Способ выявления энтеротоксигенных штаммов стафилококков

Способ выявления энтеротоксигенных штаммов стафилококков

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6() Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 090277(21) 2450659/28-13

Союз Советских

Социалистических

Республик ро673656 (53)м. Кл.2 с присоединением заявки №

С 12 К 1/04

Государственный комитет

СССР ио дедам изобретений и открытий (23) Приоритет (53) УДКб1б-093 (088. 8) Опубликовано 150779. Бюллетень ¹ 2б

Дата опубликования. описания 150779 (";) w т;.

A. И. Коротяев и Е. A. Керопиан ,г-..., у / т

° в в

Кубанский государственный медицинский институт. имени Красной Армии (72) Авторы иЗОбретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЦЦЕЛЕНИЯ ЭНТЕРОТОКСИГЕННЫХ

ШТАММОВ СТАФИЛОКОККОВ

Изобретение относится к области медицины, а именно лабораторным способам выявления энтеротоксигениости стафилококков.

Известен способ выявления энтеротоксигенных штаммов стаФилококков путем посева исследуемого материала на питательную среду с последующей инкубацней посевов (l,), Однако известный способ не обес-, печивает высокой точности.

Целью изобретения является повышение точности и ускорение способа.

Цель достигается тем, что по предлагаемому способу посев осуществляют на среду, содержащую PHK„ и после инкубирования определяют активность образовавшейся РНК-азы и по этому показателю выявляют энтеротокснгенные штаммы стафилококков.

Способ осуществляют следующим образом.

На питательную среду, например мясо-пептонный, агар, содержащий рибонуклеиновую кислоту(РИК),.Производят посев суточной агаровой культуры исследуемого штамма.

Используют препарат сухой дрожжевой полимерной РНК, который добавляют из расчета 0,2 г на 100 мл расплавленного и остуженного до

45-50 2%-ного мясо-пептонного агара. Дабавление PHK к агару вызывает сдвиг реакции в кислую сторону, поэто му после внесения ее в агар и перемешивания неббходимо довести рй до

7,5-8,5 путем добавления 20%-ного раствора едкого натра под контролем рН-метра. Среду стерилизуют текучим паром в течение 20-30 мин и разливают в чашки Петри по 8-10 мл. Чашки со средой подсушивают при 37 С 30-45 мин °

На подсушенную среду производят посев приготовленной обычным способом суточной агаровой .культуры, посев делают бпяшками диаметром 8-..

10 мм. Инкубируют при,37 С в течение

18-24 ч. После этого заливают поверхность питательной среды 5-10 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты. Вся поверхность среды, содержащая РНК, образует видимый на глаз преципитат, кроме прозрачной сФеры вокруг,макроколоний (бляшек), которая образуется за счет действия РНК-азы.

Прозрачную зону вокруг макроколоний измеряют линейкой, начиная от края микроколднии до края зоны просветлечия, Ширина просветления зависит от активности РНК-аэы. По наличию и

673656 ле энтеротоксиген112

12,5

85,3

14

Составитель С. Малютина

Тех е А ° Богдан Ко екто Н. Стец

Ре акто Н. Коган

Заказ 4017/25 Тираж 525 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва Ж-35 Ра шская наб. . 4 5

Филиал ППП Патент, г. ужгород, ул. Проектная, ширине эоны просветления судят о способности исследуемого штамма вырабатывать энтеротоксин.

Ширина зоны просветления более

4 мм в 100Ú случаев свидетельствует об энтеротоксигенности.испытуемого, штамма; 2-4 мм — в 75-80%, а менее

2 мм — в 47-50% случаев. Отсут ствие зоны деполимериэации (просветления) вокруг бляшек в 87,5Ъ случаев свиТаким образом 85,3% культур стафилококков, образующих РНК-азу, энтеротоксигенны,:а среди штаммов, не продуцирующих РНК-аэу, число таких культур составляет лишь 12,5%.

Предложенный способ позволяет определить способность штамма стафилококка вырабатывать энтеротоксин за 18-24 ч, т. е. экономить время исследования на 2-3 суток; кроме того, дает меньше неспецифических реакций, повышает точность выявления энтеротоксигенных штаммов.

Формула изобретения

Способ выявления энтеротоксигенных штаммов стафилококков путем посева детельствует о неспособности исследуемого штамма продуцировать энтеротоксин ° :

Для подтверждения существующей взаимосвязи между энтеротоксигенностью штамма стафилококка и активностью PHK-азы исследовано 180 культур стафилококков, выделенных из молока и сыра. Полученные данные приведены в таблице.

I исследуемого материала на питательную среду с последующей инкубацией посевов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, посев осуществляют на среду, содержащую РНК, и после инкубирования определяют активность образовавшейся РНК-азы и по этому показателю выявляют знтеротоксигенные штаммы стафилококков.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Под ред. Биргера О. М. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования

М., 1973, с. 428,