Способ определения активности веществ, обладающих антиаритмическим действием

Способ определения активности веществ, обладающих антиаритмическим действием

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

lf%

®."Се::ничеснан

ОП ИС"

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик..а ЬА

48227

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 29.1 2.76 (21) 243481 5/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 25.02,79. Бюллетень № 7 (51) М. Кл.

A 61 K 29/00

G 01 N 33/1(.

Государственный иоиитет

СССР по делам изеоретений и открытий (53) УДК61-5-092 ° .254 (088.8) Дата опубликования описания 28,02.79

В. И. Кринский, Н; И. Кукушкин, M. E. Саксон и Н. В. Дмитриева (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

Институт биологической физики АН СССР (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ВЕЩЕСТВ, ОБЛАДА10ЩИХ АНТИАРИТМИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ

Изобретение относится к фармакологии и может быть использовано в кардиологии.

Известен способ определения активности веществ, . обладающих антиаритмическим действием, путем нанесения их на изолированную полоскь сердечной мышцы и изме5 рения минимального рефрактерного периода (R) мышцы в ответ на электрическое раздражение 10 и и< с1с нанесения испытуемого веньества ((1.

Однако известный спо=об не обеспечивает высокой точности. !О

Для повышения точности способа на мышцу наносят дополнительное электрическое раздражение до и после введения испытуемого вегцества в уязвимый период сердечного цикла, измеряют максимальный латентный период ((,)) ответа на это раздражение, определяют соотношение Q/R н по изменению этого соотношения после введения испытуемого вещества по сравнению с величиной этого соотношения до введения испытуемого вещества, определяют антиаритмическую активность веществ.

Способ осуществляют следующим образом.

На изолированную полоску сердечной мышцы, возбуждаемую с постоянной частотой, наносят дополнительное (тестирующее) возбуждение в уязвимый период сердечного цикла и измеряют два электрических параметра мышцы в контроле: минимальную рефрактерность (R) и максимальную латентность тестирующего ответа (О). Отношенив этих двух параметров Q/R названо фактором уязвимости. Фактор уязвимости характеризует степень уязвимости миокарда, т. е. прогнозирует возможность возникновения аритмий по механизму кругового движения возбуждения в уязвимый период сердечного цикла. После измерения фактора уязвимости в контроле вводят испытуемое вещество и снова измеряют фактор уязвимости. По уменьшению величины фактора уязвимости судят об антиаритмической активности испытуемого лекарства.

Многочисленные исследования на полосках сердечной мышцы (холоднокровные— лягушки, теплокровные — кошки, собаки) показали, что кардиоактивные вещества, увеличивающие фактор уязвимости (например, адреналин, ацетилхолин и др.), усиливают или вызывают появление аритмии в сердеч648227

З5

Формула изобретения

55 ной мышце. Широко используемые в клинике противоаритмические вещества, например хинидин, индерал, этмозин и пр., уменьшающие величину фактора уязвимости, препятствуют развитию аритмий.

Пороговая доза лекарств, уменынаю»цая величину фактора уязвимости, для различных лекарств составляет 0,5 — 2 r на 1 л стандартного раствора, используемого для перфузии изолированных препаратов сердечной мышцы. Испытание одного вещества проводят на полосках сердечной мыпщы опной группы животных (лягушки, кошки или крысы).

Чтобы исключить случайность результатов для испытания одного вещества проводят около пяти измерений.

Пример 1. Испытание противоаритмн!еской активности ИНДЕРАЛА.

Опыт проводят на желудочке лягушки.

Желудочек отсекают от предсердия, вскрывают его внутреннюю полость и укрепляют в экспериментальной камере. Препарат перфузиру»от стандартным раствором Ригнера, рН вЂ” 7, 2 при комнатной температуре. К поверхности препарата подводят стандартный раздражающий электрод и через него подают короткие (5 мсек) импульсы тока с частотой 0,5Гц. Приблизительно на расстоянии 10 — 15 мм от места стимуляции в ткань погружают стандартный стеклянный-микроэлектрод и регистрируют ответ мышцы на электрическое раздражение. Через 30 мин после установления препарата в камеру и начала стимуляции приступают к измерению максимальной латентности тестирующегo ответа Q, минимальной рефрактерности ткани R и расчету фактора уязвимости Q/R.

