Способ определения 3,5-диглюкозида мальвидина в растениях винограда

Способ определения 3,5-диглюкозида мальвидина в растениях винограда

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союэ Советскик

Социалистических

Республик

641921

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт, свид-ву— (22) Заявлено 16.08.77 (21) 2519376/30-15 с присоединением заявки №(23) Приоритет—

Опубликовано15.01.79.Бюллетень № 2

Дата опубликования опнсания18.01.79

2 (51) М. Кл.

А 01 G 17/00

Q 01 И 31/08

Государствеииый комитет

СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 631-521 (088.8) (72) Авторы изобретения П. Я. Голодрига, H. Г1. Нубовенко и A. B. Осипов

C

Всесоюзный научно-исследовательский институт виноделия и виноградарства Магарач (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 3,5-0ИГЛЮКОЗИНА МАЛЬВИНИНА

В РАСТЕНИЯХ ВИНОГРАДА

Изобретение относится к области биологии, а именно к вопросам исследования или анализа материалов путем хроматографии.

Известен способ определения 3,5-диглюкозида мальвидина франко-американских 5 гибридов и vitals гipar1а, ч. rupestr

1аЬ uSio (11 .

Этот способ основан на хроматографическом разделении в 0,6%-ном растворе лимонной кислоты экстракта пигментов 10 ягод и вина из винограда и идентификации

3,5-диглюкозида мальвидина за счет его красно-розовой флюоресценции в УФ-свете, Недостатком известного способа является то, что он не позволяет определить т5 наличие 3,5-диглюкозида мальвидина в экстрактах красящих веществ, содержащих их в следах.

Целью изобретения является возмож-ность прогнозирования наличия 3,5-диглюкозида мальвидина в ягодах по вегетативным органам (листья, побеги). Эта цель достигается идентификацией этого пигмента при помощи хроматографии на бумаге или в тонких слоях целлюлозы по флюоресценции его в красной области при длине волны 675 нм. Интенсивность флюореоценции регистрируется фотоумножителем с

-1з минимальным темновым током 1 ° 10 А.

Этанолом, подкисленным НС1 до рН 1-2, экс трагируют пигмен ты вегета тивных органов неплодоносящих виноградных сеянцев (черешки, пластинки листа, кора молодых побегов). Экстракт очищают от сопутствующих веществ фенольной группы путем адсорбции антоцианов на тальке, после чего сконцентрированный элюат антоцианов разделяют на составные компоненты методом распредели тельной хрома тографии. Пятно 3,5-диглюкозида мальвидина фиксируется по красно-розовому свечению и интенсивность его регистрируется при помощи фотоумножителя типа ФЭУ-79.

Пример. Навеску листьев винограда сорта Амурский (5 гр) заливают 20мл этанола, подкисленного HCl до рН 1-2, н настаивают в темноте не менее 10 ч. Из

641921

Лист

Интенсивность флюоресценци!

Амурский

Асурегули шави

Северный

Хиндогны

Оливет черный

Марсельский черный ранний

1 9

Не установлено

1 8.Матраса клон № 8

Не установлено

Северный Саперави

Фиолетовый ранний

12 полученного экстракта пигментов готовят . водную суспензию с тальком из расчета

1 мл экстракта, 3 г порошка талька и

10 мл воды. Суспензию настаивают 1015 мин и переносят на стеклофильтр Ж2 со слоем талька 0,3 см с последующим промыванием водой до наступления отрицательной реакции на ванилиновый реактив, указывающий на полое удаление дубильных веществ. !О

Адсорбированные на гальке антоцианы отмывают 80%-ным подкисленным этанолом.

Эпюат концентрируют под вакуумом и хранят в темноте при 2-5 С. о !

Хроматощ афирование. Разделение пигментов осуществляют на бумаге ленинградской фабрики № 3 и ватмане ¹ 4. На линию старта наносит 0,11 мп экстракта. В качестве растворителя используют 0,6%- 20 ный раствор лимонной кислоты, в котором пигменты разделяют на две зоны: нижняямоноглюеоэнды и верхняя диглюкозиды содержащие 3,8-диглюкозед мальвиднна.

Магарач Ж 24-6З-65 (Лжалйта-х Хиндогны) 1

Йорк Мадейра 1

Формула изобретения

1. Способ определении 3,5-диглюкозида мальвидина в растениях винограда, Хрома тограмма просматривается в УФсвете, в котором 3,5-диглюкозид ярко флюоресцируег красно-розовым светом. Интенсивность регистрируегся на фотоумножителе при длине волны А =678 нм в ог . носи тельных единицах.

Наличие диглюкозидов в различных органах виноградного растения в конце вегетации дано в таблице.

Растворитель - 0,6%ный раствор лимонной кислоты - используется для разделения экстрактов ангоцианов, содержащих большое количество 3,5«диглюкозидов малю видина. Пля идентификации малых доз эгоvo пигмента необходимо применять 10 и

18%-ные растворы уксусной кислоты илн смесь бутилового спирта и 2н соляной кислоты (1:1).

Использование данного способа дает возможность прогнозировать окраску ягод винограда по вегетативным органам до вступления сеянцев в плодоношение, что сократит селекционный процесс на три-четыре года. включающий экстракцию, разделение экстрактов пигментов на составляющие на хро матограмме, идентификацию 3,8-диглюкозида мальвидина в УФ-излучении, о r л нч а ю m и и с я тем, что, с целью возможности прогнозирования 3,5-диглюкозида в ягодах по вегетативным органам, экстракт антоцианов идентифицируют в красной области флюоресценции при длине волны 675 нм.

2. Способ.по п. 1, о т л и ч а ю— ш и и с s тем, что, с целью определения сверхмалых световых потоков 3,5-диглюкоаида мальвидина, идентификацию проводят при темновом токе, равном 1 10 A.

Источники информации, принятые во внимание при акснеотизе:

1.Р. Ribeveau- Quean. Чес пвтc hes

cur Юеь Antt ac anes des еде1аох.

Раг ь, 3959

Составитель Г. Броспок

Редактор H. Потапова Техред H. Андрейчук Корректор Л. Василина Заказ 7622/2 Тираж 965 Подписное

OHHHllH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4