Способ приготовления эритроцитов

Способ приготовления эритроцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИС

ЙЗОБРЕ ьонтз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВ ! ф (61) Дополнительное к ав (22) Заявлено 24.06.77 (21 с присоединением зая (23) Приоритет (43) Опубликовано 28.02, (45) Дата опубликования

Ъ л.61К 35, IS

Государственный комитет по делам изобретений и открытий

576.8.097 (088.8) (72) Автор

Рзобретения

Г. Н. Старухина (71) Заявитель Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ

Изобретен:c относится к области медицинской т|ромып!ленности, а именно к производству вирусных препаратов.

Известен способ приготовления эритроцитов для адсорбцип вируса гриппа путем отмывания эритропитов кур физиологическим раствором с»ослсдующей формалинизацией, пов.орным отмыванием и приготовлением суспснзии эритроцитов (1).

Однако известный способ не обеспечивает высокой адсорбционно-элюирующей способности эритроцитов.

Целью изобретения является повышение адсорбционно-элюирующей способности эрптроцитов.

Эта цель достигается тем, что формалипизированныс эритроциты отмывают двукратно боратпо-фосфатным буферным раствором хлористого натрия при рН 9,0 — 9,2 и однократно фосфатным буферным раствором хлористого натрия при рН 5,5 — 5,7 и суспснзию эритроцитов готовят в этом же р а створс.

Способ осуществляют следующим образом.

Свежие отмытые эритроциты кур, разведенные 1: 1 физиологическим раствором, выдерживают с 20Я> по объему раствором формалина в течение 3 суток в обычном холодильпике. Затем приступают к отмыв«е их па лабораторной рефрижераторной центрифуге ЦЛР-1 в стеклянных цснтрпфухкных c TB KQH3x емкостью 250 мл. Центрифугпровапие на всех этапах проводят со

5 скоростью 1000 об/мин не более 4 — 5 мин.

Эти условия выбирают для того, чтобы не допустить попадания в осадок формалинизированных эрптроцптов разрушенных клеток и прочих примесей, оседающих при

1р длительном и скоростном центрифугированпи и способных загрязнить вируссодержащий материал на этапе элюцпи.

Последовательность промывания формалпнизированных эритроцнтов следующая.

После удаления формалина эритроциты дважды промывают физиологическим раствором рН 7,0. Затем дважды нх центрифугируют в щелочном бор атно-фосфатном растворе хлористого натрия рН 9,0. Прп этом в промывной жидкости методом определения белка по Лоури обпарухкивается от

0,8 до 1,1 мкг его в 1 мл, тогда как после отмывки эритроцитов обычным физиологическим раствором рН 7,0 примесей белка не обнаружено.

Далее осадок формалинизпрованных эритроцитои промывают на центрифуге ЦЛР-1 однократно фосфатно-буфсрнь1м раствором

3р хлористого натрия р11 5,6 и рссуспсндиру