Способ получения -аминокислот

Способ получения -аминокислот

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДВТВЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. санд-ву (22) заявлено 04.0 1. 76 (21) 2308052/04 е присоедииеииеи заявки № (23) Приоритет(43) Опубликовано26.0g.77.Áþëëåòåíü № ЗБ (щ 573479 (5)) М. Кл.

С 07 С 101/02

Гаауйваатаеевб аакиет

Фвевта Мюпвтраа CCN в диея амбретанаа ю атщ33пф (53) УДК 547.466. .07 (088.8) (45) Дата опубликования описания 27.10.77 (Йф Авторы изобретения

Р. А. Бринкманнс, Д. Я. Лауциниеце и Ю. П. Эглкткс (73) Заявитель

<54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1гАМИНОКИСЛОТ

: Изобретение относится к усовершенствованному способу получениями-аминокислот, «огорые находят широкое применение в различных областях науки, медицины и промышленности, в частности в синтезе пептидов, гормонов и белков.

Известны различные способы ъолучения .I;-аминокислот путем асимметрического гидропиза рацемкческих И ацкламикокислот в присутствии катализатора с ациладной ак- п тивносгью, причем в качестве катализатора используют ацилазу, нммобилиэованную иа носителе самыми раэличнымк методами: .химическими, адсорбционными,,включением а цопимврный гель. Например, известен 16 способ получения ь --аминокислот, осуществляемый в присутствии ацилазы ковалентко связанной с акриловым полимером(11. Оппако использование подобных каталитнчес«их композиций ограничено сложностью их чв .покучвиня, их неудовлетворительной филь рукой скособиос1ъю и рядом других причина

Известен также способ получения L-амико

«аслот путем асимметрического гипаолкза аа

2 радемических Й- ацкламинокислог, эаключакФщийся в том, что раствор рацвмическойй ациламннокислоты пропускают через колонну, заполненную катализатором, првдставпя3э. щим собой ацклаэу, нммобклкэнрованную на аннонообменкой смоле. Мелевой продукт получают с выходом по 70%, активность катализатора s начале. цикла 1000 мкмоль ь -метиоккна в 1 час (в пересчете на 1 г катализатора), продолжительность цикла 960 час, остаточная активность катализатора в конце никла 109f )2J. Оцнако и этот спо» соб имеет ряд особенностей, таких как киэ» кая относительная активность катализатора и слакносгь процесса, связанная с тем, что один цикл .проводят за 960 час, зка чигельная потеря активности катализатора.

Оелью изобретекиа авляютса упрощение и интенсификациа процесса.

Поставленная цель достигаетса тем, что в процессе асимметрического гидролиза ра« цемических М-ацкламинокислот исполъэу4ог катализатор, состоящий иэ смеси сухого порошка свиных почек с двуокисью крем5734

S ния, покрытой фипьтрукмиим материвдом с размером отверстий 10 - 10 см, при соотношении компонентов катализаторапорошка свиных почек и двуокиси кремниярввном 1:8-12.

Пред .вгвемый способ заключается в том, что сухой порошок свиных почек меха ническим путем перемешивают с двуокисью .кремния, соотношение указанных комцоиеитов равно 1ф-1ф яопучеиную смесь помещают в емкость as фипьтрующего матерна»

-Э ла с размером отверстий 10 -10 см, пос. де етого проводят всямметрц ескнй гидропиз рацемической Я-Ъцяламииокиспоты пере мешиввнием емкости из фипьтрующего мате риапа, содержащей катапизатор, в растворе субстрата. Время проведения процесса 1 цикл зв 10,чвс,,выход цепевого продукта "75%, Остаточная вципазнвя активность и конце цикла - 60%. Активность катапиза- 20 торе 5000 мкмопь Ь -метионина в 1 час на

1 г катвпиэвтора.

В качестве фипьтрующего мвтериапа может быть использована любая п хпоп чатобумажная ипи синтетическая ткань с 2S достаточной прочностью и размером отверс. «т -В тий 1Π— 10 см. Отверстия указанных раз. мероэ обеспечивают нужный уровень вэаимодейетвия монекуп субстрата с ферментом, ад44Эфемеиио обеспечивая изоляцию катани- 30 тячевской смеси; Наличие двуокиси кремния в явтапитичеекой смеси увепичивает контакт«ув поверхность, пропускную способность вяекого, клейкого порошка свиных почек, знаиитепьно упрощает цосцеос доступа суб- 3S етрвтв к ферменту. Креме того, двуокись кремния явпяегся адсорбентом вцилвэы, сгвбипизирующим ферментагивиую активность катапизвтора. э

Предпвгаемым способом можно попучать 40 ряд оптических аминокиспот, раэдепенне рацецатов которых происходит с достаточной скоростью. В качестве субсграгов могут быть использованы, например, N-ацегип впанин, Й ацетипвапин, N --вцегинпейцин, 45 и - ацегипсерин. В зависимости ог используемого субстрата необходимо ипи увеличить время инкубации по сравнению с мегномином, ини увеличить копичество катвпиэатора, так как гидролиэ разных М - ациламино-50 кислот происходит с различной скоростью.

