Штамм 1414-продуцент липазы

Штамм 1414-продуцент липазы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ц 608 834

Союз Советских

Сониалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 05.01.77 (21) 2441030/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 30.05.78. Бюллетень № 20 (45) Дата опубликования описания 07.06.78 (51) М. Кл е С 12Р 13/10

Государственный комитет

Совета Министров СССР во делам изобретений н открытий (53) УДК 576.15.08 (088.8) (72) Авторы изобретения

И. М. Грачева, А. А. Милько, Т. Г. Мухамеджанова, Л. И. Войно и Т. В. Гриднева

Московский ордена Трудового Красного Знамени технологический институт пищевой промышленности (71) Заявитель (54) ШТАММ RHtZOPUS ORVZAE 1414 — ПРОДУЦЕНТ ЛИПАЗЫ

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения ферментов.

Известен штамм Rhizopus microsporus

УЗЛТ-1 — продуцент липазы (1).

Недостатком этого штамма является его невысокая липолитическая активность.

Цель изобретения — выделить штамм с высокой липолитической активностью.

Это достигается при использовании штамма

Rhizopus oryzае 1414.

Штамм Rhizopus oryzae 1414 — продуцент липазы хранится в коллекциях Московского ордена Трудового Красного Знамени технологического института пищевой промышленности и Киевского института микробиологии и вирусологии им. Заболотного под регистрационным номером 1414 и характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками, позволяющими отличить его от других штаммов.

Культурально-морфологические признаки

Колонии с хорошо развитым воздушным вегетативным мицелием, войлочные, высотой

1,0 — 1,5 см, неокрашенные или при развитии спороношения темно-пестро-серые. Ризоиды короткие и слабо разветвленные, немногочисленные, Столоны слабо выражены. Стилоспорангиеносцы прямые и извилистые, 10 — 20 р в диаметре, с промежуточным вздутием в месте ответвления, буроватые, отходят по 1 — 3 от шейки ризоида, столоновидных гиф или являются продолжением последних, длиной

5 500 р, и более. Стилоспорангии в диаметре

50 †1 и. Колонка эллиптически-шаровидная, размером (40 — 80); (35 — 70) р, коричневато-бледно-серая. Апофиза блюдцевидная.

Спорангиеспоры неправильно-шаровидные, 10 размером (5 — 8); (5 — 6) р. Хламидоспоры многочисленные, шаровидные, длиной до 30—

40р,. Зигоспоры диаметром 120 — 140,. Копулирующие отроги одинаковых размеров.

Среда Чапека. Колонии растут быстро, достигают краев чашки Петри диаметром 90 см на вторые сутки. Вначале колонии белые, с возрастом серого цвета. Среда не окрашена.

Сусло-агар. Колонии растут быстро, дости20 гают краев чашки Петри диаметром 90 см на вторые сутки. Края колонии становятся темно-серого цвета на вторые — третьи сутки, в центре колонии войлок более светлый.

Пшеничные отруби. Через сутки отруби

25 полностью пронизаны белым мицелием.

Физиолого-биохимические признаки

Аэроб, максимальная температура роста

43 С.

Желатину не разжижает.

ЗО Молоко коагулирует, 608834

Составитель Н. Бондаренко

Редактор М. Дмитриева

Техред Л. Гладкова Корректор Т. Добровольская

Заказ 688/17 Изд. № 428 Тираж 568

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 475

Подписное

Типография, пр.

Сапунова, 2

Отношение к источникам углерода. Ассимилирует глюкозу, сахарозу, фруктозу, лактозу, маннозу, галактозу, маннит, а также говяжий, рыбий жиры, оливковое, подсолнечное, льняное, хлопковое, горчичное масло.

Отношение к источникам азота. Хорошо усваивает минеральный азот в аммонийнонитратной форме. Ассимилирует органический азот в форме пептона, желатина, казеина, кукурузного экстракта.

При культивировании на жидкой питательной среде определенного состава с перемешиванием и аэрацией синтезирует липазу.

