Способ получения пептидов или их солей

Способ получения пептидов или их солей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

мнЕ 1

ФФ и®т@ g egg

О П И С A H H 6 «» 664560 изоьгятения

Союз Сбэетсннк

Соцналнстнчеснни

Республнк (61) Дополнительный к патенту (22) ЗаявлЕно 23.12.77 (21) 2556814/23-04 (23) ПриоритЕт — (32) 24. 12 ° 76

2 (51) M. Кл.

С 07 С 103/52

А 61 К 37/02 (31) В3-607 (33) ВНР

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий

Опубликовано2505.79 Бюллетень № 19 (53) УДК 547-964.

° 4,07 (088.8) Дата опубликования описания 2505,79

Иностранцы

Иштван Шен, Лайош Кишфалуди, Винце Варро, Ласло Варга и Йожеф Нафради (BHP) (72) Авторы изобретения

Иностранное предприятие Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр PT (BHP) (71) Заявитель! (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДОВ ИЛИ ИХ СОЛЕЙ

30

Изобретение относится к способам получения пептидов — новых соединений, обладающих биологической активностью, которые могут найти применение в медицине.

В пептидной химии в синтезе пептидных цепей широко используют различные методы конденсации, например метод актнвированных эфиров, Карбодиимидный и т.п. (1).

Использование известных методов конденсации пептидных цепей позволяет получить новые пептиды, обладающие биологической активностью.

Цель изобретения — синтез новых. пептидов, обладающих интересными фармакологическими свойствами.

Предлагаемый способ получения пептидов общей формулы

A. — Trp —  — Азр — Phg — NH

2 где A — 2- (L, D) - (трет-бутилоксикарбониламиноокси) ацетил, 2- (L, D) — (трет-бутилоксикарбониламиноокси) пропионил;

 — метионил, лейцил, норлейцил, 2-аминодеканоил, или их солей, заключается в том, что тетрапептид общей формулы

Н вЂ” Trp —  — Asp — Phg — NH

2 где В имеет указанные значения, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы

A — Х где A имеет указанные значеиия;

Х вЂ” пентахлорфенокси- или пентафторфеноксигруппа.

Исходные тетрапептидамиды общей формулы

H — Trp — B — Asp — Phg — NHZ где В имеет указанные значения, получают известным способом частичной конденсации или постепенным удлинением цепи азидным методом, методом смешанных ангидридов, карбодиимидным методом, методом активированных эфиров и т..п. функциональные группы, не принимающие участия в реакции, при необходимости защищают, в частности, груп- пами, отделяемыми с помощью гидролиза, ацидолиза или каталитического гидрирования. Карбоксильную группу защищают, например, этерификацией бензиловым спиртом, трет-бутанолом или п-хлорбенэиловым спиртом. Для защиты аминоокси- и аминогрупп исполЬзуюг формильную, тозильную, тритильную, трифторацетильную, о-нитросульфенильную, фталильную, п-хлоркарбобензоксигруппу, однако предпочтитель664560 но применять карбобензокси- и третбутилоксикарбонильные группы. Атом азота в индольной основе триптофана защищают формильной группой.

Соответствующим подбором защитных групп осуществляют селективное или . одновременное отделение их известным способом (например, гидролизом,,ацидолизом, каталитическим гидрированием) .

Для присоединения защищенной (аминоокси)ацильной группы на аминном конце применяют пентагалогенфениловые эфиры, активный эфир вводят в реакцию с H — Trp —  — Asp — Phg — NH, имеющим карбоксильную группу на конце цепи. Для синтеза последнего используют

Š— L — Phg — ОН или Š— D — Phg — OH где Š— защитная группа, и после отделения защитнОй группы Z постепенно наращивают тетрапептид защищенными (N-оксисукцинимид) аминокислотными эфирами или (пентагалогенфенил)аминокислотными эфирами. Защитную группу Z отделяют обработкой уксуснокислым бромистым водородом или каталитическим гидрогенолизом. Вместо защитной группы Е используют ВОС-группу, которую отделяют обработкой в более слабо кислой

:среде.

Фрагмент, защицающий /Ь -карбоксильную группу аспарагиновой кислоты, отделяют селективно на стадиях дипепхлороформ : метанол 95:5 (1); хлороформ : метанол 9:1 (2); хлороформ : н-гексан : уксусная к этилацетат : (пиридин : уксусная этилацетат : (пиридин : уксусная этилацетат : (пиридин,: уксусная этилацетат г (пиридин : уксусная этилацетат : (пиридин : уксусная этилацетат : (пиридин : уксусная этилацетат : (пиридин : уксусная

«Для обнаружения пятен на тонкослойных хроматограмглах применяют раствор нингидрина. Пластины после обрызгивания просушивают в течение

5 мин при 105 С. Затем хроматограммы поглещают в камеру с газообразным хлором и после аэрации обрабатывают раствором о-толуидин/KJ.

Для очистки веществ колоночной хроматографией применяют силикагель (кизельгель G) с зернами размером

62-200 мкм.

Пример 1.

1. N- (Бензилоксикарбонил) -D-фенилглицин амид.

К раствору 24,0 r (84 ммоль)

Z — D — Phg — ОН в 170 глл хлороформа добавляют 11,6 мл (84 ммоль) трг4этиламина. Затем к полученному раствору прикапывают 8,9 мл (84 ммоль) этилового эфира хлоругольной кислоты при

"10 С и смесь перемешивают еще в течение 10 мин при -10 С, далее вводят газообразный аммиак в течение 1 ч. тида, трипептида или тетрапептида или вместе с группой, защищающей аминогруппу, ацидолизом или каталитическим гидрогенолизом.

Конечные продукты очицают кристаллизацией, переосаждением, адсорбцион5 ной хроматографией на силикагеле или ионообменной хроматографией на кар-, боксиметилцеллюлозе.

Новые соединения получают в виде свободных кислот или солей в зависи10 мости от метода их получения. Соли, образованные с помощью органических или неорганических кислот, могут быть превращены во внутренние соли известными методами или при очистке.

В приведенных далее примерах используют следуюцие сокращения:

Ogfу —

Тонкослойную хроматографию проводят на слоях силикагеля (торговое наигленование — кизельгель g), приго30 товленных по Италю. Для проявления хроматограмгл применяют следующие смеси рàcTворителей:

I ислота 8: 1: 1) (3); кислота: вода 20: б: 11) 9: 1 (4); кислота: вода= 20:6:11) 8:2 (5); кислота: вода 20: б: 11) 7: 3 (6); кислота: вода 20: 6: 11) 3: 2 (7); кислота: вода 20: 6: 11) 1.1 (8); кислота: вода 20: 6: 11) 2: 3 (.9); кислота: вода 20: б: 11) 85: 15 (10);

Смесь оставляют на ночь и затем упаривают в вакууме, твердый остаток

45 обрабатывают водой. Продукт кристаллизуют из этанола. Получают 11,8 r (49,4%) хроматографически чистого

Z — D — Phg — NH2 плавяцегося при

171-173оС; Р4 0,75; (сС ) — 76,8 (с 1,0, в диметилформамиде) .

