Способ получения производных лейрозина или их солей

Способ получения производных лейрозина или их солей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

От NCAA

Социалистических

Реслублии (11) 576951

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К ПАТЕНТУ (6I) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 15.02.74 (ф) 1999265/04 (23) Приоритет — (32) 16.02.73 (31) R 1-502 (33) ВНР (43) Опубликовано 15.10.77. Бюллетень № 38 (4б) Дата опубликования описания 17.11.77

Государственный номнтет

Совета й1ннистраа СССР оо делам изобретений н открытий (53) УДК 547.94.07 (088.8) (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Карола Янович, Кальман Сас, Бела Келлнер, Ласло

Эмил Биттнер, Эстер Дежери и Янош Элеш (ВНР) Иностранное предприятие

"Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр Р Г" (ВНР) Немет, Жужа Релле, (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ЛЕЙРОЗИНА

ИЛИ ИХ СОЛЕЙ

Целью изобретения является синтез новых биологически активных соединений. Цель достигается предложенным способом получения соединений указанной формулы I, заключающимся в том, 5 что лейрозин или его соль подвергают окислению хромовой кисятэтой в среде органического растворителя при (-90) - (-30) С с последующим выделением полученных продуктов, или реакционную смесь, содержащую N - диметиллейрозин и Nформиллейрозин общей формулы I или N - днметиллейрозин подвергают обработке муравьиной кислотой при комнатной температуре и вьщеляют целевой продукт формулы I, где R - формил, в свободном виде или в виде соли.

Процесс окисления проводят таким образом, что к раствору лейрознна или его соли, предпочтительно сульфату, в органическом растворителе или смеси растворителей, предпочтительно в смеси ацетона и ледяной уксусной кислоты, охлажденному

20 до (-30) — (-90) С добавляют хромовую кислоту, растворенную в органическом растворителе, предпочтительно в уксусном ангидриде, при той жв температуре при интенсивном перемешивании и охлаждении, и реакционную смесь выдерживают в

26 течение 5 — 15 мин, желательно в течение 8 мин. 3аН тс

СОС11

Н

В

В патентной и технической литературе описано окисление третичных аминов с образованием N-ацилпроизводных, а также ацилнрование третичных аминов под действием карбоновых кислот (1), (2).

Использование известных реакций в данном случае приводит к получению новых, не описанных в литературе производных лейрозина общей формулы где Н - водород и/нли формил, или их солей. (5() M. Кл. С07 О 519/04//

ФА 61 К 31/56

576951 тем реакционную смесь тщательно обрабатывают холодным (-40) — (-50) С водным аммонием с доведением рН до 8 — 9, смесь разбавляют водой и экстрагируют несколькими частями органического растворителя, предпочтительно метиленхлорида до тех пор, пока не останется алкалоида. Экстракты объединяют, промывают водой, сушат и выпаривают досуха при пониженном давлении. Получают белый, пеноподобный, аморфный сухой остаток, состоящий главным образом, из N-формиллейрозина и N-диметиллейрозина. Эти соединения отделяют дру1 от друга хроматографией, используя колонку, заполненную окисью люминия (! Ч вЂ” Ч степень активности). Насадку готовят из суспензии алюминия в бензоле. Первым элюентом является бензол и последующими элюентами служат смеси бенэола с разными количествами хлорированного углеводорода, предпочтительно хлороформа. Находящиеся в различных вытекающих фракциях вещества идентифицируют тонкослойной хроматографией. Вначале из колонки выходят сопутствующие вещества, затем N - диметиллейрозин и в заключение злюируется N - формиллейрозин. Фракции, содержащие аналогичные вещества, объединяют, выпаривают досуха при пониженном давлении и можно полученные основания переводить в соли, предпочтительно в соответствующие моносульфаты. Эти соединения могут быть очищены также перекристаллизацией, Такой метод очистки применяют главным образом на солях. Далее смесь, содержащая N - диметиллейрозин и N - формиллейрозин или сам Nдиметиллейрозин, может быть формилирована следующим известным методом.

