Штамм ,используемый для выявления бактериофагов молочнокислых стрептококов

Штамм ,используемый для выявления бактериофагов молочнокислых стрептококов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О ГГ И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

1,11. 605833 (61) Дополнительное к авт. свил-ву— (22) Заявлено 03.05,76 (2? ) 2357582/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 05.05.78. Б оллетень ¹ 17 (45) Дата опубликования описания 0504.78 .

gI (511 M. Кл.

С»К1/02

A 23 С 9/12

Госудорствеииый комитет

Совете Мииистров СССР оо делам изобретений и открытий (53) УДК

663.13 (088.8) (72) Авторы изобретения

A. В. Гудков, 10. K. Фомичев, A. И. Сельсков и В М. Докукин

Всесоюзный научно-исследовательский институт маслодельной и сыродельной промышленности и Белорусский ордена Трудового Красного

Знамени Государственный университет им. В. И. Ленина (71) Заявитель (54) ШТАММ STREPTOCOCCUS lACTiS N 3938 — S, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ

БАКТЕРИОФАГОВ МОЛОЧНОКИСЛЫХ СТРЕПТОКОККОВ

1 2

Изобретение относится к производству молоч- цепочки клеток короткие — в основном динлококных продуктов и представляет собой новый ипат ки. молочнокислых стрептококков, используемый для В бульоне из гидролиэованного молока в ставыявления лизогенных штаммов молочнокислых дии интенсивного pocra образуют равномерную густрептококкон. етую взвесь. Суточная бульонная культура равноОдиим из способов повышения эффекптвнос- мерно мутная с небольшим зернистым осадком, тн микробиологических производств является при- При взбалтывании осадок легко взмучивается. менение мер борьбы с бактериофагами. При посеве 18.- асовой бульонной культуры в свеt :

Известен штамм Streptococcus iectis Р 710 — жий бульон из гидролизованного молока в коли$;используемый дяя выявления бактерифагов мо- 1р честве 1% по объему наблюдается lag — фаза 60 мин. лочнокислых стрептококков. Максимальная концентрация клеток, 8 — 10 х 10е

Однако этот штамм предназначен для выявле- клеток/мл, достигается за 7 часов инкубирования ния только вирулентных фагов и не обладает чув- при 30 С. Способность к росту сохраняется при ствительностью к дефектным (умеренным) фагам, концентрации стрептомицина в бульоне до 1000ЕО/мл, индуцируемым лизогенными штаммами. 1> При посеве в молоко 1% 18 часовой бульонной кульЦелью изобретения является выявление и изу- туры сгусток образуется за 11 — 12 часов, Сгусток чение штаммов, чувствительных к умеренным фа- плотный, равномерный,консистенция колющаяся, гам. При посеве. уколом в мясо-пептонную желаВ результате изучения 171 нпамма молочно тину наблюдается слабый рост по линии укола. кислых культур выделен ппамм Streptococcus >< Разжижения среды нет. При посеве на агар из гид1ectis N 3938, имениций следукицие морфологичес. ролизованного молока в чашке Петри через 2 дня кую и физиолого биохимическую характеристики. образуются круглые, белые, блестящие, выпуклые, Величина клеток суточной культуры яв arape с ровным краем колонии. Размер колоний 0,8— из гидролизованного молока (Bo В. М. Богданову) 1,0 мм. Способность к росту сохраняется при кои1,0-1,1 мк. Форма клеток слегка эллипсоидная, 95 центрации стрептомицина в среде до 1000 ЕД/мл.

605833

Отношение к углеводам.

Сбраживает глюкозу, галактоэу, лактозу и мальтозу с образованием кислоты.

Сахарозу и маш ит не усваивает.

Чувствительность к бактериофагам. При изучении чувствительности шимми Streptococcus

lactis N 3938 — S" к 52 вирулентяым умерекньпа. фагам молочнокислых стрептококков установлено, что данный фаг чувствителен 24 фагам.

Штамм Streptococcus iactis N 3938 — S» от lO личается or других штаммов молочнокислых стреп тококков по набору дизирующих фагов (фаготипу) и характеру негативяьи колоний, которые образуют бактериофаги при культивировании на данном штамме. lб

Используя упомянутые признаки, штамм

Streptococcus lectis N 3938 — S может быть леГко идентифицирован.

Данный штамм вьщелен из домашней просто. кваши. Для вьщеления этого штамма в 10 мл cre-2О рильного обрати внес к одну каплю сметаны, вы держивали при 30 С до свертывания, после чего посеяли на поверхность. мясо-пептонного агара или гидролизоваяного агара и агара с лимоняокяслым калишем, выращивали при 30 С в течение 48 часовр

Лля получения стрептомицина резистентого му- танта 18-часовую культуру высевали на МГА с

200 ЕД/мл стрептоьищина. %шки Петри с посевом. ннкубировали в термостате 48 часов нри 30 С.