НайАено, Ъ: С 67,43; Н 5,70;

N 9,98.

С!6 H iI, O N (М 284,30)

Вычислено, Ъ: С 67,59; Н 5,67;

N 9,85.

2. D-Фенилглицинамид-гидробромид.

К раствору 20,0 r (70 ммоль)

Z — D — Phg — NH 1), В 40 мл уксусной кислоты добавляют 70 мл 8 н. раствора бромистого.водорода в уксус60 ной кислоте. Спустя 1 ч реакционную смесь разбавляют эфиром, гидробромид отфильтровывают. Соль, содержащую большое избыточное количество бромистого водорода, перекристаллизовывают

65 из десятикратного количества этанола.

6645

К раствору 5, О r (14 ммоль)

Н вЂ” Asp — (О Ва) — Р— Phg — ЫН ° HCf (пример 1.4) и 4,85 г (14 ммоль)

B0C-Met Su в 60 мл диметилформамида добавляют 1,96 мл (14 ммоль) триэтил- . амина. На следующий день суспензию упаривают в вакууме и остаток обрабатывают водой. Получают 7,83 r продукта, который осветляют, обрабатывая горячий раствор в 40 мл этанола при

60 кипении 40 мл воды. Получают 6,57 г (84%) хроматографически чистогоВОСМе1-Аер-(0 Su)-D- Vhg - ХН плавя- л щегося при 194-196оC. После перекристаллизации из этанола т.пл. 197- 65 р

Получают 14, 15 r (87, 53)

Н вЂ” D — Phg — NHz HBr, т.пл. 263,0263 5оC; R) 040; (сс ) -756 (с 10, в диметилформамиде) .

Найдено, %: С 41,40; Н 4,82;

N 12,01.

Сан, ONzB1(M 231 10)

Вычислено, Ъ: С 41,60; Н 4,77;

N 12,13.

3. N-(Бензилоксикарбонил)-Ь-аспарагил- /о †(трет-бутилэфир)-Р-фенилглицинамид.

6,31 г Z — Asp — (OtBu) -ОЯи, 3, 89 г (16, 8 ммоль) Н вЂ” D — Phg

-МН ° HBr (пример 1. 2) и 2,10 мл (15 ммоль) триэтиламина суспендируют в 150 мл хлороформа и реакционную 15 массу оставляют на ночь. Загустевшую суспензию упаривают в вакууме и остаток перекристаллизовывают из этанола. Получают 5,02 r (73,63) хроматографически чистого Š— Asp — (О Bu) — D — Phg — NH i плавящегося при 17920 о

181 С. После перекристаллизации из этилацетата продукт плавится при .188-189оС. Н4 О 75. (с6 ) 59 9о (с 1, в диметилформамиде) °

Найдено, %: С 63,22; Н 6,60;

N 8,96.

С 4 Hzq ОЬНз (М 455, 50)

Вычислено, Ъ: С 6328; H 6,42;

N9,,23 °

4. L-Аспарагил- p — (трет-бутилэфир) -30

-D-фенилглицинамид-гидрохлорид.

К раствору 12,83 r (28,2 ммоль)

Š— Asp — (О Bu) — D — Phg — NH (пример 1,3) в 200 мл диметилформамида при охлаждении добавляют 2,46 мл 35 (28,2 ммоль) концентрированной соля- ной кислоты, а затем 2 г палладия на активированном угле. При постоянном перемешивании через суспензию пропускают водород в течение 2,5 ч. Ка- 40 тализатор отфильтровывают, фильтват упаривают и остаток растворяют в этаноле. Раствор осветляют, растворитель отгоняют в вакууме и остаток обрабатывают эфиром. Получают 10,0 r (99%) хроматографически чистого

H — Asp — (O Bu) -- D — Phg — NH HCE плавящегося при 169-170 С, Н4 0,15.

5. N (трет-бутилоксикарбойил)-L-метионил-L-аспарагил- )о †(трет-бутилэфир)-D-фенилглицинамид. 50

60 6

198 С; В4 О, 75; (, ) -67,2 "(с 1,0, в диметилформамиде) °

Найдено, %: С 56,81; Н 7,34;

N 9,98; S 5.69

С 6 40 ОуИ4$ (М 552, 69)

Вы сислено, Ъ: С 56,51; Н 7, 30;

N 10,14; S 5,78. б. L-Метионил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид-гидрохлорид, К раствору 5,6 r (10,1.ммоль)

ВОС-Met-À5ð-(0 Bu)-D-Vhg- ХН2 (при мер 1.5) в 10 мл уксусной кислоты добавляют 3,5 мл (35 ммоль) меркаптоэтанола и 50 мл 4 н. раствора НСГ в ледяной уксусной кислоте ° Через 30 мин реакционную смесь упаривают в вакууме и твердый остаток обрабатывают безводным эфиром. Получают 4,84 r

Н-Ме1-Аэр-D- Phg — NHz НСР (R > О, 1), содержащего избыточную соляную кислоту.

7. N-(трет-Бутилоксикарбонил) -L-триптофил-Ь-метионил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид.

К раствору 4,4 r (10,,2 ммоль) Н-(Act-Amp-13-Phg - ИН - МС8 (пример 1.6) и 4, 10 r (10, 2 ммоль) ВОС - Т г р - 05 и в 100 мл диметилформамида добавляют

2, 85 мл (20, 4 ммоль) триэтиламина.

На следующий день суспензию упаривают. в вакууме и остаток обрабатывают водой. Получают 6,66 г (95,8%)

3QC-Tap-ihet -Rap-Р-Phg-ÌÌz,ò.ïë. 216218оС (с разложением) . После перекристаллизации из 80Ъ-ного этанола продукт плавится с разложением при

222оСр Н 0,3у (p() и -65,5 (с 1,О, в диметилформамиде) .

Найдено, Ъ.: С 58,23; Н 6,30;

N 12,60; $4,86.

C gg H4z O8N6 S (М 6 82, 81)

Вычислено, Ъ: С 58,05; Н 6,20;

N 12,31; S 4,68.

8. L-Триптофил-L-метионил-L-аспарагил-13-фенилглицинамид.

6,0 г (88,8 ммоль)ЭОС-Т р — AAet >sp-B -7ИД - ИН . (пример l. 7) обрабатывают 60 мл солянокислого раствора диоксана в присутствии 3,1 мл (44 ммоль) меркаптоэтанола. Через

15 мин реакционную. смесь разбавляют безводным эфиром. Гидрохлорид, содержащий 6,23 г избыточной соляной кислоты, отфильтровывают. Затем из этой смеси готовят суспензию в 150 мл воды. рН суспензии доводят до 7 с помощью триэтиламина, после чего перемешивают смесь, отфильтровывают осадок и, наконец, промывают его водой.

