Способ идентификации граммотрицательный бактерий

Способ идентификации граммотрицательный бактерий

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О И E

ИЗОБРЕТЕНИЯ

CoIo3 Сеаетсиии

Социалистических

Республик (>>) 610863

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 05,01,77(21) 2438185/28-13

Ы (Ы) М. Кл.

С 12 К 1/04 с присоединением заявки ¹

Геврервтеевеыв еевет»т

6»»ета Мееевтре» 666Р ее ее»»я е»»46»тее»6 е еп»ит»6 (23) Приоритет— (43) Опубликовано 15,0678Бюллетень,% 22 (53) УДК 576.8,093., 31 (088. 8т (45) Дата опубликования описания 2005,78 (72) ) втори зобретен ия

Г. П. Кали н а (71) Заявитель

Московский ордена Трудового Красного Знамени научноисследовательский институт гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана (54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ГРАМ-ОТРИЦАТЕЛЬНЫХ

БАКТЕРИЙ

0,02-0,06

0,0 1-0, 03 25

0,06-1,0

0,2-0,6

0,04-0,08

0,006-0,01

0 55-0,65 зО

Изобретение относится к областИ микробиологии и может быть использовано в медицине при исследованиях патологического материала.

Известен способ идентификации грамотрицательных бактерий, например тифо-паратифозной группы, путем посева исследуемого материала на дифференцирующую среду, содержащую сахара, и видовой идентификации тифа-парати- I0 фозной группы бактеций по Ферментативным свойствам f1(. Однако известный способ является трудоемким.

Цель изобретения - упрощение способа. IS

Эта цель достигается тем, что посев осуществляют в оба слоя двуслойной среды, содержащей в первом слое следующие количества компонентов,2,г

Двузамещенный фосфат. калия 0,05-0,15

Одноэамещенный фосфат калия

Тиосульфат натрия

Глюкоза

Мочевина

Метиленовый синий

Феноловый красный

Агар

Питательный бульон до 100 мл а во втором слое (г):

Двузамещенный фосфат калия 0,05-0,15

Однозамещенный фосфат калия 0,02-0,06

Лимонно-аммиачное железо 0,01-0,03

Лактоза 0,8-1,2

Сахароза 0,8-1,2

Феноловый красный 0,004-0,01

Кристаллический фиолетовый 0,0001 0,0003

Агар 1,8-2,2

Питательный бульон До 100 мл причем второй слой наслаивают на первый и скашивают.

Нижний слой среды разливают по 2мя, в пробирки, охлаждают в вертикальном положении, стерильно наслаивают среду верхнего слоя, скашивают, оставив столбик высотой до 2 см.

Основные группы знтеробактерий и некоторых смежных семейств идентифицируют одновременно в одной емкости по пяти признакам: ферментации лактозы н (или) сахароэы, ферментации глюкозы, продукции газа при ферментации глюкозы, образования сероводорода, уреазной активности, разной степени цию сероводорода — по образованию черного кольца в столбике на границе нижнего и верхнего слоев. Изменения цвета индикатора в комбинации с различными степенями редукции метилено8 вого синего дают разные оттенки, придавая нижней части среды полихромный характер.

B таблице и выводах даны результаты испытаний.

Редукция метиле нового синего

Цвет нижнего столбика реазная ктивность ерментация люкозы

Сероводород

Соедний столбик узкое черное кольцо

Широкое черное кольцо

Обширное почернение всего столбика

Нет почернения или слегка серый оттенок

Скошенная поверхность Лактоза и (или сахароза

Оранжевый с переходом в красный и малиновый цвет

Желтый цвет

Выше использованы следующие обозначения. отсутствие газа;

+ слабое образование газа в виде единичных пузырьков в толще среды;

++ более выраженное обРазование газа с крупными пустотами в тдлще среды;

+++ бурное газообразование с разрывами столбика., Всего было идентифицировано 65 штаммов, из них шигелл Войда 38, сальмонелл

6, эшерихий 3, гадоний 7, клебсиелл 5

5 протея 1, провиденции 1, цитробактер 3, На основании проведенных испытаний . установлено 100%-ное совпадение всех признаков с классическим методом.

Полученные результаты позволяют правильно и быстро определить 5 признаков энтеробактерий, экономить посуду и время.

Предлагаемый способ не требует много времени, дефицитных реактивов, среда может быть приготовлена в любых 65

Формула изобретения

Редукции метиленового синего. Ферментацию углеводов определяют по изменению цвета среды в кислую зону, уреазную активность — по изменению реакции нижнего слоя среды в щелочную зону, гаэообразование по образованию пузырьков газа в толще среды (при ферментации только глюкозы) и по разрывам столбика (при фермента ции лактозы и (или сахарозы), продукЧерно-фиолетовый

Темно-зеленый

Зеленый

Светло-зеленый

Желтый

Малиновый

Лиловый

Фиолетовый условиях, способ позволяет четко дифференцировать основные группы энтеробактерий и смежных семейств и может быть использован в больничных лабораториях при исследованиях экскретов больных, а также при санитарно-бактериологических исследованиях.

Способ идентификадии грам-отрицательных бактерий путем посева исследуемого материала на дифференцивль6) 0863

)5

Составитель С.Малютина

Редактор E.Õîðèíà Техред Н.Андрейчук Корректор Н.Ковалева

Заказ 3097/21 Тираж 568 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная, 4 ную среду с последующей оценкой энзиматических свойств бактерий, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения способа, посев осуществляют в оба слоя двуслойной среды, содержащей в первом слое следующие количества

6 компонентов, г:

Двуэамещенный фосфат калия

0,05-0,15

Однозамещенный фосфат .калия 0,02-0,06

Тиосульфат натрия 0,01-0,03

Глюкоза 0,06-1, 0

Мочевина 0,2-0,6

Метиленовый синий 0,04-0,08

Феноловый красный 0,00 -0 01

Агар 0,55-0,65

Питательный бульон До 100 мл а во втором слое (r):

Двуэамещенный фосфат калия 0,05-0,15

Одноэамещенный фосфат калия 0,02-0,06

Лимонно-аммиачное железо 0,01-0,03

Лактоза 0,8-1, 2

Сахароза 0,8-1,2

Феноловый красный 0,004-0,01

Кристаллический фиолетовый 0,0001-0,0003

Агар 1,8-2,2

Питательный бульон До 100 мл причем второй слой наслаивают на первый и скашивают.

Источники информации,принятые во внимание при экспертизе:

1 ° Аммарин И.И. Практическая медицинская микробиология. Медицина, 196Ü, с.125-126.