Микрофлуориметр

Микрофлуориметр

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Сова Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 17.05.76 (21) 2362758/10 с присоединением заявки № (51) М. Кл.в С 01N 21/60

Гасударственный комитет (23) Приоритет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 535.822(088.8) Опубликовано 30.09.77. Бюллетень ¹ 36

Дата опубликования описания 05.10.77 (72) Авторы изобретения И. Я. Барский, Г. Н. Виноградова, В. А. Иоффе и Г. В. Папаян (71) Заявитель (54) МИКРОФЛУОРИМЕТР

Изобретение относится к области технической физики, а именно к микроскопии, в частности к приборам для биологии и медицины, и может быть использовано для исследования процессов энергетики живых клеток, измерения количества веществ, составляющих клетки и ткани биологических объектов.

Известны микроспектрофлуориметры, которые позволяют записывать спектры флуоресценции объекта при возбуждении лучами определенного спектрального диапазона и оценивать по этим спектрам интенсивность флуоресценции в максимумах излучения различных входящих в состав объекта веществ.

Ближайшим из известных является микрофлуориметр, содержащий осветитель с источником света и коллектором, светофильтры, опак-иллюминатор, микроскоп и регистрирующую систему с двумя фотоумножителями, перед каждым из которых установлен запирающий светофильтр, соот ветствующий максимуму излучения одного из двух входящих в состав объекта флуоресцирующих веществ.

Однако возбуждение флуоресценции этих веществ осуществляется лучами одного и того же спектрального диапазона, выделяемыми из излучения источника света светофильтром возбуждения, установленным в осветительной системе прибора. Таким образом, основным недостатком этого прибора при измерении веществ, спектры возбуждения которых не совпадают друг с другом, являются энергетические потери, так как оптимальное возбуждение флуоресценцпи одного вещества не соот5 ветствует условиям оптимального возбуждения второго либо третьего вещества, входящих в состав излучаемого объекта.

Целью изобретения является уменьшение энергетических потерь и повышение точности измерений.

Это достигается тем, что микрофлуориметр снабжен диском, установленным с возможностью вращения и содержащим попарно размещенные возбуждающие и запирающие свето15 фильтры, расстояния которых от оси вращения диска не равны друг другу, причем одна часть диска расположена между осветителем и опак-иллюминатором, а другая — между опак-иллюминатором и фотоприемником.

На фпг. 1 представлена принципиальная оптическая схема предлагаемого микрофлуориметра; на фиг. 2 — вид по стрелке А на фиг. 1.

Мнкрофлуорнмстр содержит осветитель с исто ником 1 света и коллектором 2; возбуждающие светофильтры 3, установленные на диске 4; пнтерференционную светоделительную пластинку опак-иллюминатора 5; объектив б микроскопа; объект 7; тубусные линзы

8 микроскопа; зеркало 9 микроскопа; фото3 метрическую диафрагму 10; систему 11 визуального наблюдения в микроскопе; запирающие светофильтры 12, установленные на диске 4; фотоумножитель 13; систему освещения в микроскопе в проходящем свете, состоящую из лампы 14 накаливания, коллектора 15, светофильтра 1б, зеркала 17 и фазоконтрастного конденсатора 18; линзы 19 микроскопа, предназначенные для фокусировки с контактными объективами.

Лучи определенного спектрального состава, выделяемые из излучения источника 1 света с помощью коллектора 2 и светофильтров 3, установленных по внутреннему диаметру диска 4, интерферснционной светоделительной пластинкой QII, I -пллюмпнатора 5 и объективом

6 собираются на обьекте 7 и возбуждают его флуоресценцию. Изображение объекта в лучах флуорссценции объективом 6, линзами 8, зеркалом 9 образуется в плоскости зеркальной фотометрической диафрагмы 10, выполненной в виде «кошачьего глаза». Это изображение наблюдается с помощью оптической системы 11. Интенсивность флуоресценции участка изображения в пределах прозрачного места фотометрической диафрагмы измеряется в определенной области спектра, выделяемой запирающим светофильтром 12, установленным по наружному диаметру диска 4, с помощью фотоумножителя 13.

Система освещения объекта снизу в проходящем свете применяется для выбора места препарата на его фокусировки перед измере574666 нием. При измерении клеток и тканей целых органов животных вместо объектива б устанавливается контактный объектив и вместо линз 8 — система линз 19, состоящая из неподвижной отрицательной и перемещаемой вдоль оптической оси положительной линз. В этом случае наблюдение объекта перед фотометрированием осуществляется методом флуоресцентной микроскопии при освещении объ10 екта сверху через объектив.

При вращении диска 4 с частотой 50 Гц производится измерение интенсивности флуоресценции объекта в двух участках спектра при возбуждении этой флуоресценции соответ15 стиующими лучами.

Формула изобретения

Микрофлуориметр для регистрации интенсивностей флуоресценции нескольких веществ, 20 содержащий осветитель с источником света и коллектором, светофильтры, опак-иллюминатор, микроскоп и регистрирующую систему с фотоприемником, отличающийся тем, что, с целью уменьшения энергетических по2 терь и повышения точности измерений, он снабжен диском, установленным с возможностью вращения и содержащим попарно размещенные возбуждающие и запирающие светофильтры, расстояния которых от оси вращезо ния диска не равны друг другу, причем одна часть диска расположена между осветителем и опак-иллюминатором, а другая — между опак-иллюминатором и фотоприемником.

16