Получают 4, О г (78%) Н-Tr p — Met - Asp-D->hg -NHZ который, разлагаясь, плавится при 230-232 С; В 0,3.

9. Пентахлорфениловый эфир третбутилоксикарбониламинооксиуксусной кислоты, 8, О г (41 8 ммоль)ВОС-Oping -ОМ и 11, 1 r (42, О ммоль) пентахлорфеноа растворяют в 160 мл безводного диоксана. Раствор охлаждают до темпеатуры не менее 5 С и затем к нему

Получают гидро бромид, выход 88, 8Ъ, RЗ 0,25; (a) +76,5 (с 1,0, в диметилформамиде) .

3. N- (Бензилоксикарбонил) -Ь-аспарагил- p — (трет-бутилэфир) -L-фенилглицинамид.

5 8,65 r (37,5 ммоль) Н-L,- Рппф — NHz-HB (пример 2.2) вводят во взаимодействие с 21,6 г (37, 5 ммоль)

2-Asp-(О &и)-ОРСР в 160 мл диметилформамида в присутствии 5,15 мл

1р (37,5 ммоль) триэтиламина. После

30 мин перемешивания в суспензию добавляют еще 5,15 мл (37,5 ммоль) триэтиламина. Реакционную. смесь выдерживают в течение ночи, затем упаривают в вакууме, остаток обрабатывают эфиром. Осадок отфильтровывают, промывают водой, продукт (13,9 r) перекристаллизовывают из водного этанола.

Получают 10,6 r (65,8Ъ) хроматографиче ски чистого Z — Asp - (О Bu) — (- РИф20 -МН2, т.пл. 207-2080С. Дополнитель- . ная перекристаллизация из этанола повышает температуру плавления продукта до 209 С; В . 0,75; (Ф )оt21,6О (с 1, 57, в диметилформамиде) .

25 Найдено, Ъ: С 63,50; Н 6, 38;

N 9,23.

Cz4Nzq O Ng (И 455,50)

Вычислено, Ъ: С 6328; Н 6,42;

N,9,23.

3() осадок, полученный из эфирного маточного раствора первичного продукта, отфильтровывают, промывают водой, перекристаллизовывают из этанола. Получают 0,47 r (2,9Ъ) Z-Asp-(0 BU)-0 — РИД вЂ” N Hq т. пл. 188-189 С

В 0,75; (а )> -59,0 (с 1,0, в диметйлформамиде).

4. L-Аспарагил- /Ь вЂ (трет-бутилэфир)—

-L-фенилглицинамид-гидрохлорид.

Применяют 9,6 r (21 ммоль) Z, -Абр. -(О Bu) — 4 — Phg- ИН (пример 2. 3), отщепляют защитную группу в условиях описанных для D-диастереомера (пример 1.4). Получают 8.,03 г хроматографически чистого Н- Asp-(О Ви) -)-Phg45 -НН2 НС0 содержащего избыточную соляную кислоту, R О, 35.

5. N-(трет-Бутилоксикарбонил)-L-метионил-L-аспарагил-)5 †(трет-бутилэфир)-L-фенилглицннамид.

50 К раствору 3,95 г (10,5 ммоль)

Н-Asp -(О Su)-L-th) -ИН -HCO (пример 2,4) и 5,22 r (12,6 ммоль) BOC-Met-ОРДЕР в 50 мл безводного диметилформамида добавляют 2,94 мл (21 ммоль)

55 триэтиламина. Смесь экстрагируют гексаном, гексановый экстракт отделяют и промывают водой ° Экстракт упаривают, 5,38 г первичного продукта растворяют в 25 мл кипящего метанола и осаждают 25 мл воды. Получают

4,70 r (81Ъ)ЗОС-Net,-hep-(O bu)-L-Phg-)(HZ небольшое количество которого очи1 щают переосаждением из смеси метанола с эфиром, получают продукт с т.пл. 162 -163 С; R4 0 75. (а(,) 5 5

65 (с 1,0, в диметилформамиде) .

664560 добавляют 8,6 г (42,0 ммоль) дициклогексилкарбодимида. Реакционную смесь оставляют на ночь при комнатной температуре, выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме, а остаток перекристаллизовывают из смеси диоксана и этанола.

Получают 13, 7 r (74, ЗЪ) ВОС - ОДСу-ОРСР т.пл. 167-168 C; R О, 7.

Найдено, Ъ: С 35,37; Н 2,90;

N 3,31; С0 40,12.

С,,з Í „O,NCe> (М 439;51)

Вычислено, Ъ: С 35 52; Н 2 75;

И 3,18у СР 40,33.

10 „2- (трет-Byòèëoêñèêàðáîíèëàìèнокси) -ацетил-L-,òðèïòîôèë-L-метионил-1.-аспарагил-L-фенилглицинамид.

К суспензии 1,50 r (2,57 ммоль)

Н-Тгр-Met-Asp-0- Phg - ИН2 (пример 1.8) .в 15 мл диметилформамида добавляют 2,26 мл (5, 11 ммоль) триэтиламина и 1,20 r (2,73 ммоль)

ВОС-Ogle ОРСР (пример 1.9) . Суспензию перемешивают до полного растворения всех веществ, раствор оставляют на ночь. Затем упаривают, к ос-татку добавляют эфир. Получают 2,12 г сырья,:которое растворяют в небольшом количестве смеси 5 растворителей и пропускают через колонку, приготовленную из 20 r силикагеля. Затем смесью 5 растворителей осуществляют элюирование при скорости 15 мл/час.

Фракции, содержащие продукт, упаривают, остаток дважды перекристаллнзовывают из 20 мл 80Ъ-ного этанола.

Получают 0,82 г (41,4Ъ)3ОС-О ц -Ч рр Ае Asp-3-Р ) й))„который,разлагаясь, плавится при 199-200" Су R+> О, 15

R1f 0,40у- (dJ)Q -40рЗ (с 1,0р в диметилформамиде).

Найдено, Ъг С 55,91; Н 6,18;

М 13,35; S 4,16. . СЗБ Н 450 ю N7 S (M 755, 86 )

Вычислено, Ъ: С 55,62; Н 6,00;

N 12,97; S 4,24. Пример 2.

