Способ обнаружения антител

Способ обнаружения антител

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советска

Социалмстимаскмз

Республик (i ii546992 (6!) Дополнительное н авт. свил-ву— (22) Заявлено27,07.7 6 (2т)2388879/28-13 с присоединением заявки ¹ (23) ПриоритетОпублиновано15.02.7 9. Бюллетень № 6

Дата опубликования описания 18.02.79 (5l) М. Кл

А 61 К 39/12

Гкударатаеннфй канату

СССР аа делам наебретенн» и аткрытнй (53) УДК 616-097 (088. 8) (72) Авторы изобретения

H. H. Басова и А, Л. Бийчанинова

Оентральный научно-исследовательский институт эпнде ми оп оги и (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОБНАРУМ :НИЯ АНТИТЕЛ

Изобретение относится к области медицины, а именно внрусопогни.

Известен способ обнаружения антитеп к гемаггпютннинам арбовнрусов путем предваритепьной обработки исследуемой сыворотки взвесыо каопнна в буферном растворе и гусиными эритроцитами с цоспедуюшп м соединением обработанной сыворотки с. раствором гема ггпютннина и взвесьтд эритроцитов н учетом резунь"" татов реакции Я .

Однако известный способ не обеспечнвает достаточной воспроизводимости н достоверности резупьтатов.

Оепью изобретения,явпяется обеспечение воснронзводнмостн и достоверное- З тн способа.

Это достигается тем, что по предпагаемому способу обработку сыворотки каопнном проводят в кислом фосфатнобуферном растворе, затем обработанную сыворотку н гемагглютинин разводят трнс-борат-тряпок Б буферным раствором н попученные разведения соединяют

2 со взвесью формапннизнрованных эрнтроцнтов нескольких доноров в фосфатно-буферном растворе.

Кроме того, предварятецьную обработку сыворотки каопином проводят прн рН 5,8 6,4, Иснопьзуют фор манн нязнрованные эритроциты нескольких гусей (смесь) в качестве стандартизованного стабипьного индикаторного компонента серопогическнх реакций - вирусной гемаггпютинацин н ее торможения.

Раствор дпя тнтровання сыворотки крски и вирусного гемаггпютннина, взвеси гусиных формапнннзнрованных эритроцн тов дпя удапення антнтеп к эрнтроцнтам гусей нз сыворотки готовят на основе боратно-.буферного коммерческого раствора путем уменьшення концентрации солей и добавпення основного триза, бор ной кислоты н трнпона Б в раствор дпя прнготовпення взвеси Формапиннзнрованньix эритроцитов гусей, участвуюшнх в серопогическнх реакцйях, и дпя приготовЭ . - 6469

esaaa ssseca каолина, используемой для удаленна нвспеинфических Ингибнтопов вируеной гемагглютйнации иэ сиворотокфосфатно-буферный, рН;5 3 и рН-6,4 соответственно.

Пример . Испытуемую сывороч ку разводят 0,85%-ным раствором хлорида натрня (1:5-1:10), соединяют с

25%-ной взвесыо каолнна в 1/15 М фосфатио-буферном растворе рН 6,4 в соо ношении объемов 1:5 и оставляют на

20 мин цри комнатной температуре со встрихнванием, затем центрифурйфйт, а надосадочную жидкость соединяют с равным объемом 10%-ной взвеси обмытых формалйннзированных эритроцитов гусей в трио-борами-трипон Б буферном растворе рН 9,0. Посне контакта на холоду пробы центрифугируют, надосадочные жидкости титруют в трис-борат-трн2О лон Б буферном растворе рН 9,0, затем к каждому разведенао добавляют равные объемы рабочего pacrsopa {4-8ГЕ) вирусного гемагглютннина, например

25 . возбудителя клешевого энцефалита, приготовленного на том же растворе, смеси оставляют для взаимодействия на холоду до следуюшего дня, затем в каждую

as них вносят 0,5%ную взвесь отмытых формалиннзнрованных эритроцитов

Гусей в фосфатно-буферном растворе рН 5,3. О наличии антител свидетельствовало иредотврашение гемагглютинации, учтенное через 1-1,5 ч после внесения

35 эритроцитов.

Предлагае мый способ обеспечивает воспроиэводимрсть и достоверность результатовв.

Формула изобретении

1. Способ обнаружения антител к гемагглютинннам арбовирусов .путем предварительной обработки исследуемой сывороткй вэвесыо каолина в буферном растворе и гусиными эритроцитами с послвдуюшим соединением обработанной Сыворотки с раствором гемагглютинина и взвесьюэритроцитов и . учетом результатов реакции, о т и ич а ю ш и и с я тем, что, с целью обеспечения воспроизводимости и достоверности способа, обработку сыворотки каолином проводят в кислом фосфатнобуферном растворе, затем обработанную сыворотку и гемаггпютинин разводят трио-морат-трилон Б буферным раствором и полученные. разведения соединяют со вэвесыо формалннизированных эритроцитов несколькнх доноров в фосфатнобуферном растворе.

2. Способ по п,1, о т л и ч а ю— ш и и с я те м, что предварительную обработку сыворотки каолином проводят при рН 5,8-6,4.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Временное МРТУ-42, утв. КВС

МЗ СССР, 1973.

) Составитель С. Малютина

Редактор Л, Баталова Texpea M. Борисова Корректор М. немчик

Заказ 195/3 . Тираж 6 1 Подписное

ЫНИИГЫ Государственного комитете СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва, Ж-35 Раушская наб., д. 4/5

Филиал П П Патент", г. жгород, ул. Проектная, 4