Способ получения бактериальной слизи

Способ получения бактериальной слизи

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ и АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 05. 1.76 (21) 2417988/28-1 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет (43) Опубликовано 05.03.78. Бюллетень № 9 (45) Дата опубликования описания 07,02.78

Союз Советских

Социалистических

Республик (11) 596245

2 (51) M. Кл.

А 61 К 39/02

Государственный комитет

Совета Министров СССР пв делам изобретений и открытий (53) УДК615.45:

:576.8.097 (088.8) (?2) Авторы изобретения

Е. С. Станиславский, И, И. Копкер, И. A. Гришина и М. И. Жванецкая

Московский научно-исследовательский институт „;ÿö.u сывороток им. И. И. Мечникова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАК П=.РИАЛЫ1ОЙ СЛИЗИ

Изобретение относится к области микробиологии и касается получения бактериальной слизи для приготовления диагностичес-ких препаратов и для изучения иммунитета против синегнойной инфекции. 5

Известен способ получения бактериальной слизи путем выращивания купьтуры синегной. ной аачки на целлафановьтх дисках с последующим растворением образовавшейся слизи цитратом натрия, осаждением целевого про- 1Î дукта этанопом, очисткой и пиофипизацией11), Однако известный способ является трудоемким и не обеспечивает высокого выхода целевого продукта.

Пепью Изобретения является повышение 15 выхода и упрощение способа.

Эта цель достигается тем, что осаждение осуществляют в присутствии 8,0-12,0% хлористого натрия, а очистку проводят упьтрацентрифугированием и гель-хроматографией.

Кроме того, упьтрацентрифугировапие проводят при 105.000-170.000 в течение 23 часов, а гель-хроматографию — на колонке с сефарозой 4В.

Способ осуществпяетсн спедуюшим образом. Мукоидный штамм сннегпойпой палочки, выделе)п ый от больного, выращивают на мясо-пептонном агаре, покрытом целлофановыми дисками. Культуру смывают с целлофановых дисков 1%-ным раствором цитрата натрия, встряхивают в течение 30-60 сек со стекпяпнымп бусамп. Микробную суспензию отделяют от бус и центрифугируют при 1 500020000 в течение 40-60 мин дпя удаления

4 микробных клеток. К педостато пюй жидкости добавляют хпорпстый натрий до 10%, а затем 4-5 обьемов холодного (при температуре 2-4- С) 96% этанопа. Осадок отделяют центрифугированием при 2000-3000 g в течение 20 — 30 мин. и растворяют в 0,85% растворе хпорпстого натрия. Раствор неочищенной слизи вновь обрабать1ваот 96%-ным этанопом (3- 1 объомамп) ц цецтрифугируют при тех же усповнях. Осадок растворяют в дистиллированной воде и центрпфугируют при

105.000-170.000 q. в течение 2-3 час.

Недостаточнуто жицкость отбрасывают, а оса— док (очищенную спизь) растворяю .. в 1%-ном

596245

20

Составитель С. Малютина

Редактор И. Квачадзе Техред 3 фа„та Корректор П. Макаревич

Заказ 930/6 Тираж 702 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

1 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород„ул. Проектная, 4

3 растворе нитрата натрия и фильтруют через кэлэнку с сефарозой 4В, отбирая фракции 1 — гэ пика, элюируюшиеся в свободном объеме.

Для препаратов слизи из синегнэйнэй палочки характерны высокое содержание углево-5 дэв (гексоз), токсичность для мышей и протективная активность в опытах на мышах или крысах.

Полученные препараты слизи содержат значительное количество гексэз 130—

276 мкг/кп сухого веса.

Предлагаемый способ эбеспечивает сокращение времени получения целевого прэдукта упрощение технологии, увеличение выхода целевэгэ продукта.

Формула изобретения

1. Спэсэб получения бактериальной cJIHзи путем выращивания культуры сицегнойной палочки на целлофановых дисках с последующим растворснием образовавшейся слизи цитратом натрия, осаждением целевого продукта этанолом, очисткой и лиофилизацией, отлич аюшийся тем, что, сцелью повышения выхода и упрощения способа, эсаждение осуществляют в присутствии 8,0-12,0% хлористого натрия, а очистку проводят ультрацентрифугированием и гель-хроматографи— ей.

2. Способ по п. 1,о тл ич ающ ийс я тем, что ультрацентрифугирование проводят при 105.000-170.000 g в течение

2-3 час, а гель — хроматографию — на колонке с сефарозой 4В.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1.Q Micr ob j oPogy, 17, 4, 197 3, р. 27 3.