Способ получения инфекционного материала
Иллюстрации
Показать всеРеферат
О П И С А H H E (i()6766I0
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советскнх
Соцнапистнческих
- Республик
1» .= «;»; 6
:»» 11 °,,.:.» j»»»4)»;s f (51) M. Кл.
С 12К 1/00
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 26.05.77 (21) 2490342/30-15 с присоединением заявки № (43) Опубликовано 30.07.79. Бюллетень № 28 (45) Дата опубликования описания 30,07.79 (53) УДК 663.1.13 (088.8) по делам изобретений н открытий (72) Авторы изобретения
А. В. Хотянович, Н. А. Бексеева, P. М. Ильина, У. У. Расулев и В. А. Тагирова
Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии и Среднеазиатский научноисследовательский институт защиты растений (71) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОГО МАТЕРИАЛА
THIELAVIOPSIS ВА$1СОЬА
Государственный комитет (23) Приоритет
Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и фитопатологии. Оно может быть использовано для получения инфекционного материала фитопатогенных грибов с целью искусственного заражения сельскохозяйственных растений для получения высокоустойчивых сортов путем создания инфекционного фона.
Известен способ получения инфекционного материала грибов на твердом субстра- 10 те (1).
Известен также способ получения инфекционного материала фитопатогенных грибов выращиванием их на зерновом материале (2). 15
Однако ряд грибов, в том числе Thielaviopsis, почти не дают роста на зерновом материале (усваиваются лишь имеющиеся в небольшом количестве простые сахара и аминокислоты, а полисахариды и белки зерна не усваиваются).
Целью изобретения является производственный способ получения инфекционного материала, не требующий отделения биомассы от субстрата, обеспечивающий сохранение жизнеспособности материала и его вирулентности в течение длительного периода времени, повышающий выход эндоконидий и хламидоспор, 2
Поставленная цель достигается тем, что гриб Thielaviopsis basicola выращивают на пшене, пропитанном в соотношении 1: 1 раствором, содержащим ферментативные гидролизаты казеина, дрожжей и/или крови в количестве 100 — 150 мг % аминного азота и дрожжевой экстракт в количестве 0,05—
0,1% к весу пшена.
Питательной средой могут служить;
1) смесь картофельного отвара и белкового гидролизата, например, гидролизата крови — аминопептида — при следующем соотношении компонентов:
Пшено 0,9 — 1,1 кг
Картофельный отвар (200 г/л) 750 — 850 мл
Аминопептид 190 — 210 мл
2) смесь дрожжевого экстракта и белкового гидролизата, например аминопептида при соотношении компонентов:
Пшено 0,9 — 1,1 кг
Дрожжевой экстракт 0,9 — 1,1 r
Аминопептид 190 — 210 мл
Вода дистиллированная 750 †8 мл
Пр им ер. 1 кг пшена заливают 200 мл аминопептида и 800 мл картофельного отвара (200 г/л), либо 200 мл аминопептида и
1 г дрожжевого экстракта в 800 мл воды и кипятят в закрытом сосуде на слабом огне
676610
Формула изобретения
Составитель М. Мирзаев
Редактор Н. Хубларова
Техред А. Камышникова Корректор Л. Брахнина
Заказ 1684/2 Изд. Ко 476 Тираж 549 Подписное
НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Я-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 в течение 15 — 20 мин до полного поглощения жидкости пшеном. После этого пшено рассыпают в кюветы, охлаждают, разминают образовавшиеся комки и помещают в стерильные сосуды, предназначенные для выращивания — колбы, бутыли. Сосуды заполняют пшеном на 30 — 40% объема и закрывают ватными пробками или тампонами. Стерилизуют при 1,2 ати в течение
45 мин. Стерильный субстрат равномерно 10 инокулируют (из расчета 200 мл на 1 кг пшена) 24 — 3G-часовой вегетативной культурой гриба, полученной глубинным методом на смеси картофельного отвара (либо дрожжевого экстракта) и аминопептида, 15 взятых в той же пропорции, что и для импрегнирования зерна.
Культуру Thielaviopsis выращивают при
24 — 36 С в течение 10 суток при перемешивании встряхиванием в первые трое суток.
После завершения выращивания культуру гриба вместе с пшеном сушат одним из известных способов, а при тепловой сушке— при температуре не выше 40 С, растирают комочки. Жизнеспособность полученного 25 препарата определяют проращиванием на картофельно-глюкозном агаре.
Препарат, полученный описанным способом, обладает высокой вирулентностью по отношению к растениям при длительном хранении (сухого препарата) в обычных условиях.
Способ получения инфекционного материала Thielaviopsis basicola, включающий выращивание гриба на твердых питательных средах, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода эндоконидий и хламидоспор, а также повышения вирулентности препарата, гриб выращивают на пшене, пропитанном в соотношении 1: 1 раствором, содержащим ферментативные гидролизаты казеина, дрожжей и/или крови в количестве 100 — 150 мг % аминного азота и дрожжевой экстракт в количестве 0,05—
0,1% к весу пшена.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Калунянц К. А, и др. Ферменты, получение и применение в народном хозяйстве.
Труды ВНИИсинтезбелок, вып. 1. М,, 1972, с. 270.
2. Мирзаев М. Н, Роль почвенной микрофлоры в токсикозе винограда, пораженного филлоксерой. Автореф. канд. дисс. М., 1973, с. 5.