1. N-(Бензилоксикарбонил)-L-фенилглицинамид.

К раствору 27,6 г (97 ммоль)2 -Ь-

-Р(1ф - Ok в 300 мл безводного тетрагидрофурана добавляют 13,55 мп (9 7 ммоль) триэтиламина, а затем при

-10 С 12 1 мл (97 ммоль) пивалоилхлорида. Суспензию смешанного ангидрида перемешивают при -10 С в течение

10 мин. Охлаждение убирают, реакционную массу оставляют на 1 ч при комйатной температуре и вводят газообразный аммиак. Реакционную -смесь оставляют на ночь, упаривают и остаток обрабатывают, как описано для

D-энантиомера. Получают 18,90 r (68,7Ъ) Е -1. - РИ6 - КН, т.пл. 172173аС R4 0 75; (< ) +80 7о (с в диметилформамиде) .

2. L-Фенилглицинамид-гидробромид.

Продукт обрабатывают в условиях, описанных в примере 1.2, применяя в качестве исходного Е-L- PÈô -)(Hz. 664560

1О

Найдено, Ъ: С 56, 70; Н 7, 34;

N 10, 35; S 5,68.

СгЬН4о Ы4Б (М

Вычислено, Ъ: С 56, 51; Н 7, 30;

Ы 10,14; S 5,7.

6. L-Иетионил-L-аспарагил-L-фенилглицинамид-гидрохлорид. 5

4,2 r (7,6 ммоль) 30C-Met-Авр-(p

Получают 3, 2 r (97Ъ) Н-Met -Amp-(-Р6Д-NH ÍCÐ, т.пл. 198-2000Су 10

R 0,25 (среднее значение для D-диастереомера).

7. N-(трет-Бутилоксикарбонил) -1-триптофил-L-метионил-L-аспарагил-L-фенилглицинамид. 15

Йз 3,45 г (8 ммоль) Н-Met-Asp-1-РИф- КЙ2 НСР в условиях, описанных раньше (пример 1.7), получают 4,77 r (97,9Ъ)50С-Ч р-AAet -Agp- (, - phd -ЙН2, который, разлагаясь, плавится при

191-1930С. Перекристаллизацию небольшой пробы осуществляют из 80Ъ-ного этанола, полученный продукт, разлагаясь, плавится при 200 C; R 0,35; (вс ) О (с 1,0; в диметилформамиде), Найдено, Ъ: С 58,05; Н 6,21;

Я 12,64; Я 4,77.

С Н4,о8яьS (М 682,81)

ВычиСлено, Ъ: С 58,04; Н 6,20;

N 12,31; S 4,68.

8. N-Триптофил-L-метионил-L-аспа- 30 рагил-L-фенилглицинамид.

4, 4 г (б, 33 ммоль) 30С - Тг р - M et—

-ASP-L -7hg -ИН (пример 2. 7) обрабатывают в условиях, описанных в примере 1.8. Получают 2,90 г (76,5Ъ) Н 35

-VrP- МЕ1 — А БР— ). — РЬф — ЙНг котоРый плавится с разложением при 210 С;

В 0,3О.

9. 2- (трет-Бутилоксикарбониламиноокси) ацетил-L-триптофил-L-метионил-L40

-аспарагил-L- фенилглици н амид.

Процесс ведут в условиях, описанных для D-диастереомера (пример 1.10), используя в качестве исходного про- дукта 1,0 г (1,71 ммоль) Н-Trp-Met-Авр45

4- Phg-éH (пример 2.8) .

Первичныи продукт очищают колоночной. хроматографией на силикагеле „для элюирования используют смесь 10 ра- створителей. Получают 0,48 г (37,2Ъ)

ВОС-0$8g-7rp-Met-Amp -).-T>hg -MHq, т. пл. 169-170 С (с разложением);

R 0,35; (ж )и +8,2 (с 1,0, в диметйлформамиде) .

Найдено, Ъ: С 55,11; Н 6,23;

N 13,04; S 4,10. 55

СЗ Н 4 0)о NtS (М 755,86)

Вычислено, Ъ: С 55, 62; Н 6, 00;

V 12,97; S 4,24.

Пример 3.

1. Пентахлорфениловый эфир 2-(трет-бутилоксикарбониламиноокси)-D-пропионовой кислоты. .К раствору 4,10 г (20 ммоль) БОС-D-0A(!a - ОН и 5,32 г (20 ммоль) пентахлорфенола в 20 мл диметилформамида, охлажденному до Î С добавsréþò 4, 12 r (20 ммоль) дициклогексилкарбодиимида. Реакционную смесь при

О С перемешивают в течение 30 мин, затем охлаждение убирают и реакционную массу оставляют на ночь при комнатно."; температуре. Осадок отфильтровывают, маточник упаривают в вакууме. Остаток обрабатывают безводным эфиром и Фильтруют. Получают

6,25 г продукта, который очищают перекристаллизацией из этанола. Полу- . чают 5,80 r (64Ъ) ЬОС-Э-САРа -0РСР, т.пл. 123 124 C; R 0 85у (о (с 1, О,. в диоксане) .

Найдено, Ъ:. С 37, 16; Н 3, 29;

СР 39, 01. .. С 4 Н j4 05ИСР5 (М 453, 54)

Вычислено, Ъ: С 37,10; Н 3, 10;

СР 39,10.

2. 2-D-(трет-Бутилоксикарбониламинокси)пропионил-L-триптофил-Ь-метионил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид.

К раствору 1,5 r(2,,57 ммоль) Н-Trp-Met-Asp-2-РИЯ -NH (пример 1.8) в

50 мл диметилформамида добавляют

2,26 мл (5, 14 ммоль) триэтиламина и 1,24 г (2,73 ммоль)ЭОС-D-ОАРа-ОРСР (пример 3.1) Смесь выдерживают 5 ч упаривают в вакууме и остаток растирают с эфиром. Получают 1,9 г первичного продукта. После перекристаллизации из 10 мл 96Ъ-ного этанола выделяют 1,06 г (53,5Ъ) хроматографически чистого 30С-D- ОдРа -Т р- AAet-Asp-D-РИЯ-МН Т.ïë. 200-204 С (c разложением); R< 015; Н 030; ((6 ) -24 9" (c 1,0, в диметилформамиде), Найдено, Ъ: С 56, 33; Н 5, 88;

N l2,7О; S 4, 09.

СзьН47Ою 078 (М 769,89) Вычислено, Ъ: С 56, 16; Н 6, 15;

N 12,74; S.4, 16.

Пример 4. 2-D-(трет-Бутилоксикарбонилокси)пропионил-L-триптофил-L-метионил-L-аспарагил-L-фенилглицинамид. ф раствору 1,0 г (1,71 ммоль) H Р- МИ - А ьр -(-Phg- g H > (пример 2. 8) в 30 мл диметилформамида добавляют

0,24 мл (1,71 ммоль) триэтиламина и

О, 85 г (l, 88 ммоль) РОС -Э-САРа -0РСР (пример 3.1) . Смесь оставляют на ночь, затем упаривают в вакууме, остаток обрабатывают безводным эфиром. Первичный продукт растворяют в небольшом количестве смеси 10 растворителей и пропускают через колонку со 100 г силикагеля. Продукт элюируют смесью

10 растворителей со скоростью 15 мл/ч.