Измерения показали, что для данного препарата Q = 250 мсек, R = 360 мсек, фактор уязвимости = 0,68.

После определения фактора уязвимости в контроле в перфузат вводят индерал в концентрации 1 мг/л и продолжают стимулировать препарат. Через ЗО мин вновь приступают к измерению фактора уязвимости.

Измерения показали: Q = 83 мсек,в контроле 250 мсек, R = 400 мсек, в контроле

360 мсек, фактор уязвимости = 0,2, т. е. фактор уязвимости умсш.шился в три раза (в контроле 0,68). Уменьшение фактора уязвимости является хорошим антиаритмическим,эффектом индерала.

На мышцу подают дополнительное, тестирующее раздрая»ение, постепенно умеш,шая временнои интервал тестирования между ведущим и тестирующим импульсами. По мере уменьшения интервала тестирования латентность тестирующего ответа ткани возрастает. Наконец, интервал тестирования уменьшают настолько, что тестирующий удар попадает в период невозбудимости (рефрактерности) и мышца на него не -отвсчает —.выпадение тестирующего ответа. г)атснтность Q тестирующего ответа перед его выпадением следует считать максимальной.

Длительность интервала -тестирования, при котором ткань не отвечает на тестирующий уЛар, является рефрактерным периодом мышцы; Однако для расчета фактора уязвимости необходимо найти минимальную рефрактерность R. Для нахождения R рефрактерность R» делят на отношение — —, где

Dg

D» — длительность ответа на любое ведущее раздражение, Dz — длительность тестируюц»его ответа с максимальной латентностью. Находим: В» = 700 мсек, Dz =

= 500 мсек, минимальная рефрактерность

R R /D» 503 360,ее

Пример 2. Испытание противоаритмической активности ЭТМОЗИНА. Испытания проводят на желудочке лягушки. Необходимые параметры измеряют по схеме, изложенной в примере 1. Измерение в контролс показали: Q = 250 мсек, К» = 623 мсек, D»/Dz =

=- 1,5, фактор уязвимости = 0,61. После контрольных измерений в перфузат, вводят

0,5 м / этмозина и продолжают стимулировать препарат прямоугольнымн импульсами тока с частотой 1Гц. Через 30 мин вновь измеряют фактор уязвимости. Под действием

0,5 мг этмозина параметры имеют следую»цие значения: Q =, 111 мсек (в контроле

250 мсс K), R» = 632 мсек (в koHTpoëå

623 мсек, т. е. практически не изменился) .

0 /D = 1,17, ф ll(Top уязвимости = 0,2 (в контрозе 0 61)

Уменьшение величины фактора уязвимости под действием этмозина свидетельствует об уменьшении опасности возникновения аритмий в указанный период сердечного цикла. Действительно, зарегистрированная в контроле аритмия исчезла под действием этмозина.

Предложенный спосоо обеспечивает высокую точность определения антиаритмической активности веществ, в особенности вновь синтезированных, открывает возможности отбора патогенетических, но не симптоматических лекарств.

Способ определения активности веществ, обладающих антиаритмическим действием„ путем нанесения их на изолированную полоску сердечной мышцы и измерения минимального рефрактерного периода (R) мышцы в ответ на электрическое раздражение до и после нанесения испытуемого вещества, отлинаюи ийся тем, что, с целью повышения точности способа, на мышцу наносят дополнительное электрическое раздражение до и после введения испытуемого вен»ества в уязвимый период сердечного цикла, измеряют

648227

Составитель С. Мал отииа

Текред О. Луговая Корректор С. 1Иекмар

Тираж 671 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР йо делам изобретений и открытий

l ЗОЗ5, Москва, Ж-35, Раугиская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор Т. 11!агова

Заказ 418.15 максимальный латентный период (Q) ответа на это раздражение, опрсделя1от соотношение Q/R и по изменению этого соотношения после введения испытуемого вещества по сравнению с величиной этого соотношения до введения испытуемого вещества, определяют антиаритмическую активность веществ.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Сб. «Успехи в создании HoBblx лскар5 ственных средств», М., !973, с. 288.