Способ выращивания микроорганизмов

Способ выращивания микроорганизмов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОЛИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1111 608830

Союз Совбтских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 16.02.77 (21) 2454452/28-13 с присоединением заявки № (51) М. Кл з С 12В 1/08

С 12В 3/14

Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий (43) Опубликовано 30.05.78. Бюллетень № 20 (45) Дата опубликования описания 07.06.78 (53) УДК 663.14(088.8) (72) Авторы изобретения

М. Я. Витол, А. Я. Лишмане и С. P. Вилкс

Латвийский ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. П. Стучки (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

ГосУдаРственный комитет (23) Приоритет

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способам выращивания микроорганизмов.

Наиболее близким по технической сущности является способ выращивания микроорганизмов, например бактерий, в условиях аэрации на питательной среде с добавлением биостимулятора — диметилсульфоксида (1).

Однако добавление этого стимулятора в количестве 3% даст прирост биомассы только на 16%.

Цель изобретения — увеличение и ускорение прироста биомассы микроорганизмов.

Это достигается тем, что в качестве биостимулятора используют неорганическую полифосфорную кислоту в количестве 0,003—

0,1% от объема среды.

Стимулирующий эффект неорганической полифосфорной кислоты выявлен на следующих классах микроорганизмов: бактериях

Pseudomonas fluorescens 310, Bacillus subtilis, Муса bacterium 1acticolum, Flavobacterium

suaveolens, грибах Aspergillus niger, актиномицетах Actinomycites aureofaciens.

Пример 1. Производилась инкубация

Bacillus subtilis при 28 С в течение 5 суток на качалках со скоростью 100 об/мин в питательной среде следующего состава:

КзНР04 ° ЗН О 0,05%, MgSO4 ° 7НзО 0,003%, янтарная кислота 0,1%, глицерин 0,4%, смесь

2 микроэлементов 1 мл/л (состав: НзВОз 0,5%, NH4MoO4 0,5%, ZnSO4 ° 7Н20 0,04%, MnSO4 4Н20 0,6%, CuSO4 5Н20 0,004%, Со$04 0,5%), дрожжевой автолизат 0,001%, 5 (ИН4)з$04 0,1%, РеС1з 6НзО 0,0001%, неорганическая полифосфорная кислота 0,05%, остальное дистиллированная вода. рН среды

7,2 — 7,3.

Состав контрольной среды: КзНР04 ЗНзО

10 0,05%, ГеС1з 7НзО 0,003%, янтарная кислота

0,1%, глицерин 0,4%, смесь микроэлементов

1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001%, (NH4)gSO4 0,1%, теС1з 6НзО 0,0001%, диметилсульфоксид 100 р. р. т, остальное дистиллированная вода. рН среды 7,2 — 73.

Прирост биомассы В. subtilis в среде с неорганической полифосфор ной кислотой на вторые сутки 0,56 г/л, что на 127,3% больше

20 количества биомассы В. subtilis в контрольной среде (0,44 г/л), а на пятые сутки—

1,08 г/л (174% ) .

Пример 2. Проводилась пнкубация Mycobacterium lacticolum при 28 С в течение

25 5 суток на качалках со скоростью 100 об/мин в питательной среде следующего состава:

КзНР04 ЗНзО 0,05%, MgSO4 7Н20 0,003%, янтарная кислота 0,1%, глицерин 0,001%, (NH4)gSO4 0,1%, РеС1з 6Н20 0,0001%, неор30 ганическая полифосфорная кислота 0,1, ос608830

15

3 тальное дистиллированная вода. рН среды

7,2 — 7,3.

Состав контрольной среды: КзНРО» ЗН О

0,5 /о, MgSO».7Н О 0,003 /о, янтарная кислота

0,1о/о, глицерин 0,4 /о, смесь микроэлементов

1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 /о, (ИН»)з$0» 0,1/о, 1. еС1з 6Н О 0,0001 /о, диметилсульфоксид 150 р.р.т, остальное дистиллированная вода. рН среды 7,2 — 73.

Прирост биомассы М. lacticolum в среде с неорганической полифосфорной кислотой на вторые сутки 1,06 г/л, что на 125о/о больше количества биомассы M, lacticolum в контрольной среде (0,85 г/л), а на третьи сутки—

1,50 г/л (125о/о).

Пример 3. Проводилась инкубация

Pseudomonas fluorescens 310 при 28 С в течение 5 суток на качалках со скоростью

100 об/мин в питательной среде следующего состава: КзНРО» ЗН О 0,05 /о, MgSO» 7НзО

0,003 /о, янтарная кислота 0,1 /о, глицерин

0,4о/о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 /о, (NH») SO» 0,1 /о, РеС1з 6Н О 0,0001 /о, неорганическая полифосфорная кислота 0,1 /о, остальное дистиллированная вода. рН среды 7,2 — 7,3.