Фракции, содержащие продукт, объединяют „ упаривают и получают 0,74 г (56Ъ)ЗОС-3-САРа-Tr p-Met-Авр-L-Щ- г т.пл. 167-168 Су RSi О, 30; (сС ); +29,8 (с 1,0, в диметилформамиде).

Найдено, Ъ: С 56,40; Н 6,31;

И 12,65у S 4,01.

С ь Н 4 0 ю Ng S (М 76 9, 89)

Вычислено, Ъ . С 56, 16; Н 6, 15;

К 12, 74; S 4,16.

6645

Пр.имер 5.

1. N- (Бензилоксикарбонил) -L-лейцил-Ь-аспарагил- P — (трет-бутилэфир)—

-D-фенилглицинамид.

К раствору 5,0 г (14,0 ммоль) . и- Аэр — (а Вгг) -D- Р гг(5 — NHz НСИ (пример 1.4) и 5,13 r (14,2 ммоль) 5

Е-Leu-05u в 60 мл диметилформамида добавляют 1,96 мл (14,0 ммоль) триэтиламина. Реакционную смесь оставляют на ночь и затем упаривают в вакууме, остаток растирают с водой. гО

Полученные 7,32 г первичного продукта растворяют в этаноле, осветляют и кристаллизуют. Получают 6,05 r (77,7%) Z,-Leu- А sp- (O Bu}-V-Phg- NHz т.пл. 192-194 C; R> О, 75. Небольшую пробу подвергают перекристаллизации из,этанола, дополнительно очищенный продукт имеет т.пл. 195-196 С; (3> -69,5 (c 1,0, в диметилформамиде).

Найдено, %: С 63,54; H 7,38г

N 10,07.

CgpH4eOyN4 (М 568,67)

Вычислено, Ъ: С б 3, 36; Н 7, 09;

N 9,8.

2. L-Лейцил-L-аспарагил-D-фенил- 25 глицинамид.

К 5,20 г (9,15 ммоль)2 -Leu-Asp-I0 Bu)-D-РЬД- ИН (пример 5. 1) добавля.ют 50 мл 1 н. раствора бромистого водорода в уксусной кислоте, смесь вы- 30 держивают 1 ч. Реакционную массу упаривают в вакууме и гидробромид изолируют безводным эфиром. 5,33 r гидробромида суспендируют в 50 мл хлороформа, рН суспензии доводят до 35

7 с помощью триэтиламина, полученный гелеобразный продукт отфильтровывают и промывают этанолом. Получают }{-Ьeо-Авр-D-Phg - МН> выход

2 45 г (70,5Ъ); т.пл. 218 †2 С; :

R y 0,25.

3. N- (трет-Бутилоксикарбонил) -L-триптофил-L метионил-Ь-аспарагил-D- фен ил гли цин амид.

60 12

2,8 г (4,2 ммоль) ВОС-Trp-Ьeu-Asp-З-Р6 -КН (пример 5.3) обрабатывают

30 кл солянокислого диоксана в присутствии 0,59 мл (8,4 ммоль) меркаптоэтанола. Через 15 мин реакционную смесь разбавляют безводным эфиром.

2,60 г гидробромида суспендируют в

150 мл „воды. рН суспензии доводят до б с помощью триэтиламина, осадок отфильтровывают и промывают водой.

Получают 2,22 г (93,7Ъ) H-Trp- Leu -Asp-P-Vhg-NH>который, разлагаясь, плавится при 246-248 C; Ry 0,35.

5. 2-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)-ацетил-L-триптофил-L-лейцил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид.

К раствору 1,10 r (1,95 ммоль) "

- 3 гр-1.eu-Asp-Э-Vhg-. Nkz (пример 5.4) и 0,28 г (2,0 ммоль) триэтиламина в 10 мл диметилформамиде добавляют

0,92 r (2, 10 ммоль)30C-Ogpu — ОРСР (пример 1.9). Смесь оставляют на ночь, упаривают в вакууме и остаток растирают с безводным эфиром. Первичный продукт (1,46 г) в горячем состоянии отфильтровывают из десятикратного количества этилацетата. Полученные 1,31 r вещества растворяют в небольшом количестве смеси 10 растворителей и пропускают через колонку, приготовленную из 80 г силикагеля. Элюирование осуществляют смесью 10 растворителей со скоростью

8 мл/ч. Фракции, содержащие чистый продукт, собирают, упаривают и получают 0,52 г продукта, который перекристаллизовывают из 80%-ного этанола, Получают 0,45 r (31,3Ъ)BOC-Og0g-Trp-Leu-Asp-0- Рhg- NH z который плавится при 206-208 C; R< 0,75; (с )п -51,7 (с 0,5, в диметилформамиде).

Найдено, Ъ: С 58,70; Н 6,65;

N 13,51.

С Н470ю Мт (М 737,82)

Вычислено, Ъ: С 58,60; Н 6 г 42)

N 13,29.

К раствору 2,.25 г (5,93 ммолг )

H-Leu- ASp-0 — Why - 4HZ (пример 5.2) в смеси из 50 мл диметилформамида и

10 мл гексаметилентриамида ортофосФорной кислоты добавляют 0,84 мл (5, 93 ммоль) триэтиламина и 2,65 r 50 (6,6 ммоль)) ВОС-Тгр-05u . Реакционную смесь перемешивают 4 ч и полученный прозрачный раствор оставляют на ночь.

Затем в вакууме отгоняют диметилформамид, к остатку добавляют воду и ос;тавляют на холоде, выпавший осадок отфильтровывают. Первичный продукт (4,31 r) суспендируют в воде, суспензию дважды доводят до кипения, затем фильтруют в горячем состоянии. Получают 2,87 г (72,8%) ВОС-Trp-(,eu-Asp-D-Phg-ЙН2 т,пл. 195-200 гC R> 0,55.

Продукт перерабатывают без дальйейшей очистки, 4. L-Триптофил-L-лейцил"Ь-аспарагил-D-фенилглицинамид. 65

Пример б.

1. N-(Бензилоксикарбонил)-L-лейцил-L-аспарагил-(трет-бутилэфир)-L-фенилглицинамид.

В качестве исходного вещества бе-. рут 4,0 г (11,2 ммопь) k- Asp -(0

Получают 3,0 г (47%)Е-)eu-Дэр-(0 Bu}-L-7И -ИНдкоторый разлагаясь, плавится при 193-194 С; й+ 0,70; R 0,65; (с(,)р О (c 1,0, в диметилформамиде) .

Найдено, %: С 63,79; Н 7,30;

N 9,59.

