Способ идентификации альдостерона

Способ идентификации альдостерона

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

On ИСАНИЕ

И ЗОБРЕТЕ Н ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 01. 04.7 5 (21) 2115406/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет—

<» 631818

2 (51) М. Кл.

601 Й 33/16

Государственный квинтет

Савета Мнннстреа СССР аа делам нзебретеннй н еткрытнй (43) Опубликовано 05.11.7ЬБюллетень № 41 (53) УДК 616,004 (088.8) (45) Дата опубликования описания 10.11.78

О. К. Ботвиньев и T. М. Атаманова (72) Авторы изобретения

Второй Московский ордена Ленина Государственный медицинский институт им. Н. И. Пирогова (7l) Заявитель (54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАБИИ АЛЬДОСТЕРОНА

Изобретение относится к медицине и может @ать использовано в клинико-лабораторной практике.

Известен способ идентификации альдостерона путем выделения его из биологической жидкости с помошью хроматографии на селикагеле с последующим добавлением реактива (1).

Однако известный способ является трудоемким, требует много времени и не обеспечивает высокой специфичности и чувствительности, Белью изобретения является повышение специфичности, чувствительности и ускорение способа.

Эта цель достигается тем, что в качестве реактива используют 50-60%-ную фосфорную кисл от у, получе нный флюоресцируюший комплекс альдостерон + фосфорная кислота" алюируют с хроматограммы, измеряют интенсивность флюоресценции алюата при возбуждающей длине волны

46012 ммк и по максимуму спектра флюоресцении в области 515 5 ммк идентифицируют альдостерон.

Способ осушествляют следующим образом.

300,0 400,0 мл мочи подкисляют до рН 1,0-1,2 концентрированной НС6, оставляют в темнэм месте на 18-24 ч

5 при комнатной температуре.

Затем проводят экстракцию и первичную очистку, для атого в моче расгВоряют 60,0 гйсЗССи проводят акстракцию

100,0 мл хлороформа, трехкратно, в те10 чение 10 мин каждый раз. Объединенный акстракт промывают 50 мл 5%-ного расгвора т сед С0е в 0,1 н растворе NaOH u

50,0 мл дистиллированной воды. Экстракт обезвоживают ЙО &04и выпаривают в вакууме при 40 С. После атого проводят о очистку на колонке.

В нижнюю часть стеклянной колонки помешают кусочек стекловаты и сверху заливают взвесь силикагеля 1,65 г в

20 хлороформе, После прохождения хлороформа, на колонку переносят экстракт, растворенный в хлороформе (1,0 мл 3 раза).

Затем колонку последовательно промывают 20,0 мл 30% раствора атилацетата