Устройство для электрофоретического разделения веществ

Устройство для электрофоретического разделения веществ

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Соаетскнх

Соцналнстнческнх

Республик (11) 616568

Я (51) М, Кл. (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 24.01.77(21) 2446052/16-25 с присоединением заявки М

Государственный «он«тот

Соввтв Мнн«отрав СССР оо аалом нзобротонн« н 97«pblr«II (23) Приоритет (43) Опубликовано 25.07.78Беллетень М 27

{45) Дата опубликования описания 18.06.78 (+) д 543,544 (088.8) (?2) Авторы изобретения

Е. И. llaw.ратьева, С. И. Гущин и Е. А ° Кунцевич

Специальное конструкторское бюро биофиэической аппаратуры (71) Заявитель (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЭПЕХТРОФОРЕТИЧЕСКОГО

РАЗДЕЛЕНИЯ ВЕШЕСТВ

Изобретение отн осигся к электрофоре-, тическим ацпарагам, применяемым в исследованиях биологически активных веществ для осуществления процесса электроэлюирования их as геля после разделения методом электрофореэа, и предназначено для применения в биологии, медицине, биохимии, химии и r- д.

Известны аппараты для электроэлюцин, содержащие камеру с эпектродамн и полупроницаемые мембраны 1

Однако в таких аппаратах выход элюируемых компонентов не превышаег 65%.

В них невозможно получить раздельные э малые фракции, образуклцие в геле узкие. т блнэкорасположенные зоны, а время элюпии продолжительно.

Известен аппарат дйн электрофоретв ческой элюции, содержащий корпус, сосгооь ший из двух электродных сосудов с го- ра рнзонгальиыми электродами, расположенными один над другим, причем дно верхне.о сосуда снабжено эпюируюшей ячейкой, разделенной пепегородкой в виде сетки на два отделения 2$. Верхнее отделение 2s имеет больший объем н предназначено для геля, а нижнее с меньшим объемом- . для сбора выделенных фракций. Нижнее ow деление снизу пг раннчено полупроницаемой мембраной, установленной с зазором о относительно сетки и герметично ярижв той к телу ячейки уш огнитепьным коль цом. Для вывода элюируемых фракций в нижнем отделении ячейки предусмотрен штуцер слива.

Однако и этот аппарат не обеспечивает полноты отбора и возможности увелич ния концентрации выделенных. фракций.

Концентрация белка в элюагах зависит от объема нижнего отделения эпюционной ячейки, служащей для сбора и концентри рования белковых фракций, и тем выше, чем меныпе объем последнего. В извесь ном аппарате изменение этого объема невозмцжноmte csssaao с необходто» мостью размещения системы отбора вьь деленных фракций

Кроме того, при проведении электро» элюировании фписщдит.ираооесс оседв

616568 проницаемую мембрану, вызванный действием эпектрического тока и явлением эпектродекантации. Вследствие чего в известном аппарате дпя полного отбора выдепенных компонентов необходимо проведение цикла вымывания осажденных фрак ций буферным раствором, что приводит к снижению, концентрации белка в эпюатах, Бель изобретения» увеличение концентрации и полноты отбора выделенных фракций.

1О

Это достигается тем, что допопнитепь но установлена вторая перегородка в виде сетки, служащая подложкой дпя попу проницаемой мембраны, а штуцер дпя о бора выделенных фракций размещен в центре мембраны.

На фиг. 1 изображено предлагаемое устройство в раз реэе, общий внд; . на фиг. 2 — эпюционная ячейка, рабочее и опожение.

2О

Устройство содержит верхний 1 и нижний 2 электродные сосуды с горизонтальными энектродами 3, расположенными один над другим. Крышка 4 нижнего сосуда 2 имеет ячейку 5 для помещения г . пя, образованную резиновым съемным кольцом 6. Сверху ячейка 5 отделена or верхнего эпектродно о сосуда 1 перегородкой в виде армированной сетки 7.

Снизу ячейка 5 ограничена перегородкой

8, к которой вплотную прилегает попупроннцаемая мембрана 9 с подложкой 10, выполненной также в виде сетки и служащей дпя ограничения прогиба мембраны

9 и сохранения постоянным объема эпюционной ячейки 11. Все они вместе скреплены по периметру крышки нижнего электродного сосуда 2 уплотнитепьной гайкой

12 так, что при заполнении устройства гелем и буферными растворами образуют эпюционную ячейку 11 дпя сбора эпюируемых фракций е

В центре мембраны 9 размещен штуцер отбора вьщепенных фракций, который выполнен из силиконовой резины разбор45 ным, из двух частей одна из которых вверху имеет воронкообразную. форму 13 и размещена на. внутренней цпверхности мембраны 9. На цилиндрической части штуцера выполнен прилив 14, благодаря которому вторая часть в аиде кольца 15 ппотчо прижата к наружной поверхности попупроницаемой мембраны 9.

Устройство. работает следующим образом., 5S

Вырезанные из блока попиакриламиднаго гепя фракции, подлежащие эпюнрованню, размепьчаются и помещаются в ячейку 5.

Эпектродные сосуды 1 и 2 герметично скрепляются между собой и заполняются буферным раствором так, чтобы электродь1 3 быпя полностью погружены в буфер.

Под действием вь прямпенного напряжения, поданного на эпектроды 3, бепковые компоненты мигрируют нэ геля через сетку

Р

7 к попупроницаемой мембране 9 н скаппиваются в центре эпюцноннoN ячейки 11, откуда выводятсся по истечении времени эпюцни через штуцер отбора.

Предлагаемое устройство, благодаря установке попуцроницаемой мембраны между двумя сетками, одна иэ которых служит подложкой, скреплению их совместно по периметру крышки нижнего эпектродного сосуда, позволяет образовать ячейку дпя сб ора эпюируемых фракций II тем прогиба полупроницаемой мембраны. Дпя поддержания постоянного прогиба использована подложка, вьшопненная в виде сетки, которая позволяет ограничить прогиб мембраны и тем самым создает воэможность получить эпюируемые фракций высокой концентрации в минимальном объеме.

Дпя полноты отбора вьщепенных фракций штуцер установлен непосредственно на мембране, а то, что он выполнен иэ силиконовой резины и разборным, обеспечивает легкое укрепление его непосредственно на поверхности мембраны и полную герметизацию соединения беэ специальных прокладок и креплений. Такая конструкция создает удобства при эксппуатации устройства, а именно, обеспечивает легкость разборки его дпя проведения очистки и стерилизации.

Ф ормуп(а из обре тения

Устройство дпя эпектрофоретического разделения веществ, содержащее верхний и нижний электродные сосуды с горизонтальными электродами, расположенными один над другим, полупроницаемую мембрану, перегородку в виде сетки, установленную над полупроницаемой мембраной, и штуцер для отбора выделенных фракций, о т и и ч а ю щ е е с я тем, что, с цепью повышения полноты отбора и концентрации выделенных фракций, в нем дополнительно установлена вторая перегородка в виде сетки, служащая подложкой дпя попупроницаемой мембраны, а штуцер дпя отбора выделенных фракций размещен в центре мембраны.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Патент США № 3255100, кп. 204180, 1960.

2. Заявка № 2080651/26 or 26.05.76, по которой принято решение о выдаче

sarnncx.oão свидетельства.

616568 ф е.8

Составитепь Э, Скорняков

Редактор Л,: Гребенннкова Техред H. Андрейчув КорректорВ. Серрвк

Заказ 4059/41 Тирж 11П Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР но дедам изобретений н открыткй

113038, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, .4