СбаН4оОЪN4(М 568,67)

Вычислено, Ъ: С 63,36; Н 7,09;

N 9,85.

2. L-Лейцил-L-аспарагил- fh -(трет-бутилэфир)-L-фенилглициламид-гидрохлорид.

)3

2, 75 г (4, 84 ммоль) Z,-(ец - Asp(0 Su)-L- Phg- МН (пример 6. 1) растворяют н 50 мл диметилформамида и защитную группу отделяют гидрированием в присутствии 0,45 мл (5,2 ммоль) концентрированной соляной кислоты с использованием в качестве катализатора палладия на активированном угле. Спустя

2 ч катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме. Остаток обрабатывают безводным эфиром. Получают 2, 25 г (98,5%) H-Leu- Asp-(фВо)-Ь- IO

-Рйф-ЙН НСР который плавится при 1821830С; В 0,15.

3, Ь-Лейцил-L-аспарагил-L-фенилглицинамид-гидрохлорид.

2,25 r (4,80 ммоль) Н- Leu-Аьр-j0

-(.-РИД - NH> ° НИ (пример 6.2) обрабатывают 20 мл солянокислой уксусной кислоты. Спустя 40 мин реакционную смесь упаривают в вакууме и остаток растирают с эфиром. Получают 2,0 г (99%) н-Leu-Asp-L-Thg NHn нсР, который, разлагаясь, плавится при

210 C; Rg 0,20.

4-. N-(трет-Бутилоксикарбонил)-L-триптофил-L-метионил-L-аспарагил-Ь-фенилглициламид.

К. раствору 2,2 г (5 3 ммоль) H-Leu-Asp-L-Whg-ЙН НСР (пример 6.3) в 60 мл диметилформамида в присутствии 1,48 мл (10,6 ммоль) триэтил. амина добавляют 2,32 r (5,8 ммоль)

ВОС-Тгр-()5u . Реакционную смесь упаривают в вакууме, остаток растворяют водой ° Первичный продукт (3,30 г) растворяют в 70 мл 80%-ного этанола, осветляют и кристаллизуют. Получают 35

2, 30 r (65% ) ВОС-Тгр-Leu- Asp- L-Phg- МН, который, разлагаясь, плавится при

205 †207; R< 0,40; (ос )д -7,3 (с 1,0, в диметилформамиде) .

5. Ь-Триптофил-L-лейцил-L-аспара- 40 гил-L-фенилглицинамид.

2,23 г (3,25 ммоль)ВОС-Тгр-(,eu-Asp-L-phd-МН (пример 6. 4) обрабатывают 25 мл солянокислого диоксана в присутствии 0,47 мл (6,7 ммоль) мер- 45 каптоэтанола. Через 10 мин .реакционную смесь разбавляют безводным эфиром, Гидрохлорид отфильтровывают и суспендируют в воде, с помощью три этиламина доводят значение рН суспензии до 7, отфильтровывают осадок и промывают водой. Получают 1,16 r (61%) Н-Тгр-Ьео -Asð-Ь-РИф-МН z, который, разлагаясь, плавится при 214215 C; Rg 0,40.

6. 2- (трет-Бутилоксикарбониламино- 55 окси) ацетил-L-триптофил-L-лейцил-?—

-аспарагил-Ь-фенилглицин амид.

К раствору 0,57 r (1,0 ммоль)

Н- 1 гр- Leu-Asp -Ь-РИ -й Н (пример 6.5) и 0,48 r (1,1 ммоль7ВОС-ОДРУ-ОРСР 60 (пример 1.9) в. 15 мл диметилформамида добавляют 0,14 мл (1,0 ммоль) триэтиламина; Смесь оставляют на ночь, упаривают в вакууме и остаток обрабатывают эфиром. Полученный первичный продукт (0,81 r) очищают способом, описанным уже для D-днастереомера, Получают 0,30 г (40,5%) ВОС-ОДРЧ -Trp-Leu-4sp-L-7hg-МН Продукт, разлагаясь, плавится при 196-198 C; Rg 0,35; (с6 )и О (с 1,0, в диметилформамиде) .

Наидено, %: С 58,35;"Н 6,20;

N 13, 07.

CDbH4rO)o Nv (N 737, 82)

Вычислено, %: С 58,60; Н 6,42;

N 13,29.

Пример 7 °

2-D- (трет-Бутилоксикарбониламиноокси ) пропинил-L-триптофил-L-лейцил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид.

К реакционной смеси из 1, 15 г (2, 03 ммоль) Н -Тгр-Leu-Asp D- Phg-NH (пример 5.4) и 1,0 г (2,2 ммоль) (ВОС-Р-ОАРа-ОРСР (пример 3.1) в 10 мл диметилформамида добавляют 0,29 мл (2, 03 ммоль) триэтиламина. Смесь выдерживают в течение ночи, затем упаривают в вакууме, остаток обрабатывают эфиром. Первичный продукт (1,56 r) растворяют в 50 мл 80%-ного этанола, содержащего 0,3 мп уксусной кислоты. Перед кристаллизацией раствор осветляют. Получают 0,86 г (56%)

ВОС-0-ОАГа-1-гр-Ьео †Asp -D-РйД-NHq, который, разлагаясь, плавится при

213214 С; и 02; Rg 04у (сс ) -287 (с 1,0, в диметилформамиде) .

Найдено,.%: С 59,10; Н 6,52;

N 13,20.

С37Н4д О р N (М 751,85)

Вычислено, %: С 59,111 Н 6,57;

N 13,04, Пример 8. 2-D-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси) пропионил-L-триптофил-L-лейцил-Ь-аспарагил-L-фенилглицинамид.

0,57 г (1, О ммоль) Н- Ггр — Leu — Asp-)->hg- NH2 (пример 6.5) И 0,50 r (1, 1 ммоль) ВОС-2-ОАРа -ОРСР (пример 3. 1) обрабатывают 15 мл диметилформамида в присутствии 0,14 мл (1,0 ммоль) триэтиламина..Смесь оставляют на ночь и затем упаривают в вакууме, остаток растирают с эфиром, первичный продукт (0,77 r) растворяют в небольшом количестве смеси 10 растворителей и пропускают через колонку с 30 F силикагеля. Элюирование осуществляют смесью 10 растворителей со скоростью 5 мп/ч. Фракции, содержащие продукт, объединяют, упаривают и получают 0,46 r продукта. Последний растворяют в 10 мл метанола и осаждают, добавляя 70 мп эфира. Получают

0,26 г (34,2%)ЗОС-Х)-ОАРа-Тгр-Leu-Asð-L-РИД-Ю,который, разлагаясь, плавится при 184-185 С; Н5 0,4; {сс ) +18,8 (с 1,0, в диметилформамиде).