Сухой остаток, полученный в результате окисления реакционной смеси, подвергают формилированию смесью муравьиной кислоты и уксусного анпщрида. В этой реакции N - диметиллейрозин переводят в N - формиллейрозин. Реакционную смесь нейтрализуют, экстрагируют метиленхлоридом, экстракт промывают водой и выпаривают досуха при пониженном давлении. Полученный сухой остаток очищают хроматографией. Полученный

М - формиллейрозин можно перевести в его соли, предпочтительно в сульфат.

Пример 1. 12 r(0,,0132 моля) лейрозинсульфата растворяют в 2640 мл ацетона, после чего добавляют 0,6 r ледяной уксусной кислоты, свежеотогнанной иэ смеси, содержащей хромовую кислоту.

Раствор охлаждают до (-55) С и к перемешиваемой смеси в течение 3 мин добавляют холодный уксусный ангидрид, содержащий 5,94 r (0,135 моля) хромовой кислоты. Смесь оставляют для выдержки в течение 5 мин,)затем рН раствора доводят до 6, используя холодный концентрированный водный аммоний, Эту операцию проводят в течение 7 мин и используют около 6 л раствора аммония. В период этой нейтрализации смесь охлаждают, чтобы предотвратить рост температуры выше (+50) С. Полученную смесь помещают в стеклянный сосуд, снабженный стеклянной мешалкой и

Бензол

Смесь бензола и

30 хлороформа

9:1

8,5:1,5

8:2

1:1

Хлороформ

800

1б

5 с

6 краном йа выходе, который содержит 9 л дистиллированной воды. Разбавленньй раствор с помощью добавочных количеств водного аммиака превращают в щелочной с рН вЂ” 8,5.

Затем реакционную смесь экстрагируют 4х1,5 л метиленхлорида. Алкалоидные основания переходят в метиленхлоридную фазу. Фазы разделяют, органические растворы объедгняют и промывают -Зх1л дистиллированной воды для удаления уксуснокислого аммония, образованного на стадии нейтрализации. IIocae этого органическую фазу сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха при пониженном давлении. Получают 10 г светло-бежевого сухого остатка, продукт является сырой смесью N ° формиллейрозина и N - диметиллейрозина.

Сухой остаток растворяют в 60мл бензола и раствор переливают в хроматографическую колонку диаметром 36 мм, заполненную 500 r окиси алюминия (IV — V - стенень активности). Насадку готовят иэ бензольной суспензии окиси алюминия.

Колонку элюируют растворителями или смесями растворителей, перечисленными в табл. 1.

Таблица 1.

Вытекающий поток собирают по фракциям каждую объемом по 400 мл. Различные фракции анализируют тонкослойной хроматографией.

Фракции 1 — 5 не содержат алкалоидов. Первые следы алкалоида появляются в основном в фракции 6, которая содержит главным образом нереагирующий лейрозин. И ° диметиллейрозин появляется впервые в фракции 7. и полностью элюируется к фракции 15. Элюиравание и - формиллейрозина начинается в фракции 13 и заканчивается к фракциям 19 — 21.

Фракции, которые по результатам тонкослойного хроматографического анализа содержат одинаковые алкалоиды, объединяют и выпаривают досуха при пониженном давлении.

Получают 5 6 г сырого аморфного N - формиллейрозина и 1,5 г сырого аморфного N- диметиллейрозина.

На следующей стадии эх сырые, аморфные основания раздельно превращают в их моносульфаты, 1 вес.ч, сырого продукта растворяют в 5 об.ч. сухого этанола, после чего раствор подкисляют до рН 4 добавлением 1%-ной серной кислотой в сухом этаноле. Отделение кристаллического сульфата на. 7 69-

5 пинается немедленно. Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение нескольких часов н затем выделившиеся кристаллы отфильтровывают.

Соли перекристаллизовывают затем следующим образом.

1 вес.ч. кристаллического сульфата растворяют в 5 об.ч. метанола и объем раствора увеличивают в пять раэ за счет сухого этанола. Раствор выдерживают при комнатной температуре, затем отделившийся продукт отфильтровывают, промывают сухим этанолом и высушивают, В этом процессе получают следуюшне вещества:

4,8г (40,1%) моносульфата N-формиллейрозина, т.пл.

248-252 С, (а о =+37 (с =1, в воде) и 1,1 г (9,3%) моносульфата й-диметиллейрозина, разлагается без

D o плавления, Qg II =- 3,2 (с = 1, в воде) .

