Способ получения полинуклеотидов, обладающих полирибонуклеотидфосфорилазной активностью

Способ получения полинуклеотидов, обладающих полирибонуклеотидфосфорилазной активностью

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советснм

Социалистических

Республик ())) 619508 (@) дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено07.12.76 (21) 2427997/28-13 (51) M. Кл. с присоединением заявки №

С 12 П 1З/06

Гасударственный номмтет

° Совета Имннстроа СССР мо делам нзобретенмм н отмрытнй (23) Приоритет (43) Опубликовано15.08.78. Бюллетень №ЗО (45) Дата опубликования описания 07.07.78 (5З) УДК 615.45:

; 61 2. 398. 1 45. 1 (088.8) И. А. Шмите, Д. Э. Гравите, В. П. Каула и С. Э. Ансберга (72) Авторы изобретения (7l) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИНУКЛЕОТИДОВ, ОБЛАДАЮЩИХ.ПОЛИРИБОНУКЛЕОТИДфОСФОРИЛАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно получению пэлинуклеэтиаэв, -применяемых в генетике,.

Известен способ получения пэлинуклео» тидэв, обладающих пэлирибонуклеотидфэсфорилазной активностью путем полимериI зации рибонуклеэзид-5 -дифэсфата культурой ЕвсттЕИСЫС Go(i в питательной среде, содержащей белковый гидролизат и ионы двухвалентного металла с последующим инкубированием, выделением и очисткой целевого продукта (1), Недостатком известнэго способа является низкая степень полимеризации и интенсификация процесса.

Целью изобретения является повышение степени полимеризации и интенсификации процесса.

Эта цель достигается тем, чтэ в питательную средЯ дополнительно вводят смесь глюкозы с глютатионом и ациклическую диаминэмонэкарбоновую кислоту при соотношении аминокислоты и питательной средй

1:400 500. Кроме того, глюкозу и глю. татиэн берут в соотношении 10:1. В ка» честве ациклическэй диаминомонокарбэнэвой кислоты используют лизин или аргинин, а в качестве ациклической диаминэмонокарбонэвой кислоты используют смесь лизина с аргининэм в соотношении 1:1.

Способ осуществляют следующия образом.

Пример 1. 50 г интактных клеток суспендируют в 1 л реакционной сре ды, (рН 8,1)1сэдержащей 0,6 r тряс-основания, 0,25 г Мф CR>, 2 г гидролизата казвина, 2 r аргинина, глютатион и глюкозу, взятых в соотношении 1:10, пэчогретой до 37 С, добавляют 20 г аденэзиндифосфат (АДФ), инкубируют с перемешиванием в течение 18 ч.

Поли- А выделяют известным cIIoco бом. Выход поли-А 58%.

Пример 2. 50 г интактных клеток суспендируют в 1 л реакционной среды, (pH-8,5)p содержащей 1,2 г трисэснэвани, 0,5 гМ СЕ>, 2 г гипрэлизата казеина, 2 r лизина, глютатион и глю2g козу, взятых в соотношении 1:10, попо619508

Составитель С. Малютина

Рдактор Л E moaa ТеЧрд А. Алашрев Корректор и. Ту„

Заказ 4378/21 Тираж 568 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент, r. Ужгород, ул. Проектная. 4

3 о гретой до 43 С, добавляют 20 г цито зиндифосфат (ЦКФ), инкубируют с перемешиванием в течение 18 ч.

Поли-U выделяют известным способом.

Выход поли-Ц 62%.

Пример 3.i То же, что в примере 1, только вместо 2 г аргинина: добавляют 2 г смеси аргинина и лизина, вэя« тых в соотношении 1;1. Выход поли-А 60%.

Пример 4. То же, что в примере 2, только вместо 2 г лизина в среду .добавляют 2 г смеси аргинина и лизина,,взятых в соотношении 1:l. Выход поли-U

65%.

Пример 5, 50 г интактных кле ток суспендируют в 1 л реакционной сре ды; (рН 8,1), содержащей 0,6 г трисоснования, 0,25 гМЯ СЕу, 2,0 г гидролизата казвина, 2,5 г аргинина, глютатион и глюкозу; взятых в соотношении

1:100, подогретой до 37оС. добавляют, 20 г АПФ. инкубируют перемешиванием в течение 18 ч. Поли А выделяют известным способом. Выход поли-А 59%.

Предлагаемый способ обеспечивает высокую степень полимеризации, интенсифи- д кацию процесса биосинтеза, сокращение времени и повышение выхода и качества продукта.

Формула изобретения

1. Способ получения полинуклеотидов, обладающих полирибонуклеотидфосфорилаз» ной активностью, путем полимериэации рибонуклеээид-- -дифосфата культурой

ЕвсМИс&iа СоС в питательной среде, содержащей белковый гидролизат и ионы двухвалентного металла, с последующим инкубированием, выделением и очисткой целевого продукта, о т л и ч а ю щ и.йс я тем, что, с целью повышения степени полимериэации и интенсификации прсцесса, и питательную среду дополнительно вводят смесь глюкозы с глютатионом и ациклическую диаминомонока рбоновую кислоту при соотношении аминокислоты и питательной среды 1:400-500.

2. Способ по и, 1, о т л и ч а юшийся тем, что глюкозу и глютатион берут в соотношении 10:1.

3. Споооб по п, 1, о т л и,ч а юш н и с я тем, что в качестве ациклической диаминомонокарбоновой кислоты используют лизин или аргинин.

Ф

4, Способ по пп. 1 иЗ, о т.л и ч а ю шийся тем, что в качестве ациклической диаминомонокарбоновой кислоты используют смесь. лизина с авгинином в соотношении 1:1.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1.У А исоИига(Ь оСорсс С С пс

tnis4r 37, 1973, с. 1537-1541.