Способ размножения люцерны

Способ размножения люцерны

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. саид-ву— (22) Заявлено 220377 (21) 2465483/30-15 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 15.08.79. Бюллетень М 30

Дата опубликования описания 1 508.79

Союз Советских

Сов(иалистических

Реслублик ощ 679 1 90

К„г

Л 01 Н 3/00

Государствеииый комитет

СССР ио делам изобретений и открытий (53) УДК 6з1. 53 з (088.8) А.В.Ме енцев

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции и семеноводстве, в исследованиях по фитопатологии и морфогенезу растений.

Известен способ регенерации растений люцерны, in-vitro из каллусов, образовавшихся иэ пыльников и завязей с использованием питательной среды, ð в которую введен компонент неопределенного состава (дрожжевой зкст. ракт (1) .

Недостатком этого способа является то, что регенерация растений возможна15 лишь при наличии цветущих форм, вслед ствие чего данный способ не применим в работе с растениями, находящимися в более ранней фазе развития, нецветущими гаплоидами и т.п.

Цель изобретения — ускорение размножения и оздоровления растений от бактериальной, грибной и вирусной инфекции.

Поставленная цель достигается тем,25 что листочки, то есть пластинки тройчатого листа культивируемых сортов и гибридов люцерны стерилиэуют в

0,1%-ном водном растворе диоцида и после трехкратной промывки в дистиллированной воде делают на каждом из них ряд надрезов по всей площади пластинки и помещают на основную питательную среду Гамборга В, в которую дополнительно вводят 60008000 мг/л бактоагара и 200-300 мг/л нитрата аммония, содержание сахарозы увеличивают до 25000-35000 мг/л и вносят следующие фитогормоны:

2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту

8-16 мг/л, кинетин 6-10 мг/л и 4 -нафтилуксусную кислоту 0,1-0,5 мг/л.

РН среды доводят до 5,8-6,0. Состав среды Гамборга В представлен ниже.

Сахароза составляет 20 г/л среды (2)

Материал инкубируют 2-3 недели при непрерывном освещении люминесцентными лампами (освещенность 0,54,0 тыс.лк), температуре 26 1 С и относительной влажности воздуха 95100Ъ в закрытых прозрачных сосудах.

В случае появления на листочках бактериальной или грибкой инфекции их удаляют с частью прилегающей к ним питательной среды; вирусная инфекция устраняется под воздействием фитогормонов.

Через 2-3 недели развившиеся каллусы делят на 3 — 5 частей и пере—

679190

Макроэлементы, Mr/ë Иикроэлементы, мг/л Витамины, мг/л

Млзо4 Н О

09

Na MoO, 2Н О

CuSO4

CoCIg 6Н О

Никотиновая кислота,KNO 2500

NaH РО4 H O 150 (NH4)< 804. 134

MgSO47H О,. 250

СаСХ 2Н О 150

FeCO4 7Н О 28

Г

Трилон Б 3 7

Тиамин -НС1 10

Пиридоксин НС1

Ииоинозит 100

0,25

0,025

0,025

0,75

2пЯО4 7Н О

ЦНИИПИ Заказ 46 32/1

Тираж 755 Подпи сно е

Филиал ППП Патент, r Ужгород, ул. Проектная, 4 носят на ту же питательную среду, но без нитрата аммония, в которой вышеназванные три гормона заменены одним бенэиламинопурином иэ расчета

0,2-0,8 Mr/л, и культивируют при ех же условиях в течение 2-4 недель 5 ,(длину фотопериода можно сократить до 16 ч в сутки) .

Появившиеся на каллусах зеленые стеблевые почки и проростки переносят на агаризованную среду Гамборга 10

В>, разбавленную вдвое, беэ гормонов °

По мере развития растений на этой среде и появлении у них 2-3 тройчатых листьев и корней их пересаживают в почву и выращивают в обычных условиях.

Проводилось размножение и оздоровление синей и желтой люцерны. При этом 80% листочков, помещенных на пиФормула изобретения 35

1 . Способ размножения люцерны

in vitro, включающий получение каллусов на питательной среде с последующей пересадкой их на среды, способствующие образованию почек и раз- 40 витию из них растений, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью ускорения размножения и оздоровления растений от фитопатогенной инфекции, в качестве исходного материала для образования каллусов используют листочки, на каждом иэ которых предварительно делают надрезы по всей площади листовой пластинки, помещают их на питательную среду Гамборга В и после образования каллусов последние пересаживают на среду с бенэиламинопурином, а образовавшиеся на каллусах почки переносят на разбавленную агаризованную среду Гамборга В без гормонов.

2. Способ по п.1, о т л и ч а ю шийся тем, что в среду Гамборга . тательную среду с тремя фитогормонами, образовали каллусы. После деления последних на 3-5 частей и переноса на вторую среду с 0,2 мг/л бензиламинопурина на каждом кусочке пересаженного каллуса образовалось в среднем две почки, которые при пересадке на третью среду без гормонов развивались в растении с 2-3 тройчатыми листьями и корнями. Последние пересаживали в почву и выращивали в обычных условиях.

Полученные растения — регенераты были здоровыми и морфологически не отличались от исходных растений.

Использование предлагаемого изобретения позволит ускоренно размножать растения люцерны и освобождать исходный материал от бактериальной, грибной и вирусной инфекции.

В вводят 6000-8000 мг/л бактоагара, 200-300 мг/л нитрата аммония, 816 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты, 6-10 мг/л кинетина и 0,10,5 мг/л с -нафтилуксусной кислоты, а концентрацию сахарозы увеличивают цо 25000-35000 мг/л.

3. Способ по пп.1,2,о т л и ч а юшийся тем, что в питательную среду Гамборга В вводят 6000-8000 мг/л бактоагара, концентрацию сахароэы увеличивают до 25000-35000 мг/л и добавляют 0,2-0,8 мг/л бензиламинопурина.

Источники информации, принятые во.внимание при экспертизе

1. 7.W.Saunders, Е.P.Bingham

"Cropscience", 1972,12,6, р.804-808.

2. Nutrient reguirement of suspension cuItures of Soybean root ceIIs

0.2.Gamborg, R.А.WiIIer, К.Gima, Exper1mentaI CeII Research, 50,1, р.151-158 (1968),