Для определения физических констант и - формиллейрозинового основания часть полученного таким образом моносульфата N - формиллейрозина растворяют - в воде, рН раствора доводят до 8 — 9 20 концентрированным водным аммиаком, смесь трижды зкстрагируют метиленхлоридом. Органические фазы объединяют, высушивают и вьшаривают досуха при пониженном давлении. Полученный аморфный и - формиллейрозин перекристаллизовывают иэ этанола.-Кристаллический N - формиллейрозин плавится при 209 — 211 С, (а) =+80,3 (с = 1, в хлороформе) .

ИК - спектр N - формиллейрозина отличается от спектра лейрозина появлением сильной абсорбционной полосы формильной группы, которая появляется при 1672 см .

На основании масс - спектрометрии массовое число N - формиллейрозина составляет 822. Измеренная точная масса М - 8223977, из которой может быть вычислена эмпирическая формула С46 H54N40 I в с теоритической массой 8223909.

Вычислено,%: С . 67,14; N 6,81; О 19,43; Н

6,61.

С461454й4010 40

Найдено,%: С 66,95; Н 6,58; N 6,75; О

19,27.

Ион этой молекулы дает рост до ионного пика : массовым числом 793, соответствующим удаленн формильной группы, как это подтверждается точной массой (м. е. — масса электрона) м,е. (измерено) - 793,3866, что соответствует эмпирической формуле С45Н5зй40з с вычисленной массой м.е. (вычислено) = 793,3882.

Аналогично массовому спектру лейрозииового 50 основания ионный пик, соответствующий массо. вому числу 353, появляется также в массовом спектре N - формиллейрозинового основания, что отвечает зпоксивельбанаминовой половине, Этот факт также был доказан измерением точной массы: м.е. (измерено) 353,1874, что соответствует эмпиРической фоРмУле С>, Нз 5йзОз с вычисленной массой м.е. (вычислено) а 353, 1858.

Для определения физических констант и - диметиллейрозинового основания моносульфат и - 60

6 диметиллеирозина растворяют в воде, рН раствора доводят до 8 — 9 водным аммиаком и свободное основание экстрагируют метиленхлорндом. Органические фазы объединяют, высушивают и выпаривают досуха. Аморфный, сухой остаток перекристаллизовывают нэ метанола.

Кристаллический N - диметиллейрозин имеет следующие физические константы: т.пл. 208—

210 С, (а) е =+50,1 (с = 1, в хлороформе).

ИК спектр N - диметиллейрознна отличается от спектра лейрозина появлением сильной абсорбцнонной полосы вторичной амнногруппы, образованной п ри диметилировании, появляющейся при

3350 см .

На основе массового спектра массовое число иона молекулы N - диметиллейрозина составляет 794. Из приведенного ниже точного массового числа вычислена эмпирическая формула С451454й409

Вычислено,%: С 68,00; Н 6,85; и . 7,05;

О 18,10 45Н54й409 °

Найдено,%: С 67,85; Н 6,79; N 6,90; 0 17,95.

Измеренная масса, м.е. (измерено) =794,3895, м.е. (вычислено) =794,3882.

Пример 2. 1 г N - днметиллейрознна растворяют в смеси I m 6 мл концентрированной муравьиной кислоты и 1 мл уксусного ангидрида, и смесь выдерживают при комнатной температуре в течение

10 мин. После этого смесь выливают в 30 мл холодной (Π— 5 С) воды и рН смеси доводят до 9,0 с помощью холодного, концентрированного водного раствора аммиака, Аммиачный раствор добавляют при перемешивании Алкалоид экстрагируют из водного раствора с помощью Зх30 мл метиленхлорида.

Метиленхлоридные растворы объединяют, высушивают и выпаривают досуха при пониженном давлении.

Получают 0,95 г аморфного белого N - формиллейрозина, который переводят в его моносульфат, как описано в примере 1. В этой реакции получают 1,01 г моносульфата N - формиллейрозина.