Найдено, %: С 58,92; Н 6,401

N 12,88 °

С 7 Н4 0ю N7 (М 751,85)

Вычислено, %: С 59, ll; Н 6,.57;

N l3,О4.

Пример 9.

1. N-трет-Бутилоксикарбонил-L-норлейцинпентафторфениловый эфир.

664560

10,0 r (24,3 ммоль) ЗОС- HOe-QH °

«DCHA растворяют в смеси иэ 75 мл эфира и 25 мл 2 н. раствора серной кислоты. После разделения фаэ органическую фазу отделяют, затем промывают сначала 25 мл 2 н. раствора сер. йой кислоты, а затем водой. Эфирный раствор упаривают в вакууме. Маслообразный продукт (5,44 г) вместе с

4, 42 r (24 ммоль) пентафторфенола растворяют в 30 мл этилацетата. Раст вор охлаждают до О С, добавляют к нему 4,63 г (22,5 ммоль) дициклогексилкарбодимида. Суспензию в течение е l ч выдерживают на холоде, а затем фильтруют. Фйльтрат упаривают в вакууме, остаток растворяют в 50 мл н-гексана и раствор промывают 5 раз (по 20 мл)

5Ъ-ным раствором бикарбоната натрия, а затем 2 раза по 20 мл водой. Раствор высушивают и упаривают в вакууме. Маслообразный остаток на холоде затвердевает. Получают 8,12 г (91Ъ)

BOC-NOe -ОРДЕР, который плавится при 55-57 С; (са )и -26,8 (с 1,0, в диоксане); Rg 0,80; Ry 0,85.

2 . 4

Найдено, Ъ: С 51,51; Н 4,68;

F 24,66.

С 7 H gp 04NFg (М397, 35)

Вычислено, Ъ: С 51,39; ff 5,07;

F 23,91.

2. L-йспарагил-(трет-бутилэфир)— .-D-фенилглицинамид.

l0,б г (23,2 ммоль) 2,— Amp-(()

l,1 г 10Ъ-ного палладия на активированном угле. Через 3 ч сусленэию фильтруют, катализатор промывают диметилформамидом, промывную жидкость смешизают с фильтратом. Упаривают в вакууме, твердый остаток перекристаллизовывают иэ 100 -мл метанОла. Получают 5,5 г (74Ъ)Н-Авр-(0

В 4 0,15.

Найдено, Ъ: С 5980; Н 710„.

N 13, 18.

С, Н2«04Ng (И 311,28)

Вычислено, Ъ: С 59, 79; Н 7, 2 1;

N 13, 08.

3. N-трет-Бутилоксикарбонил-Ь-норвалил-L-аспарагил- -(трет-бутилэфир)-D-фенилглицинамид.

1,60 r (5,0 ммоль) Н-ASp-(О«Вы)-З;

-РИД-НН2 и 1,99 г (5,0 ммоль)ЗОС-N0e-OP P растворяют в 10 мл диметилформамида в присутствии 0,70 мл (5, 0 ммоль) триэтиламина. На следующий день реакционную смесь упаривают в вакууме и твердый остаток промывают эфиром. Получают 2,45 г (91,9Ъ)

ВОС-Нбе-Аар-(О Вц)-Э-РИЯ-НН2 который плавится при <07-208 C; Rf 0,75; f с«)

-62,8 (c 1, О„в диметйлформамиде) .

Найдено, Ъ: С 60,63; Н 8,04;

N 10,18.

16

С 27H420>N4 (М 534,64)

Вычислено, Ъ: С 60,65; Н 7,92;

N 10,48.

4. L-Норлейцил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид-гидрохлорид.

2,20 r (4,11 ммоль)ВОС-kl?e-A5p-ô ö)-D-РИД- NH2 обрабатывают 15 мл 4 н. раствора уксусной кислоты в соляной кислоте. Через 1 ч реакционную смесь упаривают в вакууме, твердый остаток обрабатывают эфиром и фильтруют. По10 лучают 1,70 г (99Ъ) Н-N(!e-Аьр- 0-РИД-NH2 HCE который, разлагаясь, плавится при 225оC; Н7 0,20; (o4 ) -63 7 (с 1,0, в диметилформамиде) .

5. N-трет-Бутилоксикарбонил-L15 -триптофил-L-норлейцил-1,-аспарагил-D-фенилглицин амид.

1,57 г (3,78 ммоль)Н-NEe-Amp-0-РИД-ЙИ2 НС0 и 1,52 r (3,78 ммоль)

ЗОС-Тгр-05и в 50 мл диметилформамида обрабатывают 1,06 мл (7,6 ммоль)

"0 триэтиламина. Смесь оставляют на ночь, затем упаривают в вакууме и остаток обрабатывают водой. Получают 2,45 г (97,5ь) ВОС-Тгр — й8е,-Asp-0-Рhg-NHg, который, разлагаясь, плавится при

25 217 С; R 0,35; (сс )и -32,7 (с 1,0, в диметилформамиде) .

Найдено, Ъ: С 61, 41; H 6, 86;

N 12,65.

СЗ4 Ы440ф, (М 664, 77)

Вычислено, Ъ: С 61,431 Н 6,67;

N 12,64. б. L-Триптофил-L-норлейцил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид-гидрохлорид.

2, 20 r (3, 32 ммоль) ЗОС-Т р- КРе-Asp35 -Э-1 4g-NH2 обрабатывают 25 wr 4 н. раствора диоксана в соляной кислоте в присутствии 1,20 мл {17 .ммоль), меркаптоэтанола. Через 15 мин раствор упаривают в вакууме, к остатку добав40 ляют эфир. Осадок отфильтровывают, получают 1,99 r (99Ъ) Н-Trp-NBe-Asp-П-РИД-НН2. )4С0 кОторый, разлагаясь, плавится при 217-221 С; В 0,35; .(ас j и -54,2 (c 1,0, в диметилформамиде) .

7. 2-D- (трет-Бутилоксикарбониламиноокси) пропионил-Ь-трицтофил-L-норлейцил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид.

1, 80 г (3,0 ммо ) Í-Vrp-Nee-Asp-э"phg-НН2 НСР, и 1,36 r (3,0 ммоль)ЗОС50 - О-ОРЯа-ОРСР в 30 мл диметилформамида обрабатывают в 1,26 мл

{9,0 ммоль) триэтиламина. Смесь оставляют на ночь, упаривают в вакууме и остаток обрабатывают водой. Осадок отфильтровывают, полученное вещество очищают хроматографией на силикагеле. Получают 0,99 г ВОС-0-ОАРа-Тгр-NEe"ABp-З phd-МН,который, разлагаясь, плавится при 211-212 C; R < 0,35;R4> 0,25; (с4)п -22,80 (с 1, О, в диметилформа60 миде) .

Найдено, Ъ: С 59,10, «1 6,30; И 31,21.

