Способ определения энтеротосигенности кишечных палочек

Способ определения энтеротосигенности кишечных палочек

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Л. A. Смирнова, Т. A. Авдеева и В. Е. Ефремов (72) Авторы изобретения

Ленинградский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭНТЕРОТОКСИГЕННОСТИ

КИНЕЧНЫХ ПАЛОЧЕК

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается способа выявления среди кишечных палочек возбудителей острого гастроэнтерита у людей.

Известен способ определения энтеротоксигенности кишечных палочек путем введения н тонкую кишку через же лудок мышам-сосункам исследуемого материала с последующим вскрытием животных и определения среднего коэффициента расширения тонкой кишки (1) .

Однако известный способ является трудоемким и не обеспечинает высокой чувствительности.

Целью изобретения является ïîíûшение чувстнительности и упрощение способа.

Эта цель достигается тем, что предварительно голоданшим мышам-сосункам вводят живую суточную бульонную культуру энтеротоксигенных кишечных палочек через анальное отверстие и помимо среднего коэффициента расширения тонкой кишки определяют процент положительно реагирующих мышей и частоту их гибели и по этим показателям определяют энтеротоксигенность кишечных палочек.

Способ осуществляют следующим образом.

2-4-дневным мышам-сосункам н тонкую кишку через анальное отверстие вводят 0,2 мл суточной бульонной культуры разных ш аммов энтеротоксигенных о кишечных палочек, выращенных при 37 С в пробирках без встряхивания. Для освобождения кишечника от излишнего содержимого за 18-20 ч до заражения мьааей отсаживают от матки и выдерживают н термостате при 28 С. Такое голодание животные переносят удовлетворительно и нся партия мышей-сосункон пригодна для опыта. Иглу с оливой 0,5-1 мм вводят и прямую кишку на глубину 1-2 мм.

Материал из шприца легко проникает н кишку и точность его попадания к месту испытания контролируют визуально: заполняемые толстая, затем тонкая кишка становятся четко видимыми через стенку живота. Тем самым исключается необходимость н добавлении к материалу соответствующей краски. Группу в

4-5 мышей-сосунков, зараженных этой культурой, выдерживают при 28 C в течение 4 ч, затем умерщвляют эфиром и вскрывают. Определяют коэффициент расширечия тонкой кишки каждой мыши .данной группы путем взвешивания на

623866

Формула изобретения

)О

Составитель С. Малютина

Техред Н. Андрейчук КорректорА. Власенко

Редактор Т. Девятко

Заказ 5112/19 Тираж 568 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретениЯ и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. ужгород, ул. Проектная, 4 аптекарских весах тонкой кишки с содержимым и остального тела животного и последующего деления первого показателя на второй. После этого высчитывают среднюю арифметическую коэффициента расширения тонкой кишки. 3а положительный принимают коэффициент, превышающий 0,090. Полученные данные позволяют судить о частоте регистрации положительно реагирующих мышей из общего числа испытанных в процентах.

Это точнее отражает степень энтеротоксигенности испытуемых культур. применение предлагаемого спосооа в 2-3 раза сокращает время на изготовление испытуемого материала, в свя- >6 эи с чем ускоряется проведение испытания и получение ответа, в 5-10 раз уменьшаемся количество расходуемой питательной среды. При предлагаемом способе не наноситсЯ тРавма животнОму, испытуемый материал не снижает своей активности под влиянием неблагоприятной среды в желудке, а сразу попадает в оптимальную для него среду, все э-о способствует увеличению точности и чувствительности теста и

25 большей достоверности в оценке степени энтеротоксигенности культур.

Способ определения энтеротоксигенности кишечных палочек путем введения в тонкую кишку мышам-сосункам исследуемого материала с последующим вскрытием животных и определением среднего коэффициента расширения тонкой кишки, отличающийся тем, что, с целью повьимения чувствительности и упрощения способа, предварительно голодавшим мышам-сосункам вводят живую суточную бульонную культуру энтеротоксигенных кишечных палочек через анальное отверстие и пс— мимо среднего коэффициента расширения тонкой кишки определяют процент положительно реагирующих мышей и частоту их гибели, и по этим показателям определяют энтеротоксигенность кишечных палочек.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. g. infection Эисозсъ 125,1975, р. 407-411.