способу через каждые

15 — 20 с определяют концентрацию криопротектора путем записи спектра ядерно-магнитного резонанса водородсодержащей группы криопротектора до момента наступления равенства концентраций в притоке и оттоке.

Способ осуществляют следующим образом.

l5 процессе перфузии органа полиэтиленок5 сидом (молекулярный вес 400) различной концентрации оерут образцы оттока из вены в количестве 0,2 — 0,3 мл через определенные промежутки времени и помещают в спектрометр вместе со стеклянной ампулой эталоном10 тетраметилсиланом.

Концентрацию полиэтиленоксида в пробах определяют по интенсивности линии ядерномагнитного резонанса водородсодержащей группы криопротектора до момента наступле15 ния равенства между концентрацией в притоке и оттоке.

Затем вычисляют отношение площади под кривой поглощения СН> к площади под кривой поглощения тетраметилсилана. Это число

20 соответствует 100% концентрации полиэтиленоксида. Такое же отношение вычисляют для исследуемого образца, это число соответствует определяемой концентрации.

I1 р и м е р. Почку кролика перфузируют

25 10%-ным раствором полиэтиленоксида молекулярного веса 400 при 4 С. Из вены во время перфузии берут пробы оттока перфузата. Отсутствие разницы концентрации полиэтиленоксида-400 в притоке и оттоке является крите30 рием насыщения почки криопротектором.

572252

Составитель Л. Соловьев

Техред И. Михайлова Корректор Л. Брахнина

Редактор В, Блохина

Заказ 2097/8 Изд. № 727 Тираж 778

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Я-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Типография, пр. Сапунова, 2

Спектры снимают на спектрометре высокого. разрешения РЯ-2305 с рабочей частотой

60 МГц для протонов.

Спектры проб оттока сравнивают с исходным 10 -ным раствором полиэтиленоксида-400. Отношение площадей тетраметилсилана к СН2 группе равняется 2. В оттоке на 1-й минуте перфузии отношение площадей тетраметилсилана к СН2-группе равняется 1, что соответствует 5% концентрации полиэтиленоксида.

На 5-й минуте перфузии отношение площадей тетраметилсилана к СН2 группе равняется 2, что соответствует 10 /о концентрации полиэтиленоксида-400.

Таким образом, насыщение почки наступает на 5-й минуте. Дальнейшая перфузия нецелесообразна.

Время измерения занимает 8 мин, относительная погрешность +. 5%, Способ контроля насыщения органов криопротектором позволяет использовать органы для последующей трансплантации и не требует криопротекторов, меченных радиоактивными изотопами (ввиду сложности их получения), а,также отсутствует возможность заражения обслуживающего персонала. Процесс контроля менее трудоемок и требует в 2 раза меньше времени по сравнению с известным способом.

Г0 Формула изобретения

Способ контроля насыщения органов криопротектором при изолированной перфузии путем определения концентрации его в притоке и оттоке, отличающийся тем, что, с це15 лью ускорения и упрощения способа, через каждые 15 — 20 с определяют концентрацию криопротектора путем записи спектра ядерномагнитного резонанса водородсодержащей группы криопротектора до момента наступле20 ния равенства концентраций в притоке и оттоке.