С 7 Н49 Ою Н 4 (М 751, 85)

Вычислено, Ъ| С 59,11; Н 6,57;

65 N 13,04.

664

Пример 10.

1. N-трет-Бутилоксикарбонил-Т—

-норвалин-пентафторфениловый эфир.

8, О r (20 ммоль)ВОС-Ми-OH DCHA с 60 мл эфира и 20 мл 2 н. серной кислоты встряхивают до полного растворения. Эфирный раствор промывают

20 мл 2 н. раствора серной кислоты, сушат и упаривают в вакууме. Оставшееся масло вместе с 3, 70 r (20 ммоль) пентахлорфенола растворяют в 25 мл этилацетата. К раствору добавляют

3,92 r (19 -ммоль) дициклогексилкарбодиимида и смесь выдерживают 1 ч при О С. Суспензию фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме и остаток растворяют в 50 мл н-гексана. Раствор промывают 2 раза (по 20 мп) 5Ъным раствором бикарбоната натрия, а затем 2 раза (по 20 мл) водой. Раствор упаривают в вакууме. Маслообразный остаток кристаллизуют на холоде.

Получают б, 21 r (81Ъ) ВОС- Nva- Op p который плавится при б О-62 C; R> 0, 70; (оС )р -32,3 (с 1,0, в диоксане) .

Найдено, Ъ: .С 50,06; Н 4,64;

F 24,63.

С Н 04NFg

Вычислено, Ъ: С 50, 14; Н 4, 73;

Г 24,78.

2. N-трет-Бутилоксикарбонил-L-норвалил-L-аспарагил- / †(трет-бу- 30 тилэфир)-D-фенилглицинамид.

1,60 г (5, О ммоль) Н-Asp-(OtBuI-D-РИ(-NHg (пример 9.2) и 1,91 r (5,0 ммоль) ВОС-Nva-ОРДЕР в 10 мп диметилформамида обрабатывают 0,70 мл 35 (5 ммоль) триэтиламина, Смесь оставляют на ночь, затем упаривают в вакууме и остаток обрабатывают эфиром. Получают 2,36 r (87,4%)j30C-Nva-Asp-(О Bu)-Q-РИ - NHg который плавится при 200 — 202 C; R< 0,75; (с6 ) -66,7 (с 1, О, в диметил формамиде ) °

Найдено, Ъ: С 60,08; Н 7,68;

N 10,96, С Н40ОТ N4 (M 520, 61)

Вычислено, Ъ: С 59,98; Н 7,7;

N l0, 76.

3. L-Норвалил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид-гидрохлорид.

2,0 r (3,84 ммоль)ВОС-Nva-Àsð-(О Ви)-D-РИ(5-NHg обрабатывают 15 мл 4 í. 50 раствора уксусной кислоты в соляной кислоте. Через 1 ч суспензию разбавляют эфиром и фильтруют холодной.

Получают 1,52 r (98Ъ) Н-Nva-Asp-D- Phg-NHp KCB Гидрохлорид плавится, разла- 55 гаясь, при 204 С Rf О 15 (+ )р 58 О (с 1,0, в диметилформамиде) .

4. N-трет-Бутилоксикарбонил-L-триптофил-L-норвалил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид.

1, 50 r (3, 74 ммоль) Н-Nva- Asp-D-phg-HH HCE и 1,50 r (3, 74 ммоль) ВОС—

-Trp -05u растворяют в 30 мл диметилформамида, добавляют 1,05 мл (7,5 ммоль) триэтиламина. Реакцион,ную смесь оставляют на ночь, затем

560 18 упаривают в вакууме, остаток обрабатывают водой и фильтруют. Продукт (2,36 r) перекристаллизовывают иэ

300 мл 80Ъ-ного этанола. Получают

1,54 r (66,2Ъ)ВОС Trp-Nva-Asp-D-РИ -НН;, т.пл. 240ОС (с разложением)," Rð 0,35; (x.)р -60,5 (c 1,0, в диметилформамиде).

Найдено, Ъ: С 60,66; Н 6,59;

N 12,57.

С Н4 08И (М 650,71)

Вычислено, Ъ: С 60,91; Н 66,51;

N 12,92.

5. L-Триптофил-L-норвалил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид-гидрохлорид.

1, 50 r (2,30 ммоль) ВОС-Tr p-Nva-Asp-D-РИ -NH обрабатывают 20 мп 4 н. раствора диоксана в соляной кислоте в присутствии 0,77 мл (ll ммоль) меркаптоэтанола. Спустя 30 мин суспензию упаривают в вакууме, твердый остаток обрабатывают эфиром и отфильтровывают. Получают 1, 34 r (99Ъ )

Н-Tr p-Nva-Asp-D-РИф-НН ° НСР,т. пл. 216 С. (с разложением); R О, 30; (о ) р-53, 3 (с 1, О, в диметилформамиде) .

6. 2-D-(трет-Бутилоксикарбониламиноокси)пропионил-L-триптофил-Ь-норвалил-L-аспарагил-D-фенилглицинамид.

1,24 r (2, 11 ммоль)Н- Г "р-Nva-Asp-D-phg- NK2 НЛи О, 95 r (2, 10 ммоль)ВОС-0-0AEa-ОРСР растворяют в 40 мп диметилформамиде и добавляют 0,88 мл (б;3 ммоль) триэтиламина. Реакционную смесь оставляют на ночь, затем упаривают и остаток обрабатывают водой и фильтруют, промывают„ водой и эфиром. Продукт (1,40 г) перекристаллизовывают из смеси пиридина, уксусной кислоты и воды, приготовленной в соотношении 20:б:11. Получают

О, 72 r ЗОС-D-OAOa- Г р -Йю-Asp-Р-РИр-)(Н2, т.пл. 210 C; Rf 0, 28; (cC ) > -26, 5 (с 1, О, в диметилформамиде) °

Найдено, Ъ: С 58,57у Н 6,20у

N 13,17. сзбнатОю ит (м 737,79)

Вычислено, Ъ: С 58,61; Н 6,42;

N 13,29.

Пример . 11.

1. Пентафторфениловый эфир 2-Ь†(трет-бутилоксикарбониламино)декановой кислоты.

К раствору 4,25 r (44,7 ммоль)BOC-Ade- ОН 2,94 г (16,0 ммоль) пентафторфенола в 40 мл этилацетата, ох-. лажденному до О С, добавляют 2,99 г (14, 5 ммоль) дициклогексилкарбодиимида. Реакционную смесь 1 ч перемешивают при комнатной температуре и

1 ч при ООС. Выпавший осадок отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме. Оставшееся маслянистое вецество растворяют в 40 мл н-гексана, Раствор в делительной воронке промывают

5 раз (по 20 мл) 5Ъ-ным раствором бикарбоната натрия в 2 раз