Способ культивирования микроорганизмов

Способ культивирования микроорганизмов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советсиик

Социалистических

Респубпии

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву(22) Заявлено 27,1274 (21) 2124660/28-13 с присоединением заявки И

{23) Приоритет—

Опубликовано 300479. Бюллетень РЙ 16

Дата опубликования описания,30.04,79

< и 659605 (5l) М. Кл.

С 12 В 1/20

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (5З) УДК 668.13? (088.8) (72) Авторы изобретения

Рингпфайл Манфред, Клаппах Гюнтер, Вайхерт Дитер, Кернс Герхард, Кретчмар Гюнтер, Меглих Михаель и Фоллхардт Дитер

Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ

P3) Заявитель (S4) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение относится к области микробиологии и касается способов культивирования микроорганизмов на углеводородах в эмульсии типа вода в масле .

Известен способ культивирования микроорганизмов на углеводородах в эмульсии типа вода в масле, включающий добавление вспомогательных .веществ jlj .

Однако при использовании указанного способа выход биомассы недостаточно высок, так как при повышении концентрации клеток в ферментационной среде до определенной критической концентрации происходит необратимый возврат фазы в эмульсию масло в воде .

Цель изобретения — повышение выхода биомассы.

Эта цель достигается тем, что в способе культивирования микроорганизмов на углеводородах в эмульсии вода в масле, включающем добавление вспомогательных веществ, в качестве этих вспомогательных веществ используют сополимеризаты

1,4-бутиленгликольформаля и диэтиленгликольформаля в соотношении от

80-20 до 20-80 вес.Ъ или их смесь с гомополимеризатом, или алкиламины с длиной от С1о до С2 . В качестве масляной фазы в эмульсии используют

Н- парафины с длиной цепи от С 1< до

С или нефтяной дистиллят с содержанием H-парафинов от 0,5 до 60% вес.

В качестве микроорганизмов используют углеводородутилизирующие бактерии или дрожжи.

Сущность способа заключается в том, что добавление вспомогательных веществ (стабилизаторов) приводит к образованию стабильной эмульсии вода в масле (обратной фазы).

Эти вещества обладают специфическим действием по отношению к йоверхностным группам клеток микроорганизмов, они изменяют поверхностноактивные свойства клеток настолько, что обр, зуется стабильная обратная фаза.

Необходимая минимальная концентрация этого вещества для поддерживания стабильной обратной фазы ферментационной среды зависит от доли масла, а также ат концентрации клеток. С возрастанием концентрации клеток н снижением доли масла требуется повышение концентрации стабилизатора.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

659605

Формула изобретения

СоставительН.Селиверстова

Редактор И.Грязнова Техред О.Андрейко Корректор О.Билак

Заказ 2120/6 Тираж 525 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва, Ж-35 Раушская наб. д.4 5

Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная,4

Ii р и м е р 1. В ферментере емкостью 12 л и диаметром 210 мм с приспособлением для перемешинания непрерывно культивируются дрожжи рода Candi da

oui И ег mor di i.

Перемешивание среды осуществляется мешалкой диаметром 75 мм. Во избежание образования тромбов ферментер армирован. Число оборотов мешалки

1500 об/мин, интенсивность аэрации

600 л воздуха/час, содержимое ферментера — 6 кг, значение рН измеряется с помощью высокоомного стек" лянного электрода, а также эталонного электрода.

В ферментационную среду непрерывно подается 0,55 кг/час масляной 15 фазы и 0,45 кг/час водной фазы в течение 6 час, масляная фаза представляет собой дистиллят нефти с содержанием п-алканов (длина цепи от С до

С ) в количестве от 10 и более вес. %.20

В качестве вспомогательного вещества (стабилизатора) добавляется первичный амин с длиной цепи С в. Концентрация стабилизатора - 0,35 г/л масляной фазы.

Водный питательный раствор имеет следующий состав (г/л):

КН РО4

7 35

kg 9 04 7Н<О 1, 84

Н РО4 (85Ъ-ная) 1,4

3 О, 006

ZnSO4 ° 7Н О 0,08

О О, 908

Значение pH — 4,5, температура

32 С. PH устанавливают с помощью

15%-ного водного раствора аммиака.

При названных условиях содержание дрожжей в обратной фазе — 38 г сухого вещества на 1 кг ферментационной среды.

Пример 2. Применяют тот же 40 самый ферментер и ту же самую ферментационную технику как и в примере 1. Число оборотов мешалки

1800 об/мин. Выращивается чистая культура бактерий В, изолированная 45 иэ шлама очистной установки Розенталь, очищающей коммунальную сточную воду города Лейпцига. Культуру выращивают при 37 С при значении рН от 6,9 до 7 и аэрации — 180 л 50 воздуха на 1 кг .содержимого ферментера за; час. Полезная емкость ферментера составляет 3,6 кг.

В ферментер постоянно добавляют масляную фазу, которая, составляет

48% веса среды и является фракцией нефти с не менее 15 вес.Ъ п-алканов

С ДЛИНОЙ ЦЕПИ От С<>ДО Сэо. 1аКжЕ постоянно добавляют водную фазу питательного раствора, которая составляет 52 нес.Ъ, и имеет следующий состан (г/л):

Н РО . 5,4

KUH 65

NaOH 0,0075

МЦЬО4. 7Н,О 2,4

Геб04 ° 7H О 0,09

МП504 5Н20 0,06

СиБО4 5Н О О, 110 пСЕ„ 0,030 и -Октадециламин l 0

После 3,6 час в стоке ферментера находится клеточного вещества в пересчете на сухой нес — 33 г.

Предложенный способ позволяет значительно интенсифицировать процесс культивирования микроорганизмов в эмульсии вода в масле на основе углеводородов и значительно повысить выход биомассы — до 25 r сухого вещества микроорганизмов эа час на

1 кг ферментационной среды.

1. Способ культивирования микроорганизмов на углеводородах в эмульсии типа вода н масле, включающий добавление вспомогательных веществ, отличающийся тем, что с целью повышения выхода биомассы, в качестве вспомогательных веществ используют сополимеризаты 1,4-бутиленгликольформаля и диэтиленгликольформаля в соотношении от 80-20 до 20-80% вес. или их смесь с гомополимеризатом, или алкиламины с длиной цепи от Ci6 до С22

2. Способ по п.1, о т л и ч а юшийся тем, что в качестве масляной фазы н эмульсии используют Н-парафины с длиной цепи от С до С

3. Способ по п.1, о т л и ч а юшийся тем, что н качестве масляной фазы в эмульсии используют нефтяной дистиллят с содержанием Н-парафинов от 0,5 до 60% вес.

4. Способ по п.1, о т л и ч а юшийся тем, что в качестне микроорганизмов используют углеводородутилизирующие бактерии или дрожжи.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент СИЙ Р 3813290, кл. 195-28, 1974 °