Пример 1. 1 r сухого порошка свиных почек перемешивают с 10 г двуокиси кремния и загружают в мешок из фильт рующего магврнапа (хп опчаго-бумажная Я ткань). Аципвэная активность понученного катализатора 5000 мкмоль |мегнонина в

1 час на 1 г смеси.

47,8 r Й- ацетипмегионина (0,5 м раствор) р отворяют в 500 мп воды,доводят 40 рЪ до 7,2 концентрированным аммиаком.

В стакан с раствором субстрата загружают квтапизатор (мешок со смесью сухогоиорошка свиных почек с двуокисью крем- ния) и выдерживают при перемешнввнии и 37 С в течение час.

Мешок с квтапитической смесью поспе промывки 0,1 м фосфатным буфером (рН7,2) . испопьзуют повторно..

Поспе выдержки доводят рН полученного раствора уксусной киспотой до 5,2 к раствору добавпяют orcoso 5 r вктивироввнного угпя и кипятят в течение 5 мин. Папученный раствор поспе фипьтрования уцвривают в вакууме до сиропообразного состояния. Поспе охпаждення до комнатной температуры добавпяют 300 мп этанопа и оставпяйт íà 16 час при 4 С дпя кристацпизации. Выпавшие кристаплы (-метионинв о ифиньтровыввют> промывают охпажденным спиртом и высушивают при 50 С до постоянного веса.

Допучают 14 г).;метионина, выход 75%, ()р + 23,2 .(с1,5к. НС1) содержание основного. вещества 88,8%.

Пример 2. 5 г сухого порошка свиных почек перемешивают с 50 r двуокиси кремния н загружают в мешок из фипьтрующего мвтерианв (хпопчвтобумвжнвя ткань).

Аципаэная активность подученного катапиза; тора 5000 мкмопь |..-метионина в 1 чвс на 1 г смеси.

32,8г И вцетнлвпанина (0,5 м раствор) растворяют в 500 мп воды и доводят рН до 7,2 концентрированным аммиаком.

В стакан с раствором субстрата загружают квтапизвтор и выдерживают, доводят рН раствора уксусной кислотой до 5,2, к раствору добавляют 5 г вктивированного

gras и кипятят в течение S мин. Попученный раствор после фипьгрования упариввют в е вакууме при 50 С до снропообразного состояния и добавляют 250 мп этипового спирта смесь выдерживают нри 4 С в течение о

16 час. Выпавшие кристаппы впвнинв фильтруют, промывают охпвжденным 70%-ным спиртово-водным раствором и высушивают при

50 C go постоянного веса.

Выход 8,05 г (72%), j<) "+ 14,6 о 22,1н. НС4), содержание основного вещества 99%.

Пример 3. 36,8 rN- ацетил-DL.серина растворяют в 500 мл дисгиплироввнной воды доводят рН до 7,2 концентрированным аммиаком и проводят гидропиэ по методике примера 2.

Выпавшие крисгаплы L-серина промывают

100 мл охпажденного спирта и высушивают е при 50 С в вакуумном уыильрм шкафу выход 9,4 r (71%), (сЦ +14,9 (св2,5 н..НИ) 573479 содержание осн овного вещества Щ 5 Г.

Формупа изобретения

Способ попучения Ь-аминокнспот путем асимметрического гидр опиза рацемкческик

3Ф - ацнпаминокиспот в присутствии катапизатора с аципазной активностью, о т и ич а ю шийся тем, что, с цепью упрощения и интенсификации процесса, катапизатор црименяют в виде смеси сухого порош- tO

«а евиных почек сдвуокисью кремния, по-

6 крытой фильтрующим мктериапом о размеф ф ром отверстий 10 -10 см, при соотношении компонентов катализатора — порошка свиных почек и.двуокиси кремния, равном

1 ф-1 2).

Источники информации, принятые во внимание прн экспертизе

1. Патент США М 3536587, кп. 19563, 27,10.70.

2. Патент Японии Ж 125568, ка, 36 (2), 05.12.74.

Составитень С. Йпужнов

Редактор О. Kyaaeaosa Ч ехред Н. Бабур«а Корректор Е Папп

Заказ 3706/19 Тираж 553. Подписное

БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по цепам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5

Фипиап ППП Патент, г. Ужгород, уп. Проектная, 4