Пример 3. 10г светлс бежевого, пеноподобного сырого остатка, содержащего N - формиллейрозин и и - днметиллейрозин, полученного окислением 12г (0,0132 моля) лейрозинсульфата, как описано в примере 1, растворяют в смеси из 60 мл концентрированной муравьиной кислоты и 10мл уксусного ангидрида и смесь выливают при перемешиванни в 300 мл холодной (Π— 5 С) воды, рН смеси доводят до 9,0 с помощью холодного, концентрированного водного аммиака при перемецп+ ванин, Раствор экстрагируют с Зх100 мл метиленхлорида. Метнленхлоридные фазы объединяют, высушивают и выпаривают досуха при пониженном давлении. Получают 9,8 r аморфного, белого, сыро.

r0 и - формнллейрозина.

Полученный сырой N - формиллейрозии очищают колоночной хроматографией. Сырой продукт растворяют в 60 мл бензола и этот раствор загру57695!

Таблица 2.

1200

Бензол

Смесь бензола и хлороформа:

2:1

1:1

ЩяЯу

800

C0CHq

К СООсн, Составитель С. Ермишкина

Техред И. Ан1 рейчук Корректор С Ямалова

Редактор T. Левятко

Тираж 553 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

П 3035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., n. 4/5

Заказ 2956/704

Филиал ППП "Harem", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 жают в колонну диаметром 45 мм, заполненную 500 г окиси алюминия (1I I степень активности) в бензоле. Колонку элюируют растворителями, перечисленными в табл. 2. остав элюирующего агента Количество элюирующего агента, мл

Вытекаюший раствор собирают по фракциям, каждая по 400 мл объема. Фракции 1 — 3 не содер- 15 жат алкалоидов. Фракции 4 — 10 содержат сопутствующие материалы. Начиная примерно с фракции 11 также появляется и - формиллейрозин в дополнение к сопутствующим материалам. В фракциях 15 — 20 содержится один N - формиллейрозин. 90

В последующих фракциях количество элюированного N- формиллейрозина постепенно уменьшается.

Фракции, содержащие один N - формиллейрозин, объединяют и выпаривают досуха при пониженном давлении. Получают 65 г сырого, аморфного Nформиллейрозина, Сырое, аморфное N - формиллейрозиновое основание превращают в его моносульфат следующим образом:

6,5 r N-формил-лейроэина растворяют в 32,5 мл сухого этанола, после чего раствор окисляют до рН 4 добавлением 1 с-ного раствора серной кислоты в сухом этаноле. Отделение кристаллического вещества начинается немедленно. Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение нескольких часов, после чего отфильтровывают кристаллы и промывают их сухим этанолом. Получают 6,5 г кристаллического моносульфата N - формиллейрозина.

Элюаты, собранные до и после фракций, содержащих N- формиллейроэин, содержат сопутствую- 40 щие вещества и N - формиллейрозин. Эти фракции объединяют и вьшаривают досуха. Полученное таким образом аморфное вещество (1,75 г) растворяют в бензоле и очищают хроматографическим способом, как описано выше, лишь с той разницей, что для обеспечения лучшего разделения колонну элюируют 1200 мл смеси бензола и хлороформа 2:1. Фракции, содержащие один N - формиллейрозин, перерабатывают как описано выше с дополнительным выходом 1,05 r чистого, кристаллического моносульфата N - формиллейрозина. Общий выход 7,10 г (63,7%) моносульфата N - формиллейрозина. Физические константы этого соединения идентичны константам, приведенным в табл. 1.

Формула изобретения

1. Способ получения производных лейроэина общей формулы 1 где R - водород и/или формил, или их солей, отл ича ющийси тем, что лейрозин или его соль подвергают окислению хромовой кислотой в среде органического растворителя при (-90) — (-30) С с последующим выделением полученных продуктов, или реакционную смесь, содержащую Nдиметиллейрозин и N - формиллейроэин общей формулы T или N - диметиллейроэин подвергают обработке муравьиной кислотой при комнатной температуре и вьщеляют целевой продукт формулы 1, где R - формил, в свободном виде или в виде соли, 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют ацетон и/ или уксусную кислоту.

3. Способ по п.1, отличающийся тем,что процесс обработки муравьиной кислотой проводят в присуствии уксусного ангидрида. ч

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе .

1. Бюлер К., Пирсон Д., Органические сиять зы. М., Изд."Мир", 1970, ч. 1, с. 406 — 407.

2. Там же, с. 384 — 385.