Состав контрольной среды: КзНРО» ЗН О

0,05 /о, MgSO» 7Н О 0,003 /о, янтарная кислота 0,1 /о, глицерин 0,4 /о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 /о, (NH4)ISO» 0,1 /о, геС1з 6НзО 0,0001 /о, диметилсульфоксид 100 р. р. т, остальное дистиллированная вода.

Прирост биомассы P. fluorescens в среде с неорганической полифосфорной кислотой на вторые сутки 0,70 г/л, что на 180 /о больше количества биомассы P. fluorescens в контрольной среде (0,39 г/л), а на шестые сутки — 1,50 г/л (125 /о).

Пример 4. Проводилась инкубация

Pseudomonas fluorescens 310 при 28 С в течение 5 суток на качалках со скоростью

100 об/мин в питательной среде следующего состава: КзНРО» ЗНзО 0,05 /о, MgSO» 7Н О

0,003 /о, янтарная кислота 0,1 /о, глицерин

0,4 /о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 /о, (NH») з$0» 0,1 /о, FeC13.6Hg0 0,0001 /о, неорганическая полифосфорная кислота О,lо/о, остальное дистиллированная вода.

Состав контрольной среды: КзНРО» ЗН О

0,05/о, MgSO» 7НзО 0,003/о, янтарная кислота 0,1 /о, глицерин 0,4 /о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 /о, (NH»)ISO» 0,1 /о, РеС1з 6НзО 0,0001 /о, диметилсульфоксид 100 р. р. т, остальное дистиллированная вода.

Прирост биомассы Р. fluorescens 310 в среде с неорганической полифосфорной кислотой на вторые сутки 0,71 г/л, что на 183 /о больше биомассы в контрольной среде (0,39 г/л), а на шестые сутки — 1,35 г/л (113 о/о ) .

П р и м ер 5. Проводилась инкубация

P. fluorescens 310 при 28 С в течение 5 суток

ЗО

65 на качалках со скоростью 100 об/мин в питательной среде следующего состава:

КзНРО» ° ЗН О 0,05 /о, MgSO» 7НзО 0,003 /о, янтарная кислота. 0,1 /о, глицерин 0,4 /о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 /,, (NH») $04 0,1 /о, РеС1з. 6Н 0

0,0001о/о, неорганическая полифосфорная кислота 0,003 о/о, остальное дистиллированная вода.

Состав контрольной среды: К НРО» ЗН О

0,05/о, MgSO».7Н О 0,003 /о, янтарная кислота 0,1 о/о, глицерин 0,4 /о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 о/о, (МН»)з$0» 0,1 /о, ГеС1з 6НзО 0,0001 /,, диметилсульфоксид 100 р. р. т.

Прирост биомассы P. fluorescens 310 в среде с неорганической полифосфорной кислотой па вторые сутки 0,42 г/л, что на 108о/о больше количества биомассы P, fluorescens

310 в контрольной среде (0,39 г/л), а на шестые сутки — 1,26 г/л (105 /о).

Пример 6. Проводилась инкубация

Flavobacterium suaveolens при 28 С в течение 24 ч на качалках со скоростью

100 об/мин в питательной среде следующего состава: К НРО» ЗН О 0,05 /о, MgSO» 7HgO

0,003 /о, сахароза 6/о, пентон 1 /о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат

0,001 /о (NH») 2$0» 0,1 /о, FeC13 6НзО 0,0001 /о, неорганическая пол ифосфорна я кислота

0 05о/о, остальное дистиллированная вода. рН среды 7,2 — 7,3.

Состав контрольной среды: К НРО». ЗНзО

0,05 /о, MgSO» 7НзО 0,003 /о, сахароза 6 /о, пентон l о/о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 /о, (NH») $0»

0,1 /о, РеС1з 6Н О 0,0001 /о, диметилсульфоксид 500 р. р. т, остальное дистиллированная вода. рН среды 7,2 — 7 3.

Эффект стимуляции неорганической полифосфорной кислоты на рост F. suaveolens на

1l-ом часу 0,50 г/л, что на 115о/о превышает прирост биомассы в контрольной среде (0,37 г/л), а через 24 ч — 1,13 г/л (101,6о/о).

Пример 7. Проводилась инкубация

Bacillus subtilis при 28 С в течение 24 ч на качалках со скоростью 100 об/мин в питательной среде следующего состава: К НРО».

