Способ определения антиокислительной активности липидов
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ь
ОПИСАИЯЕ изовvexr.ния ""6566 4
Союз Советскик
Социалисткческик
Республик (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено119777 (23) 2509763/28-13 (A 61 8 10/ОО
G 01 И 33/1б
Государственный комитет
СССР ио делам изобретений и открытий (23) Приоритет (53) УДК 6м-о03. .215 (088 . 8) Опубликовано 150479. Бюллетень И914
Дата опубликования описания 1504,79 (72) Авторы изобретения и. левицкий, л.и. 1вафран и е.к. Рукевич
Одесский научно-исследовательский институт стоматологии ( 71) Заявители и Бассейновая санэпидемстанция Черноморского водздравотдела
{54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИОКИСЛИТЕЛЬНОЙ AKTHBBOCTH
ЛИПИДОВ
Изобретение относится к фармакологии.
Известен способ определения антиокислительной активности липидов путем спектрофотометрического измерения продуктов реакции взаимодействия липидов с субстратом {1).
Однако известный способ является недостаточно чувствительным.
Цель изобретения — повышение чувствительности способа.
{ь „- а1„) .2 и,р.p g где {аЭ вЂ” ЬЭа ) — разница концентраций йода;
Цель достигается тем, что по пред-, лагаемому способу в качестве субстрата используют йодистоводородную 15 кислоту, причем реакцию взаимодействия проводят в присутствии 5-10%-ного раствора органической кислоты, а образование продуктов реакции измеряют при длине волны 350-360 нм.
2Î
Определение антиокислительной активности производят на спектрофотометре СФ†- 4А при длине волны 353 нм.
В кювету спектрофотометра, снабженного термостатируюшим устройствот{, способным поддерживать температуру в о камере измерения 30 С, наливают 1 мл смеси {СН СООН + хлороформ), l мл
-раствора KJ на спирте, 1 мл Н О на спирте, прогревают до ЗОО С в течение . ь-10 мин, а затем прибавляют 0,2 мл раствора антиоксиданта.
Показания прибора записывают на первой и одиннадцатой минутах.
Концентрация реактивов KT на этаноле — 0,01 И; На02 на этаноле
0,008 И; смесь: уксусная кислота— хлороформ 1:5 °
Контрольную пробу готовят следуюшим образом: берут 1,0 мл хлороформ— уксусной кислоты, 1,0 мл 0,01 N раствора 1Ы и 1,0 мл Н О + 0,2 мл растворителя, на котором приготовлен раствор антиоксиданта.
Разница в оптической плотности между опытным и контрольным измерениями соответствует эффективности действия антиоксиданта.
Расчет количества йода производят по калибровочной кривой, построенной с использованием различных концентраций йода.
Формула расчета антиокислнтельной активности
6$6614 4 да антйоксидантов (токоферола, глута:тиона 9 -SH н аскорбиновой кис- лоты) .
0,002
Токоферол
0,032
6,80
Глутатион
К-SH
0,016
0,16
10,0
Аскорбиновая кислота
0,096 1,6
0,06
Предлагаемый способ обеспечивает высокую чувствительность, хорошую 25 воспроизводимость, а также прост в исполнении.
Формула изобретения
ЗО
Способ определения антиокислительной активности лицидов путем спектрофотометрического измерения продуктов реакции взаимодействия липидов с субстратом,о т л и ч а ю ц и и с я тем, "что, с целью повышения чувствительСоставитель С. Малютина
Техред С.Мигай Корректор Ид Муска, е актор В. Трубченко
Заказ 1630/3
Тираж 671 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035 Москва, Ж-35 Раушская наб. д. 4/5
Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4
3,2 — обший объем инкубационной смеси!
n — разведение антиоксиданта1
10 — время инкубации1
0,2 — объем антиоксиданта.
Пример. Проведено определение антиокислительной активности ряДанные определения антиокислитель ной активности этих веществ представ,лены в таблице, ности способа, в качестве субстрата используют йодистоводородную кислоту, причем реакцию взаимодействия проводят в присутствии 5-10%-ного раствора органиче=кой. кислоты, а образование продуктов реакции измеряют при длине волны 350-360 нм.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Перекиснс е окисление липидов в биологических мембранах, М., 1972, с. 247-248.