Способ получения пектолитического ферментного препарата
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Π— Й- -С-- А"-Н- И Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик (11) 622838
К АВТОВСКОМУ СВИДБТИЛЬСТВУ (б!) Дополнительное к-авт. свид-ву (22) Заявлено11.01.77 (21)2444051/28-13 с присоединением заявки №(23) Приоритет (43) Опублнковано05.09,78,Бюллетень № 33 (45) Дата опубликования описания 26.07.78 (51) М. Кл.
С 12 D 13/10
Государственнв|й комитет
Воаета Министров СССР ао делам изворетений и открытий (53) УДК 577 152. .321 (088.8) (72) Авторы изобретения
Л. С. Капитонова, В, Т. Татаренков н P. А. Робатень (71) Заявитель
Научно-исследовательский институт промьццленности первичной обработки лубяных волокон (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕКТОЛИТИЧЕСКОГО
ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА
Изобретение относится к ферметной отрасли микробиологической промышленности и может быть использовано в производстве пектолитических ферментных препаратов, применяемых в промышленности первичной обработки лубяных волокон для получения технического волокна, из льносоломы.
Известен способ получения пектолигического ферментного препарата, преду- 1В сматриваюший культивирование в анааробных условиях ССовт| Ж||т ресОпо1е| теoctans на питательной среде,содержащей источник углерода - глюкозу, источник пектиновых веществ — свекловичный жом и минеральные соли, с последующей фильтрацией культуральной жидкости и выделением из нее фермента. Полученный таким способом препарат не обладает высокой активнос тью Il}, 20
Известен также способ получения пектолитического ферментного препарата путем культивирования С K o s t | 1d 4 0 %
f e Csineum на питательной среде, содержашей источник углерода, ис- 25 точник пектиновых веществ, минеральные соли КН,РО4, K НРО и СаСО,З, воду.
Однако выход ферментного препарата, полученного таким способом, недостаточно выс ок $2j .
Иелью изобретения является повышение выхода и активности пектолитического ферментного препарата.
-Поставленная цель достигается тем, что в качестве продуцента ферментов используют штамм Ссов|| |д |иттт ref в1" ттеиттт -22, в качестве источника углерода используют декстрин, а в качестве источника пектиновых веществ используют свекловичный жом, при атом указанные компоненты берут в количест вах соответственно 2- 10 r и 10 - 30 г на 1 л питательной среды, Штамм CEostvic3ium ХеЕ11пеитп -22 нмееr следующую характеристику.
Морфологические признаки, На жидкой среде с "льняными стеблями клетки в виде палочек, крупные, прямые, подвижные, одиночные. Размеры 6,5 | 0,8 мк.
62283
Известный
Предлагаемый
28000 звестный
27
Предлагаемый
Споры овальные, крупные, размеры
1 0,5 мк.
Культуральные признаки - галактозный агар. Колонии овальные, гладкие, блестящие, оранжевого цвета 0,2-03мм в диаметре.
На жидкой дрожжевой воде с льняными снопиками через 12 часов роста культура накапливает гранулэзу. Через 48 часов полностью сбраживает покровные ткани льностебжй, среда мутнеет, на дне
36 образуется рыхлый осадок иэ покровных тканей и биомассы.
Физи ологическке признаки. Максимум роста цри 37-40 С. Ассимилирует глю!
3 козу, галактозу, сахарову, мальтозу, декстрин, инудин, крахмал, пектин маннит.
Не усваивает глицерин, целлюлозы и лактат кальция. Нуждается в биофакторах - дрожжевом экстракте, соевой или кукурузной муке. Не растет на мясо-леп26 тонном бульоне, в присутствии (Ng НР04 и Н РО,, (NH )< 504, K NO> не развивается. Требует для своего роста источника фосфора — К НРО, КН РО, 25
М Н о+.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.
П р и м e p 1 ° I отовят питательную среду следующего состава: 20 г свекловичного жома, 5 г декстрина, 5 r К НРО, 5 г КН Р04, 3 г мела и доливают до литра водой. Среду стерилиэуют в автоклаве при 0,5 атм 0,5 чвса.
В охлажденную до 49 С среду добавИ ляют суспензию спор штамма Ñ6- fe6sihOuw22 в количестве 1 мл. Выращивание ведут в анаэробных условиях беэ долура воздуха в течение 48 часов при
8 4 е
37 С. Для отделения культуральной едкости от механических примесей и биомассы культуральную жидкость центрифугируют, концентрируют на вакуумио-вы парной установке, доводя обьем до 80100 мл. Концентрирование ведут при
30-40 С в присутствии стабилизатора
М СР в количестве 100 мг/л. Препараге> выделяют путем осаждения концеи1 рата этиловым спиртом в отношении 1:4 в присутствии CO Cfy е Препарат высушивают до порошкообраэного состояния при комнатной температуре на воздухе.
Выход препарата — 15 г. Активность препарата жо пектат-транс-элиминазе
28000 ед/г.
Пример 2. Готовят питательную среду следующего состава: 10 г свекловичного жома, 2 г декстрина, 1 г К НРО, 4 2 г Ma+as Остальн ое по примеру 1. Выход 3 г/л, активность препарата 7000 ед/г.
Л р и м е р 3. Готовят питательную среду следующего состава: 30 г свекловичного жома, 10 г декстрина, 10 г
К НРО, 15 r КН РО, 5 г мела, доливают до литра водой. Остальное по примеру 1. Выход 8 г/л, активность
15000 ед/г.
Предлагаемый способ получения пектолитического ферментного препарата позволяет получить препарат с большим выхо дом и высокой активностью! (табл.1) °
Кроме того, испытание полученного ферментного препарата при мацерации стеблей льна показало его более высокую мацерируюшую способность, по сравнению с известным препаратом (табл.2).
Т б 1
62
Формула изобретения
Способ получения пектолитического ферментного препарата путем культивирования продуцируюших его микрооргаs, рода СЕовЬ idium feE sine0m на питательной среде, содержащей источник углерода, источник пектиновых веществ и минеральные соли КН РО, К НРО и СаСО>, воду, о т л и ч а юш и и с я тем, что, с целью повышения выхода и активности препарата, в качестве продуцента используют штамм СРоэtt1dfUtTl 1с054heum — 22, в качестве источника углерода используют декстрин, а в качестве источника пекти2838 6 новых вешеств используют свекловичный жом, при этом используемые компоненты берут в количествах соответственно 210 г и 10-30 r на 1 л питательной среды.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:
1. Бравова Н. Б. и др. Технология культивирования анаэробных бактерий рода Ghost г181 v м — продуцентов пектилитических ферментных препаратов .Труды отделения ферментов ВНИИсинтезбелок. Вып. 2, 1974, ОНТИ, с. 71-77.
2. Капитонова Л. С. Пектолитические ферменты. М., Институт биохимии им.
А. И. Баха АН СССР, 1973.
Составитель И. Привалова
Редактор О, Иванова Техред. A. Алатырев Корректор Л. Небопа
Заказ 4834/25 Тираж 568 Подписное
БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5
Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4