Способ обработки спермы

Способ обработки спермы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советсимк

Социалмстниесимк

Республик

< 673275

" 1

l,,r),— 1 I Т Б . pgj y ;-.j fq: яр ; .Г .ц

--" и (51) М. Кл. (6!) Дополнительное к авт. сина-ву (22) Заявлено 22. 1 2. 7 7 (21) 255 8042/3 0-1 5 с присоединением заявки №

А 61 Э 7/02 (53) УД (636.082. .453.5(088.8) Гавударатвванвб камащт ссср аа делам квабрвтвнкк я аткрмткк (23) Приоритет

Onóáëèê0âàíî15.07.79.ÁþëëåTåíb № 26

Дата опубликования описания 18.07.79

А. А. Ласков, Е. Л. Фомина и К. И. Мирошникова (72) Авторы изобретения

Всесоюзный научно-исследовательский институт коневодства (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОБРАБОТКИ СПЕРМЫ

Изобретение относится к области искусственного осеменения животных, а более конкретно к методам искусственного осеменения лошадей спермой, сохо раненной при -196 С.

Известны способы обработки спермы,, животных, включающие разбавление крио протекторами, эквилибрацию, а также инактивацию спермы в анаэробных усло виях до замораживания и последующей оксигенацией (1 ).

Известные способы обработки спермы для повышения живучести и оплодотворяющей способности разработаны применительно к определенному виду сельскохо-. зяйственных животных с учетом физиологических особенностей, физического и биохимического состава спермы производителей. В коневодстве, где острота отбора очень высока, а объект селекции слишкоМ дорог, повышение оплодотворяющей способности спермы отдельных же ребцов после оттаивания имеет особо важное значение. Вся работа строится

2 на использовании особо ценных жеребцов, .выдающихся по своим резвостным качествам. В практике много примеров, когда чем выше резвостной класс жеребца, тем (,ниже качественные показатели его спера мы (американский рысак Лоу Гановер

1,59; жеребец орловской породы Пион

2,00; арабский жеребец Мускат и др.).

Целью изобретения является повышение сохранности биологической активности сперматозоидов после замораживания.

Предложенный способ предусматривает приведение сперматозоидов в обратимо неактивное состояние при переходе в глубокий анабиоз (замораживание до о

-196 С), исключающее:нарушение струк» туры клетки и последующую активацию оттаянной спермы.

Инактивация спермы. заключается в гом, что свежеполученную сперму разбавляют известным способом (1)средой (криопротектором) и быстро (в течение, 1 мин) помещают в барокамеру, содержащую гипоксическую смесь с 93-967

673275

Контрольная с

Опьп ная (обработка гипоксией в барокамере) 2,4 + 0,3

4,7 + 0,05

5;0

5,0

Л и 4-7% О (наилучший состав 95%

Af и 5% д ). В барокамере создается давление 2-3 атм для ускорения диффузии газов через мембрану клетки. При указанных гипоксических и ги перба ри ческих условиях сперму выдерживают 2030 мин. Оксигенацию спермы проводят в газовой смеси, состоящей из 60-90%

0«в течение 8-10 мин.

Влияние гипоксического воздействия на сперматозоиды достоверно снижает подвижность "перед замораживанием", однако после оттаивания подвижность сперматозоидов в опытной партии спермы достоверно выше, чем в контрольной.

Влияние гипоксической обработки на подвижность сперматозоидов в баллах приведено в табл. 1.

Изменение биохимических показателей приведено в табл. 2.

2О

Исследования проводят на сперме жеребцов, каждый овулят делится на 2 час" .ти: опытную и контрольную. Данные, приведеннь«е в табл. 2, показывают, что со.держание аденозинополифосфатов после оттаивания достоверно уменьшилось в контрольной партии, тогда как в опытных образцах этот показатель остается без ,изменений.

