Способ определения морозостойкости растений
Патент 628850
Авторы
Классы МПК
Способ определения морозостойкости растений
Иллюстрации
Реферат
О -и-О-Ан- и е
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик (628850
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено26.04.77 (21) 2482056/30-15 с присоединением заявки М (23) Приоритет (43) Опубликовано25.10.78.Бюллетень 4 39 (45) Л,ата опубликования описания go g97g
2 (51) М. Кл
А 01 Н 1/04
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений н открытий (53) УПК 632.111, .5(088.8) Н. С. Агафонов (72) Авторы изобретения
Ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт сельского хозяйства Центрально-черноземной полосы им. В. В. ок чаева (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИОРОЗОСТОЙКОСТИ
РАСТЕНИЙ
Изобретение относится к селекции растений и может быть использовано для определения морозостойкости растений.
Известен способ определения морозостойкости путем предварительной обработки высечки из зеленого листа минусовыми температурами (1) и (2) .
Недостатком этого способа является то, что морозостойкость растения определяется не раньше фазы кучнения.
Известен также способ определения морозостойкости растений путем регистрации вспышек сверхслабого свечения при быстром размораживании растений или семян в дистиллированной воде (3).
Недостатком такого способа является то, что после проведения анализа растение уничтожается и невозможно получить от него урожай. Кроме того, нельзя оценить индивидуальные растения в селекционно-генетических исследованиях наследования уровня генетической морозостойкости. го
Целью изобретения является выявление морозостойкости в фазе прорастающих семян и сохранение анализируемого растения для получения урожая.
Достигается это тем, что информация генетической морозостойкости снимается путем цитологического анализа клеточных ядер как центров генной регуляции путем отбора проб от колеоптилей прорастающего зерна, а само зерно высаживают для получения урожая.
При кратковременном воздействии на растения стрессовым фактором (низкая температура) на клеточном уровне происходит активация защитно-приспособительных механизмов, заключающаяся в различной интенсивности синтеза нуклеиновых кислот. Более активно синтезируют нуклеиновые кислоты в этот период устойчивые формы растений.
Способ осуществляют следующим образом. Семена замачивают в течение 2 час в водопроводной воде, раскладывают в чашках Петри на влажной фильтровальной бумаге и проращивают в термостате при 20—
25 С. При достижении длины колеоптиля 5—
8 мм от каждого проростка лезвием бритвы отделяют кончик колеоптиля длиной 2 — 3 мм без повреждения первого листочка.. 628850 . ем 24 час охлаждения колеоптиля судят о степени морозостойкости растения: у высокоморозостойких растений содержание нуклеиновых кислот в ядре при охлаждении увеличивается, у неморозостойких — уменьшается или остается без изменений.
Приготовленные препараты могут храниться в темноте неограниченно долгое время
После взятия пробы проросшее зерно высаживают в субстрат для получения урожая.
Кончик колеоптиля, взятый для анализа, разрезают вдоль на две части, одну из которых охлаждают в холодильнике при температуре от -1 до +3 Ñ в течение 24 час для активации наследственного механизма формирования морозостойкости, другую (контрольную) выдерживают 24 час при исходной температуре на влажной фильтровальной бумаге. По истечении указанного времени части колеоптиля фиксируют спиртовоуксусным фиксатором в течение 1 час, затем переносят в 75о/о-ный спирт, где пробы можно хранить для анализа продолжительное время.
Анализ состоит в приготовлении из колеоптилей постоянных цитологических препаратов по известной методике (1), окрашивании этих препаратов красителем на нуклеиновые кислоты — галлоцианин — хромовые квасцы, количественном определении цитофотометрическим методом содержания нуклеиновых кислот в клеточных ядрах, расположенных в топографически идентичных районах колеоптилей и вычислении среднего содержания нуклеиновых кислот в клеточном ядре, а также сравнении вариационных кривых содержания нуклеиновых кислот в ядрах сравниваемых частей колеоптиля.
По изменению содержания нуклеиновых кислот в клеточных ядрах под влияниФормула изобретения!
Способ определения морозостойкости растений, включающий отбор проб с последующей обработкой их минусовыми температурами, отличающийся тем, что, с целью выявления генетической морозостойкости в фазе прорастающих семян и сохранения анализируемого растения для получения урожая, пробы берут из верхней части колеоптиля, выдерживают в течение суток при температуре от -1 до +3 С, фиксируют в спиртово -уксусном растворе и определяют морозостойкость цитохимическим способом.
° Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:
1. Конарев В. Г., Тютерев С. Л. Мето25 ды биохимии и цитохимии нуклеиновых кислот растений. Л., «Колос», 1970.
2. Авторское свидетельство СССР .ПЪ 217115, кл. А Ol Н 1/04 1966.
3. А вто рское с виде гельство СССР
ЗС о 353684, кл. А 01 11 1 04, 1970.
Составитель Г. Бростюк
Техред О. Луговая Корректор Е. Папп
Тираж 748 Подписное
Реда кто р 3,. П инчук
Заказ 593!/4
ЦНИИПИ осударственно о комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
I I 3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 сРилнал П!!П «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, -!