Реактив для определения пораженности клубней картофеля фитопатогенной микрофлорой
Иллюстрации
Показать всеРеферат
o % воен
G Л С чт-"Й . (4ZОБP."-.7 =) Ае Ч
К АВТОРСКОРАУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Со сз Советских
СОцматтйетычэсиим
Ре<пт бл н (в 663720 (6! ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 10. 05. 76 (2() 2360379/30-15 с присоединением заявки J%(23) Приоритет
Опубликоваио25.05,79, Бтоллетень тв 19
Дата опубликования описания 30,05.79 (5 I ) M. Кл.
С 12 К 1/00
ГвсуиРстаекк а мквтет
СССР м делам нибретений в открыти (53) УДК, 632.937 (088. 8) H. А. Кочур, Е. Ф. Малыгина, И. B. Эльперин, E. В. Полонская
Л. С. Богдан и В. A. федоренко (72) Авторы изобретения
Киевский технологический институт пишевой промышленности и Киевский Государственный Университет им. Т. Г. Шевченко (54) РЕАКТИВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОРАЖЕННОСТИ КЛУБНЕЙ
КАРТОФЕЛЯ ФИТОПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРОЙ
Изобретение относится к хемилюминесцентнсму анагизу и может быть использовано при изучении разттичныл вопросов, связанных с патологией картсфеля.
В последнее время широко используют бисфиэические методы для а«ализа живых
5 объектов как in мчо так и in vitro . Среды них хемилюминесцентные методы занимают особое место: снн просты в реализации и позволя-ст быстро получать информацию о физиологическом состоянии то изучаемого организма (11.
Многие хемилюминесцентные реакции основаны на модельных растворах. Добавление изучаемого растворе к модели (рет5 активу) вызывает увеличение или ингибирсвание свечения.
Известный реактив, широко используемый для хемнлюминесцентных анализов, ссдерккнг люминол, едкий натр и перекись т 20
° Водорода (21.
Зтст реактив оказался ссвернгенно. не» вф ектявным при нэученнн патологии кар» тсфеля так как урсвен" свечения модели не менялся при добавлении к нему клеточного сока больных и здоровых клубней.
Henbro изобретения является создание реактива, позволяюшего проводить экспрессс-aналттз на выявление ранних стадий псраженнссти картофеля фитопатогенной микро торой по интенсивности хемилюмииесценции.
Для атсго в реактив, содержаший люминол, перекись водорода и едкий натр, вводят бензидин при следуимцем соотношении компонентов, вес..%:
Бензидин 5,28-3,75
Люмичол 2, 03-1, ro
Перекись водорода 14,25-11,65
Едкий натр Ос таль нсе
K реактиву добавляют 5 мл клеточного соха, разбавленного дистиллированной водой в соотношении 1:24.
Исходный раствор бензидина готовят следуюшим образом.
В мерную колбу на 00 мл наливают
100 мл дистиллированной воды, добавляют
2.3 мл ледяной уксусной кислоты и
184 мг очншенного бензидннв. Далее колбу нагревают нв водяной бане при 60 С, постоянно взбалтывая. После полного раст ворения бензядяна добавляют 5, 5 г уксуснокислого натрия, охлаждают и доводят дистиллированной водой до метки.
Срок годности раствора шесть дней. -4
Рабочий 2 ° 10 М раствор бензидина
Ф готовят рвэбаьчением, 2 мл исходного
5 ° 10 M рвстворв бензидяна в 500 мл дистиллированной воды.
Hcxîgaü:é 0,05 M раствор люминолв готовчт растворением 0,1 r очяшенного люминола в 10 мл 5%ного Кс ОН. Срок годности раствора авв дня.
Рабочий 2 10 ." раствор люминола в 3,2;10 -4,2 10 М 8<ОН готовят раэбав&еняем 1 мл исходного раствора люмянолв дистиллированной BogoA с добавлением 9- -12 мл 1 М Иа OH в объеме
300 мл. Срок годностя раствора - два дня.
-Ф
Рабочий 7,3 10 М раствор перекиси водорода готовят рвзбавлением из л °
r, э. 10: 1 его раствора Для анализа ра« створ может быть использован в течение трех дней.
Использование предлагаемого реактива для определения поражеяностн клубней а картофеля фнтопвтогенной микрофлорой обеспечивает следующие преимушества.. а) проведение анализа по определению порвженности кл бней квотофеля фнтофло-. е рой, сухой гнилью и доугимя звболеваняя.0
4.. ми за 3-4 мнн, что позволяет применять предлагаемый реактив в автоматическом экспресс-анализе ка".åñòâà картофеля; . б) стабильность уровней хемилюминеспеятного свечения пораженных фитопвтогенной микрофлорой и здоровых клубней картофеля; в) возможность выявления ранних с, вдий пораженности клубней картофеля фитопатогенной микрофлорой, Формула изобретения
Реактив для определен и клубней картофеля фятопат флорой, содержвшнй люмин водорода и едкий нвтр, о т шийся тем, что,спел экспресс-анализа на выявл стадий порвженнсстя картсф Ожит бензядин при следуюш компонентов, вес. %:
Бенэидин
Люминол
Перекись водорода
Едкий натр ия пораженнос т огеяной мяхрооп, перекись ли чаюью проведения ение ранних еля, он соде ем соотношения
5,28-3,75
2, 03- 1,66
14,25-1 1, 65
Остальное .
Источники информапии, принятые во внимание при экспертизе . Сб. Сверхслабые свечения в биологии, Иэд-во МГУ, 1972, 2. Евбко А. К. и др. «Хемилюминиопентный анализ, Киев, 1966, с. 60 220.
Составитель М. Мирзаев
Редактор A. Морозова Техред С. Мигай Корректор Е. Лукач
Заказ 2922/21 Тираж 52 5 Под пис ное
fIJfHl i ПИ Гссудврственногo хомнтета СССР по печам изобретений и открытий
113035, Москва, >Е-35, Раушсхая нвб., д. 4/5
Филиал П1!П Г!агент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4