Способ количественного определения пектина

Способ количественного определения пектина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советскин

Социалистическин

Республик ()637671 (61) Дополнительное к авт, сеид-ву (22) Заявлено 10,03,77 (2I) 2461062/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 15, 12.78.Бюллетень № 4.6

{45) Дата опубликования описания 18.12.78 г

{5t) M. Кл.

G 0l и ЭЭ/02

Государственный новетет

Совете Мнннотров СССР оо делам изобретений н отнрытнй (53) УДК 664. 126.

° 48 (088.8) (72) Автор изобретения

Т. Ф. Фридман (7l) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО OfIPEQEJIEHHR

ПЕКТИНЛ ю

Изобретение относится к количественному определению пектина, который широко применяется в пишевой, микробиологической, текстильной, пол играфической промышленности, а также в медицине.

Известны способы количественного оп5 ределения пектина, основанные на образовании окрашенного соединения галактуроновой кислоты с цветореагентом (цистеин, нафторезорцин, карбазол), Наиболее близким к изобретению по технической сушности и д< стигаемому результату является способ количественного определения пектина, по которому выделенный из экстракта пектин или препарат пектина растворяют в воде и прибав15 ляют 0,05 и. гидрат окиси металла для диметоксилиоования пектица, так как неодинаковая степень метоксилирования влияет на показатели оптической плотности. го

Через 30 мин раствор нейтрализуют

0,05 н. раствором соляной кислоты. Затем разбавляют раствор пектина до 8100 мкг пектина и 1 мл раствора. Затем

0,5 мл полученного оаствора кипятят с охлажденным до 3-5 С реактивом концентрированной серной кислоты 6 мин, охлаждают в воде со льдом, после чего добавляют 0,1 мл 0,2%-ного реактива карбазола и кипятят ельце 10 мин. После охлаждения измеряют оптическую плотность при длине волньr 535 нм. Расчет производят по калибровочной кривой, построенной по галактуроновой кислоте. Однако точность определения пектина недостаточна, так как окрашенные соединения с карбазолом наряду с пектином образуют другие углеводы анализируемой смеси.

Кроме того, большое число операций, особенно стадии разложения пектина при кипячении в концентрированной серной кислоте и взаимодействия продуктов разложения с карбазолом, из-GQ зависимости от окислителей и колебаний температуры снижают точность определения.

Недостатками способа также являются высокая себестоимость за счет значительного расход» реактивов, и том числе

637671

Филиал 1!Г1Г1 "Патент, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 дефицитных реактивов (карбазол, серная кислота) и затрат труда, недостаточная безопасность иэ-оа применения агрессивного реактива - концентрированной серной кислоты при кипячении за счет выде- 3 ления ядовитых окислов серы в атмосферу и возможности химических ожогов.

Цель изобретения - упрощение способа и повышение его точности, Это достигается тем, что по предлага-16 емому способу в качестве цветореагенT& используют щелочной агент, преимущественно гидрат окиси натрия„а оптическую плотность измеряют при рН 1112 и длине волны 375-385 нм, 15

Способ осуществляется следующим образом.

Препарат пектина или пектин, выделенный из питательной среды, в концентрации

0,1-1 мг/мл растворяют в воде, затем приливают цветореагент — гидрат окиси натрия до рН 11«12 и измеряют оптическую плотность раствора при длине волны

375-385 нм. Стандартное отклонение

1 1,5%. Время анализа 30 мин.

23

Пример 1. 0,050 г препарата пектина растворяют в 50 мл дистиллированной воды. Затем в четыре пробирки приливают 7,5 мл раствора пектина. В контрольную пробирку приливают 2,5 мл во- © ды и размешивают, а в опытные пробирки приливают 2,5 мл 0,1 н. гидрата окиси натрия и размешивают. Оптическая плотность опытных растворов при длине волны 380 нм 0,640, 0,650, 0,645.

По калибровочной кривой зависимости оптической плотности щелочных растворов пектина при длине волны 380 нм от концентрации пектина находят соответствующее количество пектина. Количество пектина в 7,5 мл реакционной смеси 6,18, 6,28 и 6,20 мг . Среднее количество пектина 6,22 мг. Процентное содержание пектина 6,22:7,5=82,9%. Бремя анализа

30 мин, Стандартное отклонение + 0,65%.

Пример 2. Определение содержания пектина в питательной среде лля культивирования Asp-awamor - Þ.

К 1 мл питательной среды прибавляют

7 мл 96%-ного спирта для осаждения пектина, размешивают и пентрифугируют при 2000 об/мин в течение 5 мин. НадЦН11ИПИ Заказ 7092/32 осадочную жидкость сливают, а к осадку прибавляют 2,5 мл спирта для про лывки осадка, центрифугируют при 2000 об/мин в течение 5 мин. Промывку повторяют еше раз. Осадок пектина растворяют в

7,5 мл воды, добавляют 2,5 мл О, 1 н, МаОН, размешивают и измеряют оптическую плотность раствора при длине волны

380 нм на спектрофотометре (в контроль-. ном растворе вместо ИаОН добавлено

2,5 мл воды). Оптическая плотность

0,454, 0,464, 0,469, Соответственно по калибровочной кривой находят количество пектина в 1 мл питат .льной среды 3,30, 3,34 и 3,36 мг, Среднее содержание пектина 3,33 мг/мл. Стандартное отклопение -0,7%. Время анализа 30 мин, Таким образом, улучшаются качества биохимпрепаратов на основе. пектина, так как обеспечивается оперативный контроль за содержанием пектина в процессе производства, что особенно существенно при получении таких важных пектолитических ферментов, как пектаваморин пектоцимерин. Кроме того, повышается точность (с 3 до 1,5%) и уменьшается время определения пектина (с 5 ч до 30 мин), за счет исключения стадий и сокрашения реагентов значительно упрощается процесс, снижается себестоимость о тределения пектина. Предлагаемый способ предотвращает загрязнение окружающей среды и повышает безопасность процесса из-аа исключения агрессивного реактива — серной кислоты.

Формула изобретения

Способ количественного определения пектина путем обработки его водного раствора цветореагентом с последующим измерением оптической плотности полученного окрашенного соединения, о т л и ч а— ю ш и и с я тем, что, с целью упрощения способа и повышения его точности, в качестве цветореагента используют щелочной агент, преимущественно гидрат окиси натрия, а оптическую плотность измеряют при рН 11-12 и длине волны

375-385 нм, Тираж 1070 Подписное