Способ определения влагоустойчивости микроорганизмов
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (81) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 02.02.76 (21) 2320707!28-13 с присоединением заявки ¹â€” (23) Приоритет— (43) Опубликовано 30.01.70. Бюллетень № 4 (45) Дата опубликования описания 06,04.79 (,51). 1.К,i, С 12 К 1 00
Гасударственный комитет ле лелаа1 и.",обретений и открытий (53) УДК 577.15л;3.1 (088.8) (72) Авторы изобретения Э. Г. Тутова, О. И. Конюко, Н. А. Дисько и С. (71) Заявитель Ор" сна Трудового Красного Знамени инст и массообмена им. A. В. Лыков (54) СНОСОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ВЛАГОУСТО14ЧИВОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ где
G,- л(/
G., =
Изобретение относится к способам определения физических свойств материалов и может быть использовано в микробиологической, медицинской и пишевой отраслях промышленности.
Известен контактный способ определения влагоустойчивости микроорганизмов, при котором заданная конечная влажность биомассы принимается равной влажности смеси адсорбент-биомасса (1). Количество адсорбента, необходимое для обезвоживания биомассы согласно (1), рассчитывается по формуле
G„, G, — вес адсорбента и биомассы, кг;
5 Д Р„, и, — влажность адсорбента, биомассы и смеси, 0 0.
Недостатком этого способа определения влагоустойчивости микроорганизмов является то, что формулой (1) не учитываются массоемкости компонентов смеси, в то время как при сорбционном взаимодействии необходимо учитывать средние удельные массоемкости контактирующих тел.
Определение количества сорбснта по (1) приводит к сущсственной ошибке опыта, так как среднее значение влажности смеси совершенно не соответствует влажности каждого компонента смеси в отдельности.
Неточность результатов опыта усугубляется отбором для анализа средней пробы.
Цель изобретения — повышение точности определения влагоустойчивости и сокращение длительности эксперимента.
Для достижения поставленной цели измеряют влагоемкость (массоемкость) исследуемой биомассы и адсорбента во всем !
5 диапазоне изменяющегося влагосодержания по стандартным методикам, затем смешивают биомассу с адсорбентом в соотношении, обеспечивающем установление равновесного состояния при заданном конечном влагосодержании, чем достигается равенство потенциалов влагопереноса.
Количество абсолютно сухого адсорбента с учетом массоемкостей взаимодействующих компонентов определяют по формуле
644836
Gl Gg абсолютно сухой вес биомассы и адсорбента, кг; градиент влагосодер>каний; начальное и конечное влагосодер>кание биомассы, кг/кг; средняя изотермическая массоемкость биомассы и адсорбента, лиллЬ/д. где
/ /н> (. »
С,»„C«,, В качестве адсорбента используется инертный материал с известной удельной массоемкостью. Анализу подвергают всю подготовленную смесь биомассы — адсорбент.
Для интенсификации процесса влагопереноса контактное обезвоживание произзадят B вакууме при разрежении 5 — 20 лt.и рт. ст..
Принцип осуществления способа определения влагоустойчивости микроорганизмов не изменяется в зависимости от вида исследуемой культуры бактерий, а также от сорбционных свойств биомассы и адсорбента (массоемкостей), начальной и конечной влажности компонентов. Приводим конкретный пример определения влагоустойчивости микроорганизмов применительно к культурам: гриба Beauveria Bassiana (вариант 1 — W,, 30%, вариант II — W,, 5%) и Rhizobium leguminosarum штамм 245 А— клубеньковые бактерии гороха (вариант 1- Г 50%, вариант 11 — W„30%).
Пример. Для обезвоживания биомассы берут силикагель со средней изотермпческой массоемкостыо С,-,, = 4,1 . 10 моль/дж. 10 >ял биомассы заливают в стерильную колбу и туда же засыпают доведенный до абсолютно сухого веса силикагель, количество которого определяют по формуле (2) с учетом абсолютно сухого веса и массоемкостей биомассы исследуемых культур и с иликагеля (табл. графа 7).
Колбу закрывают стерильной ватной пробкой и ставят на 1 час в вакуум-сушильный шкаф при P = 10 лл рт. ст. Затем содержимое колбы подвергают микробиологическому анализу методом последовательных разведений. С этой целью в колбу наливают
90 лил стерильной воды (разведение B
10 раз), что способствует отмывке сорбента и переходу всех микробных клеток в исследуемую суспензию. Последующие разведения проводят обычным способом у>кс с полученной суспензией.
Исследование биомассы гриба Beauveг1а Bassiana.
