Способ приготовления питательной среды для выращивания микроорганизмов

Способ приготовления питательной среды для выращивания микроорганизмов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

t

0 П1И б- - - Й--M Е

ИЗОБРЕТЕН Йя

» 595374

Союз Советских

Социалистических

Реслублик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 10.10.74 (21) 2065893/28-13 с присоединением заявки ¹â€” (23) Приоритет— (43) Опубликова ro 28.02.78. Бюллетень № 8 (45) Дата опубликования описания 22.03.78 (51) М. Кл." С 12 В 3/08 государственный комитет совета Министров СССР оо делам изобретений и открытий (53) УДК 664.18 (088.8) (72) Авторы изобретения

В, Д. Беляев, С. В. Чепиго, H. И. Коротченко, A. H. Мезенцев, О. В. Самохина, А. Jl. Красинская, В. H. Тимкин и Я. Я. Шкоп

Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ

ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к выращиванию микроорганизмов, например, на жидких питательных средах.

Микроорганизмы выращивают на специально приготовленных питательных средах. содержащих источники углерода, азота, фосфора, калия, магния и других веществ, необходимых для роста и развития, включая микроэлементы и стимуляторы роста.

Известен, например, способ производства питательнои среды из сухой биомассы дрожжей, выращенных на углеводородных фракциях нефти, например парафинах. Для этого сухую биомассу дрожжей суспендируют в водопроводной воде, стерилизуют и засевают спорами мицелиальных грибов или бактериями, добавляя в питательную среду необходимые соли азота (аммония), калия, магния, натрия (1).

Известен также способ приготовления питательной среды путем гидролиза мелассной барды минеральной кислотой при рН 1 — 2 в течение 2 — 4 час при температуре кипения смеси или при повышенном давлении и температуре 150 С в течение 1 — 2 час (2).

Известен способ приготовления питательной среды для микроорганизмов из зеленых водорослей — хлореллы, заключающийся в двухстадийной тепловой обработке водорос2 лей сначала при 48 С в течение 48 час, затем при 160 †1 С в течение 1 — 2,5 час (3).

Наиболее близким к предлагаемому является способ, при котором используют активный ил — отход биологической очистки сточных вод для извлечения белка, аминокислот, витаминов и т. д., необходимых для роста и развития микроорганизмов, а также для производства концентрата, применяемого q в качестве белково-витаминной добавки в корм животным (4).

Предлагаемый способ. в отличие от известных позволяет получить питательную среду (гидролизат активного ила), содержащую не только белки, но и сахара, аминокислоты, пептиды, витамины, макро- и микроэлементы, необходимые для роста и развития различных микроорганизмов. Поэтому получаемая питательная среда не требует дополнительных ве2о ществ и стимуляторов роста и может быть направлена на выращивание микроорганизмов.

Достигается это тем, что суспензию активного ила с содержанием сухих веществ от

0,5 до 99,5% подвергают в течение 1 час гидролизу кислотой, например серной, при температуре 80 — 150 С, а полученный гидролизат нейтр ализуют.

Сущность способа заключается в следую30 щем.

595374

Составитель М. Ларина

Техред Л. Гладкова

Редактор М. Дмитриева

Корректоры: Л. Брахнина и Е, Хмелева

Заказ 816

Подписное Изд, № 270 Тираж 568

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

МОТ, Загорский филиал

К суспензии активного ила, например, с содержанием сухих веществ 10% добавляют кислоту (серную или соляную, или ортофосфорную, или муравьиную и т. п.) до концентрации ее в смеси от 0,5 до 10 /О. Затем смесь нагревают до 80 — 150 С и выдерживают, например, в течение 1 час. Полученный гидролизат представляет собой мутную или прозрачную (после осветления) от светлого до темно-коричневого цвета жидкость с запахом фурфурола, содержит сахара, аминокислоты, пептиды, витамины группы В, макро- и микроэлементы.

Гидролизат после нейтрализации без добавления каких-либо дополнительных веществ направляют на фермептацию для использования его при выращивании различных микроорганизмов: дрожжей (например, рода

Candida), мицелиальных грибов (Spicaria, Endomyces, Trichosporon и др.), лучистых грибов (Actinomyces, Streptomyces и др.), бактерий (В acillus, В acterium, Pseudomonas u др ).

Режим гидролиза активного ила различается в зависимости от того, какие требования предъявляются к получаемому гидролизату как к питательной среде для данного конкретного микроорганизма. Для увеличения выхода моносахаров, аминокислот или снижения расхода кислоты процесс можно вести при избыточном давлении, например до 2 — 5 ати.

Пример 1. К 1 л активного ила Кстовокого опытно-промышленного завода белкововитаминных концентратов, содержащего 2,5% абсолютно сухих веществ, добавляют 27 мл концентрированной серной кислоты до концентрации ее в смеси 5 /о. Смесь нагревают на кипящей водяной бане и выдерживают в течение 1 час при периодическом перемешивании. Гидролизат активного ила отделяют от осадка декантацией и нейтрализуют до рН

5,5 раствором едкого кали. Полученную питательную среду стерилизуют и .выращивают на ней дрожжи С. scottii Кр-9 при постоянном перемешивании в колбах на качалке при

34 С. Выход абсолютно сухих дрожжей через

48 час составляет 24,3 г/л.

Пример 2. В суспензию активного ила

Московской (Зеленоградской) городской станции аэрации с содержанием абсолютно сухих

4 веществ 5 /, добавляют серную кислоту до . содержания ее в смеси 7,5% и нагревают при ;100=C в течение 1 час. На полученном гидролизате после нейтрализации его до рН 4,0 едким кали в ферментере объемом 11 л при рН 4,0 — 4,2, температуре 35 -1 С и скорости протока среды 0,1 час непрерывным методом выращивают дрожжи С. scottii К-9. Выход абсолютно сухих дрожжей составляет

10 32 г/л.

Пример 3. В суспензию активного ила

Московской (Люблинской) городской станции аэрации с содержанием абсолютно сухих .веществ 2,4%,добавляют 70 /О-ную муравьиную

Г5 кислоту до содержания ее в смеси 7 /о и нагревают при 100 С в течение 1 час. Полученный гидролизат после нейтрализации раствором едкого кали до рН 5,5 и фильтрации используют для выращивания дрожжей

20 С. guilliermondii Н-569. Культивирование ведут в колбах на качалке при 34 С. Выход абсолютно сухих дрожжей через 48 час составляет 2,6 г/л, 25 Формула изобретения

Способ приготовления питательной среды для выращивания микроорганизмов из суспензии активного ила, отличающийся

30 тем, что, с целью обогащения питательной среды аминокислотами, сахарами, пептидами, витаминами, макро- и микроэлементами, необходимыми для роста и развития микроорганизмов, суспензию активного ила с содержанием сухих веществ от 0,5 до 99,5 /о подвергают в течение 1 час гидролизу кислотой, например серной, при температуре 80—

150 С, а полученный гидролизат нейтрализуют.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР Х 171827, кл, С 12 В 3/13, 1964.

45 2. Авторское свидетельство СССР N 394422, кл. С 12 В 3/04, !971.

3. Авторское свидетельство СССР № 176226, кл. С 12В 3/12, 1964.

4. «Химия в сельском хозяйстве» № 2, 50 1967, с. 52 — 54.