Пример. Штамм Rhizopus oryzae 1414 выращивают на сусло-агаре в течение 5 суток. Полученным споровым материалом засевают колбы емкотсью 750 мл, содержащие по

50 мл питательной среды следующего состава %:

Соевая мука 2

Двузамещенный фосфат аммония 0,6

Однозамещенный фосфат калия 0,1

Сернокислый магний 0,05

Поливиниловый спирт 0,3

Оливковое масло 0,5

Вода Остальное рН 7,0 — 7,2

Культивирование проводят в течение трех суток при 30 С на качалках, вращающихся со скоростью 220 об/мнп.

Активность липазы определяют по методу

Ота и Ямада и выражают в микромолях олеиновой кислоты, освободившейся за 1 ч гидролиза. В качестве субстрата для действия липолитического фермента используют эмульсию оливкового масла.

За 24 ч культивирования накапливается

3200 ед. ЛС/мл культуральной жидкости.

Максимальная активность, равная 8060 ед.

ЛС/мл культуральной жидкости, наблюдается к 51 ч культивирования.

Штамм Rhizopus oryzae 1414 позволяет более чем в 9 раз интенсифицировать биосинтез липазы, которая используется в фармакологии, пищевой промышленности, в производстве антибиотиков, в качестве добавок в моющие средства, а также для ферментативного гидролиза касторового масла с целью получения себациновой кислоты — компонента пластмасс.

Формула изобретения

Штамм Rhizopus oryzae 1414 — продуцент липазы. Хранится в коллекциях Московского ордена Трудового Красного Знамени техно5

50 логического института пищевой промышленности и Киевского института микробиологии и вирусологии им. Заболотного под регистрационным номером 1414.

Культурально-морфологические признаки

Колонии с хорошо развитым воздушным вегетативным мицелием, войлочные, высотой

1,0 — 1,5 см, неокрашенные или при развитии спороношения темно-пестро-серые. Ризоиды короткие и слабо разветвленные, немногочисленные. Столоны слабо выражены. Стилоспорангиеносцы прямые и извилистые, 10 — 20 и, в диаметре, с промежуточным вздутием в месте ответвления, буроватые, отходят по 1 — 3 от шейки ризоида, столоновидных гиф или являются продолжением последних, длиной

500 р, и более. Стилоспорангии в диаметре

50 — 150 р. Колонка эллиптически-шаровидная, размером (40 — 80) )((35 — 70) н„коричневатобледно-серая. Апофиза блюдцевидная. Спорангиеспоры неправильно-шаровидные, размером (5 — 8) )((5 — 6) ц. Хламидоспоры многочисленные, шаровидные, длиной до 30 — 40@. Зигоспоры диаметром 120 — 140 р. Копулирующие отроги одинаковых размеров.

Среда Чапека. Колонки растут быстро, достигают краев чашки Петри диаметром 90 см на вторые сутки. Вначале колонии белые, с возрастом серого цвета. Среда не окрашена.

Сусло-агар. Колонии растут быстро, достигают краев чашки Петри диаметром 90 см на вторые сутки. Края колонии становятся темно-серого цвета на вторые †трет сутки, в центре колонии войлок более светлый.

Пшеничные отруби, Через сутки отруби полностью пронизаны белым мицелием.

Физиолого-биохимические признаки

Аэроб, максимальная температура роста

43 С. Келатину не разжижает.

Молоко коагулирует.

Отношение к источникам углерода. Ассимилирует глюкозу, сахарозу, фруктозу, лактозу, маннозу, галактозу, маннит, а также говяжий, рыбий жиры, оливковое, подсолнечное, льняное, хлопковое, горчичное масло.

Отношение к источникам азота. Хорошо усваивает минеральный азот в аммонийно-нитратной форме. Ассимилирует органический азот в форме пептона, желатина, казеина, кукурузного экстракта.

Источники информации принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР № 463932, кл. С 12D 13/10, 1975.