В результате определения чувствительности ЗО был отобран штамм Streptococcus iactis и 3938, который лизировался 24 фагами из 52 изученных.

Штамм подвергали ультрафиолетовому облу чению.

Пример, Выявление фатов при помощи штамма Streptococcus iactis.N 3938- —.3 в про.

Р бах.

А. Подготовка газонов штамма Streptococcus lectis N 3938 — 8 .

В чашки Петри разливают по 25 — 30 мл 40

1,5 -ного агара из гидролнэованного молока с.

200 ЕД/мл стрептомишша. После застывания агара чашки подсушиваются в течение 3-4 часов. В пробирки предварительно разлйвается по 2 мл.

0,б о-ного arapa из гидролизоваиного молока с 45

200 ЕД/мл стрептомицина. Перед использованием пробирки подогреваются 8 водяной бане при 100 С о для расплавления агара и охлаждыотся до 45 С.

Затем в каждую пробирку вносится по 0,5 мл

18-часовой культуры:Streptococcus iactis и 3938- 60

S и содержимое каждой пробирки выливается яа поверхность 1,5 o-ного агара в чашке Петри, равномерно распределяется и выдерживается до застывания верхнего слоя О,б о-ного arapa с культурой. Ы

В. Выявление бактериофагов.

На застывший верхний слой наносятся капли испытуемых проб. На одной чашке одновременно испьпывается 4 пробы. Для этого чашку делят на 4 сектооа и в каждый сектор помещают по од-с0 ной капле из различных проб. После подсыхания капель vd,. é инкубируются в Ieрмоствте llpH

30 С 18 — 24 часа.

Учет результатов проводится следуиицим обра3оМ. Засеянные методом двойного слоя бактеpm образуют равномерный мутный газон.

Если на месте яанесеии капель образуется прозрачное пятно ши мелкие прозрачные пятныш. ки, то это свидетельствует о том, что в данной пробе содержится бактериофаг, активный против ппамье Streptococcus lectis И 3938 — 8, В том же случае, если на месте нанесения капли образуется такой же газон, как и на всей чашке, то баФтериофагов, лиэирующпх штамм Streptococcus

lactis 3938 Вь „в испьпуемой пробе нет.

Формула изобретения

Штамм Streptococcus hctis Й 3938 — &, исr пользуемый для выявлении бактериофагов молочнокислых стрептококков. Хранится в коллекции Всесоюзного научно исследовательского института маслодельной и сыропеллной промьшшенносги.

Морфологические признаки, Вели вша клеток суточной культуры на агаре из гидропизованного молока l — l,l мк. Фор ма клеток эллипсоидная. Цепопси клеток короткие — в основном шшлококки, Физиологические признаки.

Оргаш ческая среда. В бучьоне иэ гидролизованного молока в стадии интенсивного роста образует равномерную густую взвесь. Суточная бульонная культура равномерно мутная. с зерш стым осадком, располагаинцимся тонким слоем по дну пробирки, При взбалтываняи осадок легко взмучива. ется.

При посеве 18-часовой бульоьщой культуры

s свежий бульон из гидролизованного молока в

;..оличестве 1% по объему. наблюдается leg — фаза..60: мин. Мака мальная концентрация клеток, 8-)0x10e:Knetoêtìn, достигается за 7 .часов инку.бирования при 30 С.. Способность к росту сохраняется при ко>щентрации стрептомицияа в бульоне до 10ОО, ЯД/мл.

При посеве: и молоко 1% 18-часовой бульонной культуры сгусток обраэуетси за 11 — 12 часов.

Сгусток нлотньй, равномерный; колющейся консисте щии.

При посеве уколом в мясо.пептонную жела тину. наблюдается слабый рост по линии укола.

Разжижения среды иет.

При посеве на агар иэ гидролизованиого молока в чашке Петри через два дня образуются круглые, гладкие, белые, блестящие, выпуклые, с ровным краем колонии. Размер коложй 0Ä8—

l мм. Способность к росту сохраняется при концентрации стрептомицииа в среде до 1000 ЕД/мл.

Отношение к углеводам..

605833

Источники информации, принятые во внимание при жспертиэе:

Составитель H. Привалов®

Техред Н.Андрейчук Корректор А.власенко Рйюктор О. Иванова

Эаказ 2339/17 Тираж 568 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР но делам изобретений и открьпий

113035, Москва, Ж-35,Раушская наб., a. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Сбраживаитт глккоэу, галактоэу, лактоэу, лель тоэу с обраэованием кислоты, Сахароэу и маииит не усваивает.

Чувствителен к 24 вирулентиым бактериофа 1. Заявка и 2178543/13, кл. С 12 К 1/02, :гам мопочнокислых стреппжокков, встречаиацимн- 5 1976, по которой принято решение о выдаче автор.ся в природе. ского свидетельства.