ЗН,О 0,050/о, MgSO» 7Н О 0,0003 /о, сусло (а = 1,028) 25 об., смесь микроэлементов

1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 о/о, (ЙН»)з$0» 0,1 /о, РеС1з 6Н О 0,0001/о, неорганическая полифосфорная кислота 0,05 /о, остальное дистиллированная вода. рН 7,2 — 7,3.

Состав контрольной среды: КзНРО» ЗН О

0,05, Мд$0». 7НзО 0,003, сусло (а =

=- 1,028) 25 об. ; смесь микроэлементов

1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001, (NH»)ISO» 0,1 /о FeCla 6Н О 0,0001 /о, диметилсульфоксид 500 р.р.т, остальное дистиллированная вода. рН среды 7,2 — 7,3.

Эффект стимуляции неорганической полифосфорной кислоты на рост В. subtilis через

12 ч 1,40 г/л, что на 124 /о больше количества

608830

Формула изобретения

Состаивтель Н. Селиверстова

Корректор Л. Котова

Техред Л. Гладкова

1 едактор М. Дмитриева

Подписное

Заказ 688/13 Изд. Мв 428 Тираж 568

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, >К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

5 биомассы В. subtilis в контрольной сре",e (1,2 г/л), а через 15 ч 1,52 г/л;117",;,).

Пример 8. Проводилась инкубация

Flavobacterium suaveolens при 28 С в течение 48 ч на качалках со скоростью

100 об/мин в питательной среде следующего состава: К2НР04.3НзО 0,05 /о, MgSO4 7Н-О

0,0003/о сусло (а = 1,028) 25 об, /о, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой гвтолпзат

0,001 /о, (NH4) $04 0,1 /о РеС1з бН О0,0001 /о, неорганическая полифосфорная кислота

0,05о/о, остальное дистиллированна", вода. рН среды 7,2 — 7,3.

Состав контрольной среды: К4НР04 ЗН20

0,05 > MgSO4 7НзО 0>0003, сусло (а =

1028) 25 об. /о, смесь

1 мл/л, дрожжевой автолизат 0,001 оо, (КН4)з$04 0,1 /о, FeCI) 6Н.О О>0001оg дп>4стилсульфоксид 500 р. р. т, остальное дистиллированная вода, рН среды 7,2 — 7,3.

Эффект стимуляции неорганической полифосфорной кислоты на рост F. suaveolens через 26 ч 0,48 г/л, что на 150о/о больше биомассы F. suaveolens в контрольной среде (0,32 г/л), а через 48 ч — 1,2 г/л (120о/о).

Пример 9. Проводилась инкубация

Pseudomonas fluorescens 310 при 28 С 13 течение 24 ч на качалках со скоростью

100 об/мин в питательной среде следующего состава: КзНРО4 ЗН О 0,05 /о, Мд$04 7Н О

0,003 /о сусло (а = 1,028) 25 об. ",,, смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожжевой автолизат

0,001 /о, (NH4)g$040,1 /о, 1. еС1з 6НзО 0,0001 /о, неорганическая полнфосфорная кислота

0,05 /о, остальное дистиллированная вода. рН среды 7,2 — 7,3.

Состав контрольной среды: К>НРО4 ЗН О (,05о/о,;g$04 7Н20 0,003 /о, сусло (а=1,028)

25 об., смесь микроэлементов 1 мл/л, дрожгжевой автол изат 0,001 /о, (NH4) з$04 О, 1 /о, 5 РеС!з 6Н20 0,0001 /о, диметилсульфоксид

500 р. р. т, остальное дистиллированная вода, рН среды 7,2 — 7,3.

Эффект стимуляции неорганической полифосфорной кислоты па рост Р. flu<)i escoils

1О 310 через 12 ч 1,01 г/л, что на 138,бо/о больше количества биомассы P. fluorescens 310 в контрольной среде (0,73 г/л), а через 19 ч—

1, 18 г/л (129 б о/о )

Использование предлагаемого способа вы15 ращивания микроорганизмов с применением неорганической полифосфорпой кислоты ооеспечивает увеличение биомассы i!.- . !?Î вЂ” 130 /о для бактерий по сравнению с диметилсульфоксидом, 140 /о для грибов и 120 /о для актино20 мицетов, Способ выращивания микроорганизмов, например бактерий, г, условиях аэрации на питательной среде с добавлением биостимулятора, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса выращивания, в качестве биостимулятора используют неорганическую

30 полифосфорную кислоту в количестве

О,ООЗ /„— 0,1 /о от объема среды.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

35 1. Патент США N 3558434, кл. 195-81, опублик. 1971.