Способ подготовки семени жеребца к замораживанию
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ОП ИСАИ
ИЗОБРЕТЕН
Союз Советских
Социалистических
Республик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕ,ТЕ (6!) Дополнительное к авт. свид (22) Заявлено 232275 (21) 230440 с присоединением заявки,% (23) Приоритет (43) Опубликовано050478. Бюлле (45) Дата опубликования описани
/02
Гаатданатаааныб наянтат
Сааатн Мннаатраа CGCP на,данам наабратаннб н атнрытаб
82. 453.
8.8) (72) Авторы изобретения
A. И. Науменков и . Н. К. Романькова
Pl} Заявитель
Всесоюзный научно-исследовательский институт коневодства (54) СПОСОБ ПОДГОТОВКИ -СЕМЕНИ ЖЕРЕБЦА
К ЗАМОРАЖИВАНИЮ
Изобретение относится к животноводству, а точнее-к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных.
Известен способ подготовки семени жеребца к замораживанию, заключающийся в разбавлении семени и выдержке при 0 С в течение 2,5 ч в объео ме, не ттревышающем 100 мл (ll
Недостатком известного способа является неполный учет режима охлаждения и его влияния на активность и живучесть сперматозоидов.
Цель изобретения — обеспечение более высокой активности и живучести сперматозоидов после оттаивания замороженной спермы — достигается тем, что после эквилибрации семя дополнительно выдерживают в тающем льду при 0 С 30 мин.
Измерение скорости снижения температуры семени в процессе зквилибрации при 0 С показало, что при сравни- 25 тельно небольших объемах семени (10-100 мл ) за 2 ч температура снижается с 26 до 4-6 С. Тогда как при зквилибрации семени объемом 200-400 мл в течение двух часов температура от
26 С снижается только до 9-12 С (табл. 1 и 2) .
Лишь только эквилибрация семени объемом 200-400 мл в течение 5 час при 0 С позво. яет снизить его температуру.до
3-4 С. . Следовательно,при эквилнбрации семени в течение двух часов при больших объемах, основная цель эквилибрации доведение температуры семени, близкой к О С для снижения интенсивности обменных прОцессов в семени перед замораживанием — остается не достигйутЬЙ, что и является причиной ñíéжения живучести семени после оттаивания.
Продление времени эквилибрации при температуре О С не оказало существенного влияния на выживаемость сперматозоидов после оттаивания. Для достижения более быстрого снижения температуры à процессе эквялибрации разбавленное семя помещали в тающий лед и холодильник с температурой О+1 С (табл. 3) .
Как видно из таблицы, семя, зквнлибрированное в течение двух часов
s тающем льду и холодильнике, имеет низкую активность и живучесть семени после оттаивания, пЬ сравнению с
601006
Таблица 1
3 2 1
5 4 2
7 5 3
9 6 4
13
16
8
1 1
16
6
8l
12
4
6.
10 2,0
100 2 5
200 2;5
400 5,2.
Таблица 2
0,4 0 17
0,35 0,17
0,2 0 13
0117 О, 1
0,7.
0,1
0,13
0,1
10 2,0
100 2,5
200 2,5
400 5,2 семенем, помещенным в холодильник с температурой 0 С.
Более высокую выживаемость снерматозоидов после оттаивания имеет семя; эквилибрированное в холодильнике .в течаним двух часов, а затем помещенное на 30 мин в тающий снег или лед и холодильник
Изучение окислительно-восстановительных процессов з семени в процессе эквилибрации при О С показало, что здесь проискодит постепенное снижение дегидрогенаэной активности сперматозоидов и йх живучесть после .оттаивания выше в семени, которое эквилибрнровалось в течение 120-150мин при малом объеме (до 100 мл) по сравнению с семенем, имеющим боле короткий период эквилибрации (табл.4).
Дегидрогеназную активность сперматозоидов определяли по времени обесцвечивания метиленовой сини.
Из.приведенных данных видно, что при подготовке семени жеребца к Г .замораживанию охлаждение его следует проводить небольшими объемами
Ю (по 100 мл) при высоте слоя семени
2,0-2,5 см в холодильнике при Î С в .течение двух часов, а затем на
ЗО мин помещать в тающий лед в холодильнике.
Я - Дополнительная выдержка оттаянной спермы в течение 30 мин в холодильнике повышает активность и живучесть сперматозоидов иа 3-5%.
0,07 . 0,01 0,01 0,01
0,07 0,01 0,01 0,03
0,13 0,03 0,03 0,03
0,1 0,05 0,05 Or03
6О1ОО6
Влияние режима охлаждения семени и его живучесть после оттаивания в 3-х режимах та бли ца 3 170+5,9
170+5)9
156+7,6
10 26
100 26
250 26
3,4+0,1
3,4+0,1
3,2+0,12
6 3,5
8 6
1 10
13 8
17 12
20 17
0
175+9,5
175+9,5
170+8,7
3,5+0,16
3,4+0,1
3,4+0,1
10 3,5
100 б
250 10
89+4,6
98+5,9
108+7,5
0 О
2 0
10 0
5
2020,11
2)0 0)11
2,3+0,2
0 0
0 0
О 0
10 26
100 26
250 26
1 — Семя зквилибрироваяи в холодильнике при
0 в течение 2-х часов
2 — Семя зквилибрировали в течение 2-х часов в холодильнике при 0 ) а затем 30 минут и тающем льду в". холодильнике
3 — Семя зквилибриронали в тающем, льду в
-М l холодильнике в течение двух часов
Примечание
Влияние времени эквилибрации,: семени при 0 С на сохранение окислительно-восстановительной системы сперматозоидов в процессе замораживания а л и ц а
Та бл Время обесцвечиванияметиле-- Активность СпермаПоказатель переживае.ости ереживаемость) ч новой сини, мин) на 1 млрд.
l подвижныя сперматозоидов тозоидов, балл
После оттаи- ;.Перед вания,:замораживани ем
После замораживания
После оттаивания оремя эквилибрации семени при О С перед заморажив а ни)ж) мин.10
150.
1)4+0)15.
1,6 0„14
1,7+0,.15 ,1,7+0 16 ,1)8та)16 .1,8+0,17
3,4 0.,33
2,810,21
2,5+0,13
2,3+0,12
2,1+0,15
2,1+0,15
5f0i13
5+0,13
5+0)13
5+O,13
5+0,13
5 0)13
1)4т0)15
2,3+0,14
2,710,19
3;1+0,13
3,110,14
3,110,12
55 +9
127@0
169т1 7
193+1 7
196И6
196+16
40 +6
134+28
210+31
272 31
276 30
60100б
Формула изрбретения
Составитель А,. Макаров редан тор (l. Скворцова ТехредЕ.давидович Корректор
Заказ 1619/I цинипи
Тираж 703 Подписное
1 осударственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва Ж-35, Раущская наб., д. 4/5 .
ФИ1!Ийл ППП ПатЕНт, Г, ужГОрОд, уЛ. ПрОЕКтиая, 4
Способ подготовки семени жеребца к замораживанию, включающий разбавление его защитной средой и последующую эквилибрацию семени путем выдерживания
ez o нри О С в течение двух часов, о тличающий с ÿ тем, что, с целью повышения актиьности и живучести сперматозоидов после оттаивания, f после эквилибрации семя дополнительно выдерживают в тающем льду при О С в течение 30 мин.
5 Источники информации принятые во внимание при экспертизе:
1..Алиев А. A. Усовершенствование технологии замораживания спермы, Ж. Коневодство и конный спорт °, 1ч75, 10 В 7, с. 30.—