Способ получения конидиального материала грибов рода

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С A Н И E 6О ЗОЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 09.11.76 (21) 2420726/28-15 с присоединением заявки ¹â€” (23) Приоритет— (43) Опубликовано 05.04.78. Бюллетень ¹ 13 (45) Дата опубликования описания 20.04.78 (51) М.К ч С 12 К 1j00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 63:576.8 (088.8) (72) Авторы изобретения

А. В. Хотянович, H. А. Веденеева и В. И. Попов

Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии и Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений (71) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ

КОНИДИАЛЬНОГО МАТЕРИАЛА ГРИБОВ

РОДА НELMINTHOSPORIUM

Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и может быть использовано для получения инфекционного материала фитопатогенных грибов с целью искусственного заражения растений:при селекции на устойчивость к соответствующим заболеваниям.

Известно выращивание грибов на пшеничных отрубях для получения конидиального материала (1).

Конидии фитопатогенных грибов получают на зерне кукурузы, пшеницы, овса, сорго, ржи или ячменя (2).

Недостатком известных способов является то, что они не,позволяют получить большого 15 выхода конидий. Кроме того, получаемый любым из этих способов материал быстро теряет при хранении жизнеспособность и вирулентность. На конец, использование относительно дорогостоящего сырья (зерно) ведет к удоро- 20 жанию .производства.

Целью изобретения является увеличение выхода конидий, удешевление производства и обеспечение сохранения жизнеспособности материала и его вирулентностп в течение длительного времени.

Поставленная цель достигается тем, что грибы рода Helminthosporium выращивают поверхностным методом на отйосительно бедной з0 среде, полученной на основе подсолнечной лузги.

Обычно для максимального накопления конидий грибы выращивают при относительно низких температурах (10 — 15 С), лучшие в двух темпвратурных режимах: вначале при

24 — 26 С,,когда происходит преимущественно вегетативный рост, затем при 12 16 С, когда происходит преимущественно репродукция конидий.

Для приготовления питательной среды подсолнечную лузгу предпочтительно измельчают, заливают 2 — 2,5%-ным раствором аммиака, автоклавируют, промывают до рН промывных вод 7,0 — 7,5, высушивают до воздушно-сухого состояния и,прибавляют:,к ней раствор минеральной основы среды Чапека, в,которую чаще всего вводят,0,4 — 0,6% крахмала, что лимитирует рост гриба, но способствует образованию конидий.

Первый вариант.

К 1 кг размельченной воздушно-сухой подсолнечной лузги прибавляют 4 л 2 — 2,5%-ного раствора аммиака, автоклавируют 30 мин при

1 атм, промывают лузгу водой до рН:промывных вод 7,0 — 7,5 и высушивают до воздушносухого состояния. Прибавляют 800 мл раствора, содержащего минеральную основу среды

Чапека с добавлением 0,5 f> крахмала.

601309

Фор,мула изобретения

Составитель М. Мирзаев

Техред И. Рыбкина

Корректор И. Симкина

Редактор Т. Шарганова

Заказ 118/217 Изд. М 119 Тираж 568

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Тип. Харьк, фил. пред. «Патент»

Второй вариант.

Отмытую от а ммиака лузгу отжимают (пресс, центрифуга) до получения остаточной влажности около 30% и .прибавляют 600 мл указанного питательного раствора, концентрация веществ в,котором увеличена на 25%.

Полученный субстрат стерилизуют 20 мин при 1 атм, равномерно инокулируют 500 мл

24 — 36-часовой культуры, гриба, полученной глубинным методом.

Инокулированный субстрат размещают слоем толщиной 7 — 10 см в,кюветы (колбы, бутыли), в которые обеспечен свободный доступ воздуха. Выращивание ведут:прп 24—

26 С в течение 3 — 4 суток (первая стадия) и затем при 12 — 16 С в течение 5 — 15 суток (вторая стадия), После завершения выращивания субстрат вместе с грибом высушивают одним из известных методов (при тепловой сушке — не выше 40 С) . В полученной сухой массе вручную или механически растирают образовавшиеся комочки для получения однородного сыпучего:материала. Содержание конидий в препарате 15 — 25% от общего веса.

Препарат хранят в обычных условиях при комнатной температуре.

Предлагаемый способ получения конидиального материала отличается;простотой выполнения, не требует применения специального технологического оборудования при массовом производстве, кроме тото, применяются доступные и недорогие материалы и практически,полностью исключается использование лищевых ингредиентов (кроме, крахмала) .

В процессе выращивания грибов на предлагаемой относительно бедной среде при высокой норме засева даже в полустерильных условиях культура практически не инфицируеТся посторонней микрофлорой.

Препарат, полученный предлагаемым способом, обладает относительно большей инфекционностью по сравнению с зерновым препаратом за счет большего содержания конидий.

Обеспечена высокая вирулентность культуры ло отношению:к растениям при хранении сухого препарата в обычных условиях.

1. Способ получения конидиального мате1о риала грибов рода Helminthosporium, включающий их выра|щивание на твердых питательных субстратах и последующее высушивание биомассы, отл и ча ю щи йс я тем, что, с целью увеличения выхода конидий, удешевле15 ния .производства целевого продукта, обеспечения сохранения жизнеспособности материала,и его вирулентности |в течение, длительного времени, |грибы вьиращивают на бедной среде, полученной на осно ве,подсолнечной лузги.

20 2 Способ по и. 1, отличающийся тем, что для приготовления питательной среды подсолнечную лузгу измельчают, заливают

2 — 2,5 /о-ным раствором аммиака,,автоклавируют, промывают водой до рН промывных вод

25 7,0 — 7,5, высушивают,до воздушно-сухого состояния и прибавляют к ней раствор минеральной основы среды Чапека.

3. Способ iso и. 2, отличающийся тем, что в минеральную основу среды Чапека

8О вводят 0,4 — О,бв/в крахмала.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выращивание грибов ведут последовательно в двух температурных режимах: при

24 — 26 С вЂ” стадия преимущественного вегетативного роста и при 12 — 16 С вЂ” стадия преимущественной репродукции конидий.

Источники информации,,принятые во внимание при экспертизе:

4О 1. Евтихов П. Н. Микробиологический синтез, М., li967, с. Ii0 — 11, 1,3.

2. Патент США М 3357895, кл. 195 — 81, 1967.