Способ получения к-сывороток

Способ получения к-сывороток

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ЙСАЙИ1

ЙЗОЬРЕТЕН ИЯ

И АВТОРСКОМУ СВИДИТИЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свиа-вуСоюз Советских

Социалистимеских

Республик (10624636 (Я) М. Кл.

А 61 К 39/40 (22) Заявлено14.07.76 (2)) 2384005/28-13 г с присоединением заявки ¹Гавуаврстввнный наинтвт

Свввта Мнннстрвв СССР вв данам N305p8T8wll и вткрвпнй

4 (23) Прноритет— (43) Опублнковано25.08.78.Бюллетень № 31 (45) Дата опубликовании описания09.08.78 (53) УДК 615.45:

:615.373 (088.8) Б. С. Киселева, Л. В. Кадникова и И. В. Голубева (12) Автори изобретения

Московский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова,(71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ К-СЫВОРОТОК

Изобретение относится к области микробиологии.

Известен способ получения К-сывороток путем выращивания вакцинного штамма рода К Себз е ССа на питательной среде, отбора активных колоний с последующим повторным выращиванием их на бульоне с глюкозой, инактивации полученной микробной массы формалином, иммунизации животных и выделения целевого продукта (11 . Однако определение специфичности сывороток и К-антигена при типировании проводится по набуханию капсулы, что вносит дополнительные трудности как в производство сывороток, так и в практические лаборатории, так как проводятся с микроскопией препарата.

Сыворотки могут требовать дополнительной адсорбции от О-антител.

Целью изобретения является повышение специфичности К- =ыворотки и обеспечение возможности ее использования в реакции агглютинации.

Зля этого выращивание вакцинного штамма осуществляют на бульоне

Хоттингера с глюкозоя, а затем пассируют на агаровой среде Верфель-Фергюсон и отбирают активные колонии по образованию капсулы.

Способ осуществляется следующим о6разом.

Вакцинный штамм засевают в бульон

Хоттин,гера с 0,2% глюкозы на 5-6 час при 37 С, после чего пересеивают на ц агаровую среду Ворфель-Фергюсон. На следующий день готовят с роста культуры на косяке этой среды тушеной препарат по методу Бурри в модификации Ла- бинской. При отсутствии, капсулы пассирование штамма повторяют до тех пор, пока в тушевом препарате не появится четко очерченная капсула. В этом случае ° делают посев на питательный агар в чашке Петри для просмотра на следующий

N день колоний в косопроходящем свете по

Лэнди. Колонии клебсиел с капсулой имеют розовое или розово-голубое окрашивание с серовато-дымчатым полукругом в виде шапочки, при отсутствии

5 капсулы колонии 0-формы оранжевые, се

624636 4 чием выраженной капсулы у микробйых клеток, рые, бежевые беа дымчатого полукруга.

Если в косопроходящем свете имеются отдельнве колонии в О-форме, пассирование штамма повторяют до тех пор, пока вся популяция штамма не будет состоять иэ однородных колоний в капсульной фор- 5 ме соответствующей окраски, Такой штамм используют для приготовления вакцины, для чего его выращивают в бульоне Хоттингера с 0,2% глюкозы в течение 4-5 час, убивают добавлением 0,5% формалина и иммуниаируют кроликов шестикратно в дозах 0,5; 1,0;

2,0 3,0; 3,0) 3,0 и обескровливают через 7 дней после последней иммунизации, Пригот"овленные сыворотки контролируют в реакции агглютинации на стекле или в пробирочной реакции, так же как и К-антиген у культур клебсиелл определяют в реакции на стекле, а не в реакции о набухании капсулы.

Штаммы с развитой капсулой лиофилиаируют для сохранения в капсульной фор- > ме.

Большие слизистые влажные колонии

25 клебсиелл часто не коррелируют с налиФормула изобретения

Способ получения К-сывороток путем выращивания вакцинного штамма рода

k(e b Sie66a на питательной среде, огбора активных к.олоний с последующим повторным выращиванием их на бульоне с глюкоаой, инактивации полученной микробной массы формалином, иммунизации животных и выделения целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности К-сыворотки и возможности ее использования в реакции агглютинации, выращивание вакцннного штамма осуществляют на бульоне Хоттингера с глюкозой, а затем пассируют на агаровой среде ВорфельФергюсон и отбирают активные колонии по обрааованию капсулы, Источники информации, принятые во внимание при акспеотизе:

1.Ыжси да А.Ьчищт.МеМ &саИсцз

of En+e гаЬос емсисeae. э. Миюес ромалэ, go, 1962, р 2О7

Составитель В, Головин

Редактор А. Бер Техред Алатырев Корректор А. Власенко

Заказ 5292/8 Тираж 703 Подписное

БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4