Аденоэинополифосфаты в основном синтезируются в ците щазмастической оболоч.ке сперматозоидов и в мембранах мято» .хондрий. Нарушения механизма синтеза

АТФ связаны со структурными изменениями в этих органеллах. Об этом можно cy- >> дить йо данным увеличения содержания неорганического фосфора после замораживания, которое происходит не только за счет расщепления АТФ+АДФ, но и за счет

1 поступления его в погибшие и поврежденные сперматозоиды,из внешней среды при разрушении их оболочки и изменении ее ,й1«оницательности..

Таким образом, оценка спермы по со» держанию аденозинополифосфатов, неорга- 4

4 нического фосфора и активности "щелочной фосфатаэы" дает точную картину биологической "полноценности" оттаянной сп ермы.

Активизация оттаянной спермы проводить ся путем обработки газовой смесью, со» деРжащей 60-90% О в барокамере при давлении 2-3 атм в течение 8-10 мин.

Таким образом, активизация спермы достигается путем оксигенирования при избыточном давлении. Проведенные сравни-: тельные исследования на сперме жеребцов показывают повышение подвижности сперматозоидов после оксигенации.

Влияние кратковременной оксигенации спермы в гипербарических условиях на подвижность сперматозоидов приведено в табл. 3.

Насыщение оттаянной спермы кислоро-. дом увеличивает. подвижность спермато-зоидов. Данные этой таблицы по переживаемости снимают сомнения относительно того, что кислород, повышая;окислительные процессы, вызывает быстрое. рас-. ходование питательных веществ половых клеток и ускоряет их гибель. Образцы спермы, подвергнутые оксигенированию после оттаивания, имеют более высокую переживаемость.

Особый интерес представляет вопрос о влиянии на оплодотворяющую способ.ность спермы.

Зажеребляемость подопытных кобыл приведена в табл. 4.

Результаты таблицы убедительно показывают, что оплодотворяемость кобыл опытной группы значительно выше, чем в контрольной, причем. эта разница получена в 2-х разных заводах. Преимущество опытной группы по сравнению с контрольной в 50,3% оказалось вполне достоверным, (Р - 0,99).

4 2 + 0 07 2 8 «" 0 1. 673275 Таблица 2.Контрольная

Таблица 3

16 2,8 0,1 3,2 0,12

103 > 5,0

Опытная

Контрольная

16 2,4+ 0,1

67+ 4,8

Т аблица 4

С Б

К н а

Теодолит опыт

25 контроль

Мускат опыт

25 контроль

По заводу опыт

62,5

25,0

12 контроль

Опытная (обработка гипоксиИ в барокаме ре) 16 2,43 0,3 1,38 0,2 3,6+0,4 7,2+0,2 6,6М,9 4,9 1

16 2,2810,3 . 2,21+0,2 3,8+0,2 4,9 0,4 5,9+1,0 3,0+1

673275

Продолжение табл, 4

Опытный конный завод

Лоу Гановер опыт

2 2

3 . 3

100

33,3 контроль

Колчедан опыт

100

0 контроль

Пролог опыт

1. 100

1 100 контроль

По заводу опыт

100 контроль

28,5

Всего

17 13

19 15

10 76,9

4 26,6 опыт контроль

Составитель A. абакаров

Редактор Л. Новожилова Техред М. Петко Корректор Е. Лукач

Заказ 3956/4 Тираж 671 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж«35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Формула изобретения

1, Способ обработки спермы, преимущественно жеребцов, включарщий разбавление, инактивацию в газовой среде, замораживание-оттаивание и оксигенацию, отличающийся тем,что,с целью повышения сохранности биологи 4р ческой активности сперматозоидов после замораживания, инактивацию проводят в барокамере гипоксической смесью, состоящей из 93-96% 2 и 4-7% О, при давлении 2-3 атм s течение 20-30 мин..4g

2. Способ по и, 1, о т л и ч а ю шийся тем, что оксигенацию спермы проводят в газовой смеси, состоящей из

60-90% О в течение 8-1 0 мин.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Кундьппев П. П. Значение анабио за и аэробиоза s технологии замораживания семени быка. "Животноводство

% 4, 1973, с. 79.