Вариант 1.
Начальная влажность биомассы 96 /о масса влаги (влагосодержание— масса сухого вещества
=-24 кг/кг).
Конечная влажность биомассы 30% (влагосодержание 0,421 кг/кг) .
Средняя изотермическая массоемкость биомассы, определенная для исследуемого диапазона влагосодержания, составляет:
С«,„= 10,0 10 люль/дж.
Количество силикагеля определяем по
1О формуле (2)
0,4 24 — 0,42)
0,42
41107
4,36 . 10-
Вариант П.
Начальная влажность биомассы 96% (влагосодержание 24 кг/кг) .
Конечная влажность биомассы 5% (влагосодержание 0,052 кг/кг) .
Средняя изотермическая массоемкость биомассы
С „,, = 4,3 . 10 лоль/дж.
Количество силикагеля
0,4!24 — Π052)
==195 г.
Зо
0,052
4,3 . !0-7
Исследование биомассы клубеньковых бактерий гороха, Вариант 1.
Начальная влажность биомассы 98% (влагосодержание 49 кг/кг) .
Конечная влажность биомассы 50% (влагосодержание 1 кг/кг). Средняя изо40 термическая массоемкость биомассы
С„, = 7 10 лоль/дж.
Количество силикагеля
2(49 — — 11
4.1 10
7,0.10 7
В ариант EI.
Начальная влажность биомассы 98% (влагосодержание 49 кг/кг) .
Конечная влажность биомассы 30% (вл агосодерж ание 0,421 кг/кг) .
Средняя,изотермическая массоемкость биомассы
C,», = 6,5 10 люль/дж.
Количество силикагеля
G = — - :-- - — — 36,0 г.
2 (4 .1 — 0,42! )
0,421
4,1 10
644836
Таолппа
Массоемкость, 10т,ноль/дяс
Выживаеколичество, мость, о
Количество силпкагелч!
Конечная влажность биомассы
Начальная влажность биомассы, %
F» х х х
О. х сз
Материал биомасса силикагель
410,0
53,5
10,0
Биомасса гриба
Beauveria Bassiana
13,5
1! 9,0
195
4,3
4,1
1
Биомасса клубеньковых бактерий гороха
Штамм 245а
73,0
670,0
16,5
4,1
98
400 44
36,0
6,5
4,1
98
GAU а 1
1/ а 2
Cin, где
Формула изобретения
Составитель Э. Тутова
Техред Н. Строганова
Корректор И. Симкина
Редактор H. Грязнова
Заказ 50/161 Изд. № 172 Тираж 548 Подписное
НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Тип. Харьк. фил. пред. «Патент»
Численные значения, соответствующие исследуемым культурам бактерий и велиИз анализа таблицы видно, как резко влияет .изменение влажности на жизнеспособность клеток. Изменение влажности клубеньковых бактерий на 20% почти в 20 раз снижает выживаемость. Это подтверждает необходимость точного определения влажности смеси, возможного при использовании предложенного способа.
Экспериментальные данные показали, что способ определения влагоустойчивости 10 микроорганизмов обеспечивает высокую степень точности анализа: действительная влажность биомассы соответствует заданной по условиям эксперимента величине, количество жизнеспособных клеток не за- 15 висит от релаксации их в объеме смеси и количества адсорбента. Кроме того, снижается длительность эксперимента.
Способ определения влагоустойчивости микроорганизмов путем смешивания пробы биомассы с адсорбентом для сорбции влаги и последующего определения количества 25 жизнеспособных микроорганизмов, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности определения, перед смешиванием определяют удельную массоемкость пробы биомассы и адсорбента и рассчитывают ко- 30 личество адсорбента, необходимое для смешивания в зависимости от начальной и заданной конечной влажности биомассы, начинам конечной влажности, сведены в таблицу. чальной влажности адсорбента и установленной удельной массоемкости биомассы и адсорбента по формуле бв — абсолютно сухой вес биомассы кг
ЛУ = U U — градиент влагосодержания, кг/кг;
U„U, — начальное и конечное влагосодержание биомассы, кг/кг;
С,,„„С„„— средняя изотермическая массоемкость биомассы и адсорбента люль/дж
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве адсорбента выбирают инертный к биомассе материал, например силикагель, с удельной влагоемкостью не ниже 15 — 20%.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что сорбцию проводят в вакууме при разрежении 5 — 20 лм рт. ст.
Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:
1. Бекер М. Е. «Обезвоживание микробной биомассы», Издательство «Зинатне,», Рига, 19б7, с. 81.