Способ получения эритроцитарного диагностикума

Способ получения эритроцитарного диагностикума

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

1.

Ф

О Ill И С А H И Е !III634749

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Йаюз Саеетскил

Сациалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВйДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 11.07.77 (21) 2508437/28-13 с присоединением заявки М (23) Приоритет (43) Опубликовано 30.11.78. Бюллетень Хо 44 (45) Дата опубликования описания 30.11,78 (51) М. Кл. -

А 61К 39/00

Гасударстеелпый каиитет

СССР па лелем кеаблетеиий и открытий (53) УДК 576,8.097..36 (088.8) (72) Авторы изобретения

В. А. Шамардин и Б. В. Каральник (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО

ДИАГНОСТ И КУМА

Изобретение относится к области медицины, в частности к приготовлению диагностических препаратов.

Известен способ получения эритроцитарных диагностикумов, предназначенных для определения реагентов на Fc-фрагмент иммуноглобулина G, путем сенсибилизации эритроцитов глобулиновым препаратом в присутствии конъюгирую щего агента, например CrCI>, с последующим отмыванием 10 сенсибилизированных эритроцитов.

Однако известный способ не обеспечивает высокой чувствительности диагностикума.

Целью изобретения является повышение 15 чувствительности диагностикума.

Эта цель достигается тем, что в качестве конъюгирующего агента используют риванол. Кроме того, для сенсибилизации эритроциты, глобулиновый препарат и риванол 20 берут в соотношении 1: 0,5: 0,5 соответственно.

Способ осуществляют следующим образом.

Смешивают 1 объем 2,5%-ной взвеси эри- 25 троцитов, 0,5 объема 0,1 — 0,20/О-ного раствора глобулинового препарата и 0,5 объема

0,02% -ного раствора риванола (2-этокси6,9-диаминоакридино лактат). Смесь выдерживают в течение 60 мин при 37 С (для на- 30 тнв ых эритроцнтов) или 40 — 45 С (для фиксированных эрнтроцитов) прн периодическом встряхивании, затем эритроциты

3 раза отмывают нс менее чем 50-кратным

IIo отношению к осадку эритроцитов объемом 0,850/О-ного раствора хлористого натрия, содержащего 0,1 — 0,20/О желатины и

1 /О (по об.нему) 1, 15 Ч фосфатного буфера рН 7,2.

П р и м ср. Проводят сенсибилизацию формалшгпзнрованных по Вайнбах эритроцитов барана IgG нормальной сыворотки человека. Смешивают 2 мл 2,5а/О-ной взвеси эритроцитов, 1 мл 0,1 /О-ного раствора 1дб и 1 M;I 0,020/О-ного раствора риванола, приготовленных на 0,850/О-ном растворе NaCI, содержащем 1 /, (Ilo объему) 1/15 М фосфатного буфера рН 7,2. Смесь выдерживают 60 мпп при 45 С при периодическом встряхивании. Затем эритроциты трижды отмывают 0,850/О -ным раствором NaC1 (по

4 мл), содержащим 0,1 /О жслатнны и 1 /О (по объему) 1/15 М фосфатного буфера рН

7,2. К осадку отмытых сенспбнлизированных эрнтроцнтов прибавляют 2 мл такого же растворителя.

В качестве контроля используют эритроциты, сенспбнлпзированные тем же препаратом IgG по способу Бойдена н Яндл—

Симмонса.

634749

Максимальное активное разведение сыворотки, содержащей ревматоидный фактор

Минимальна выявляемая "доза

St. aureus Cowau, млн, мл

Способ сенсибилнзапии

Предлагаемый

Бойдена

16 — 23

110 †1

Яндл и Симмонса

Составитель Г. Смирнова

Техред 3. Тараненко

Редактор М. Дмитриева

Корректоры: В. Дод и 3. Тарасова

Заказ 1915/8 Изд. № 718 Тираж 666 Подписное

НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Определение эффективностг1 сенсибилизации эритроцитов проводят с помощью двух реагентов на Fc — фрагмент IgG: сыворотки, содержащей ревматоидный фактор, и взвеси St. апгецз Cowan., богатого белком Л. В первом случае определяют ма1:16 000—

1:20 000

1: 8С00—

1:12 000

1:600—

1:1500

Как видно из таблицы, предлагаемый способ обеспечивает высокую чувствительность диагностикума при определении ревматоидного фактора и Л-содержащего стафилококка.

Предлагаемый способ обеспечивает высокую чувствительность диагностикума, позволяет диагносцировать ряд заболеваний и дает возможность количественного опреде- 15 ления белка А у стафилококков.

Формула изобретения

1. Способ получения эритроцитарного диагностикума для определения реагентов 20 ксимальное активное разведение сыворотки — индикатора, во втором — минимальную агглютинирующую дозу St. aureus Соя an.

Результаты исследований представлены в таблице. на Fc-фрагмент иммуноглобулина G путем сенсибилизации эритроцитов глобулиновым препаратом в присутствии конъюгирующего агента с последующим отмыванием сенсибилизированных эритроцитов, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения чувствительности диагностикума, в качестве коныогирующего агента используют риванол.

2. Способ по п. 1, отл и ч а ю щи и с я тем; что, с целью сенсибилизации, эритроциты, глобулиновый препарат и риванол берут в соотношении 1: 0,5: 0,5 соответственно.